芪蟾口服结肠靶向片初步药效学研究

目的:观察芪蟾口服结肠靶向片浸膏对小鼠的急性毒性反应,以评价其安全性;研究芪蟾口服结肠靶向浸膏对H22荷瘤小鼠的抗肿瘤作用。方法:采用经典的急性毒性试验方法测定芪蟾口服结肠靶向浸膏的半数致死量(LD50),观察急性毒性症状,记录死亡数;建立H22荷瘤小鼠模型,随机分成6组,分别给予芪蟾口服结肠靶向浸膏高、中、低剂量灌胃,临床汤剂组灌胃,化疗药物5—Fu腹腔注射单独应用,生理盐水灌胃。正常饲养,给药10天后,摘眼球取血,处死小鼠,分别取出肿瘤组织、小鼠脾脏、胸腺,进行抑瘤率、脾指数、胸腺指数的检测。采用酶联免疫法测定TNF-α、IFN-γ细胞因子水平。结果:芪蟾口服结肠靶向片浸膏小鼠口服LD50为43.26g.kg-1,相当于人临床日用量的19.6倍,;芪蟾口服结肠靶向浸膏各剂量组均可有效抑制肿瘤生长,5-Fu腹腔注射单独应用的抑瘤率为40.52%,芪蟾靶向浸膏3个剂量组的抑瘤率分别为37.41%、33.21%、31.85%。与5-Fu组比较,芪蟾口服结肠靶向浸膏各剂量组能显著提高小鼠脾脏、胸腺的重量(P<0.05)。与模型对照组相比,能明显提高细胞因子TNF-α,IFN-γ的水平(P<0.05)结论:芪蟾靶向浸膏各剂量组均可不同程度抑制肿瘤的生长,以芪蟾靶向浸膏低剂量组效果最为明显,其作用机制与增加小鼠免疫器官重量、增加细胞因子TNF-α,IFN-γ水平等有关。提示芪蟾靶向浸膏有抗肿瘤作用,为临床应用提供科学的实验数据,对临床有实际的指导意义。

芪蟾口服结肠靶向片(浸膏)及组成药味提取物体外抗氧化作用的研究

目的:研究芪蟾口服结肠靶向片(浸膏)及组成药味提取物体外抗氧化作用。方法:采用体外试验,对芪蟾口服结肠靶向片(浸膏)及组成药味提取物抑制红细胞溶血、抑制大鼠肝匀浆自发性脂质过氧化、清除DPPH自由基能力、还原能力、清除·OH能力等多个方面进行了系统研究。结果:芪蟾口服结肠靶向片(浸膏)及组成药味提取物对红细胞溶血均具有很好的保护作用,能有效地抑制肝匀浆自发性过氧化;并能有效地清除DPPH自由基以及·OH;对铁离子均具有良好的还原能力。结论:芪蟾口服结肠靶向片(浸膏)及组成药味提取物均具有良好的体外抗氧化能力。

芪蟾口服结肠靶向片中有效组分对CT26结肠癌小鼠移植瘤的作用及其机制研究

目的:探讨芪蟾口服结肠靶向片中有效组分对CT26结肠癌小鼠移植瘤的作用及其可能的作用机制。方法:建立CT26结肠癌细胞小鼠皮下移植瘤模型,随机分为模型组、25mg/kg 5-氟尿嘧啶(5-FU)组、芪蟾口服结肠靶向片中有效组分22g/kg、8.8g/kg组。5-FU组腹腔注射给药,隔日1次;芪蟾口服结肠靶向片中有效组分各组灌胃给药,每日1次,共18天。末次给药24h后剖取瘤体,计算抑瘤率;苏木素-伊红(HE)染色法观察各组移植瘤组织病理形态;免疫组化法检测各组移植瘤组织中B细胞淋巴瘤/白血病基因2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达,血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白表达。结果:芪蟾口服结肠靶向片中有效组分22g/kg、8.8g/kg组对CT26结肠癌小鼠移植瘤生长具抑制作用,抑瘤率分别为33.90%、26.72%。HE染色结果显示与模型组相比,芪蟾口服结肠靶向片中有效组分各组均出现不同程度的肿瘤细胞坏死。免疫组化结果显示芪蟾口服结肠靶向片中有效组分各组均能提高Bax蛋白IOD值,降低Bcl-2、VEGF、HIF-1α蛋白IOD值,其中芪蟾口服结肠靶向片中有效组分22g/kg组VEGF蛋白IOD值低于5-FU组。结论:芪蟾口服结肠靶向片中有效组分对CT26结肠癌小鼠移植瘤生长具抑制作用,其机制可能与上调Bax蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达,诱导肿瘤细胞凋亡;下调VEGF、HIF-1α蛋白表达,抑制肿瘤血管生成有关。

芪蟾口服结肠靶向片的质量标准研究

目的:建立芪蟾口服结肠靶向片的质量控制标准。方法:采用TLC法对制剂中黄芪、干蟾皮、苦参进行定性鉴别;采用UPLC和HPLC法对制剂中黄芪甲苷、酯蟾毒配基和华蟾酥毒基、苦参碱进行定量分析。结果:薄层色谱主斑点清晰、特征明显、专属性强;黄芪甲苷线性范围为0.233 6～0.817 6μg(r=0.999 6,n=6),平均回收率为99.66%(RSD 1.14%);酯蟾毒配基线性范围为0.001 75～0.010 5μg,(r=1.000 0,n=6),平均回收率为100.44%(RSD 1.94%);华蟾酥毒基线性范围为0.003 51～0.021 06μg,(r=1.000 0,n=6),平均回收率为99.57%(RSD 2.73%);苦参碱线性范围为0.336 8～1.178 8μg,(r=0.999 8,n=6),平均回收率为100.30%(RSD 1.11%)。结论:检测方法简便、可靠、重复性好,可作为芪蟾口服结肠靶向片的质量标准控制方法。