沙田柚花柱蛋白对花粉管生长的影响

本文以沙田柚及其授粉树种酸柚为材料，对其花粉在不同培养介质中的萌发率进行测定，筛选了０２～０４ｍｏｌ／Ｌ聚乙二醇－４００（ＰＥＧ－４００）＋００１％硼酸作为花粉萌发介质。用授粉后３ｄ的花柱提取液进行沙田柚、酸柚花粉萌发抑制实验，花柱提取液对自交花粉萌发无抑制作用，明显地抑制花粉管的生长。其中以花柱提取液的３５％饱和度硫酸铵级分对花粉管伸长的抑制最明显。模拟了花粉在雌蕊中的生长方式，进行花粉萌发生长，能收集到较多的花粉管，为研究花粉管的Ｓ－糖蛋白提供了材料。

外源亚精胺对鸭梨自花授粉花粉管伸长及花柱蛋白表达的影响

为探讨外源多胺调控鸭梨自交不亲和的生理生化机制,分别以自花授粉和外源亚精胺处理后1~3 d的花柱为试材,测定了不同处理不同时期花粉管生长发育动态,利用双向电泳技术和质谱分析技术分析了外源亚精胺处理前后不同时期鸭梨花柱蛋白的差异表达。结果显示：与对照相比,不同浓度的Spd处理均能极显著促进花粉管生长,0.25 mmol/L Spd处理72 h后可使大量花粉管到达花柱基部;在自交花柱电泳图谱中发现了3种特异蛋白质,A蛋白质Mr A=28.0 k Da,p I=5.7;B蛋白质Mr B=28.5 k Da,p I=5.7;C蛋白质Mr C=22.0 k Da,p I=5.3,这3种特异蛋白质可能与自交不亲和性相关;质谱分析获得了2个较好的蛋白点,分别为推定和假定蛋白。

沙田柚自交、异交花柱蛋白质的双向电泳

比较分析了沙田柚自交授粉花柱和异交授粉花柱的双向凝胶电泳图谱 ,两者的蛋白质分布格局相似 ,具有重叠性 ,可分析出 1 0 0多种蛋白质 .在自交花柱电泳图谱中发现 3种特异蛋白质 ( A,B,C) ,A蛋白质 Mr A=3 2 .0 ku,p I=7.2 ;B蛋白质 Mr B=2 6.0 ku,p I=7.2 ;C蛋白质 Mr C=2 5.0 ku,p I=6.5.这 3种特异蛋白质可能与自交不亲和性相关 .

沙田柚花柱蛋白对其花粉萌发及生长的影响

以沙田柚花粉为试材,研究比较了自交和异交花柱提取蛋白对花粉萌发和花粉管生长的影响。结果表明:添加沙田柚自交、异交花柱蛋白后,花粉的萌发未受影响。但花粉管的生长情况在二者之间有明显差异,添加异交花柱蛋白对花粉管的生长没有影响,而添加自交花柱蛋白的花粉管的生长受到明显抑制。PAGE电泳显示自交花柱蛋白处理的花粉管出现了1条特异蛋白带(Rf值=0.81);SDS-PAGE电泳检测到自交花柱蛋白处理的花粉管出现了相对分子量为35.0kD和37.5kD的2条特异蛋白带;IEF-PAGE电泳的结果表明,在自交花柱蛋白处理的花粉管蛋白中出现了等电点为5.85和6.20的2条的特异蛋白谱带。

沙田柚花柱S-糖蛋白的纯化和N-端序列测定

以人工自花授粉 3 d后的沙田柚 (Citrusgrandisvar.Shatinyu Hort.)花柱为材料 ,切取 1 /2部位处花柱组织 ,匀浆后 ,进行抽提和硫酸铵盐析 ,得到 3 5%级分的蛋白质粗提液 ,此液经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 ,显示出 9条蛋白质带 ;经 Con A-Sepharose 4 B亲和柱层析 ,特异峰 (S#)仅显示 1条蛋白质带 ,恰好是 3 5%级分中近正极端的 2种蛋白质中的一种最优势蛋白质 ;部分生化性质测定结果表明 ,该蛋白质为碱性糖蛋白 ,糖含量为 9.2 % ,由 2个亚基组成 ,相对分子质量分别为 3 8.0 ku,3 2 .0 ku,等电点分别约为 7.5,7.2 ;生物活性测定结果表明 ,该蛋白质能抑制离体 (in vitro)萌发自花花粉花粉管的生长 ;氨基酸序列分析表明 ,3 2 .0 ku组分 N-端 1 5个氨基酸序列与矮牵牛 ,花烟草等的

粉蓝烟草(Nicotiana glauca)花柱S-糖蛋白的发达及对花粉管生长的影响

本文报道了粉蓝烟草花柱S-糖蛋白的发达特性及对花粉萌发和花粉管生长的影响。开花后1～20d内,花柱S-糖蛋白在柱头下1～1.scm处大量表达,与活体上花粉管停止生长的时间和部位相吻和。在培养基中加入S-糖蛋白时,不同来源的花粉均能顺利萌发,但是同源花粉管生长却被特异性地抑制,而非同源花粉则能继续正常生长。在优化离体培养条件下,花粉管生长速率仍低于在活体上的生长速率。与对照相比,加入s-糖蛋白后,花粉管生长长度变异性增加。

花粉萌发特性对扁桃不亲和强度差异的影响

以新疆主栽扁桃8个品种和10个杂交组合为对象,研究其自交以及杂交组合的花柱离体培养花粉管的生长情况,花柱蛋白浓度对不同品种花粉的萌发生长抑制作用的影响,并分析其对扁桃自交不亲和性影响的强度差异。结果表明:在花柱1/3处的花粉管数量差别较小,而在花柱1/2处花粉管数量显著不同。花柱蛋白在低浓度下对花粉萌发和伸长没有抑制作用,蛋白浓度超过2.0μg/μL时才发生轻微的抑制作用,并且随蛋白浓度的升高抑制作用增强,表明高浓度的花柱蛋白比低浓度的花柱蛋白更能诱导不亲和的发生。

等电聚焦电泳法测定羽衣甘蓝自交不亲和性的研究

利用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳法，研究了羽衣甘蓝强自交不亲和系、弱自交不亲和系与自交亲和系的柱头和花粉蛋白质谱带，并进行自交，以考察亲和指数。结果表明：强自交不亲和系的成熟柱头（S）和弱自交不亲和系的成熟柱头的蛋白谱带有明显差异；强自交不亲和系有特异谱带的出现，而弱自交不亲和系和自交亲和系柱头上没有特异谱带。对比自交不亲和系开花前2～3d的柱头（S’）与成熟柱头（S）的蛋白质谱带发现了S特异蛋白质的准确位置，其等电点为8.5～9.1。此法可用于鉴定羽衣甘蓝的自交不亲和性，用同种方法处理花粉，没有发现自交不亲和系的特征谱带．

甜樱桃品种红灯与佐藤锦的S基因型测定

以 9个甜樱桃品种为试材 ,利用等电点聚焦凝胶电泳分离花柱S -糖蛋白 ,通过与几个已知S基因型的品种比较 ,可以确定未知品种的S基因型。结果表明 ,红灯的S基因型可能为S4S6,佐藤锦可能为S3 S6。

离体条件下微丝骨架解聚剂和稳定剂对梨自交不亲和性花粉萌发和花粉管生长的影响

以2个自交不亲和性梨品种“今村秋”和“丰水”为试材，在离体条件下通过花粉培养试验研究了不同浓度的微丝稳定剂鬼笔环肽（phalloidin）和微丝抑制剂细胞松弛素B（cytochalasin B）对梨花粉萌发率和花粉管长度的影响。结果表明：1）低浓度（10μg／ml）鬼笔环肽能促进花粉萌发和花粉管生长，但高浓度对花粉萌发和花粉管的生长具有抑制作用；细胞松弛素B抑制花粉萌发和花粉管生长，并且抑制效果随着浓度的增加而增强。2）细胞松弛素B和异花花柱S糖蛋白（S-Rnase）共同处理抑制了花粉萌发和花粉管生长，而一定浓度的鬼笔环肽能恢复自体花柱S糖蛋白对花粉萌发和花粉管生长的抑制作用。结果表明微丝骨架参与了梨花粉萌发及花粉管生长的过程，并可能参与了梨自交不亲和反应过程。