不同成熟期青花椒、红花椒花椒麻素积累分析

[目的]研究不同生长成熟期青、红花椒花椒麻素积累变化规律,为花椒功能性成分的开发利用提供参考。[方法]以青、红花椒不同生长成熟期鲜果实为试材,利用甲醇浸提花椒麻素,利用HPLC-MS联用技术连续检测不同时期花椒麻素及其成分含量。[结果]青花椒花椒麻素含量为7.7~19.6 mg/g,随生长发育进程呈先升后降动态变化趋势。成熟早期青花椒花椒麻素快速增加,增幅127.92%,成熟期上下波动,6月12日达峰值,成熟晚期回升26.32%。红花椒花椒麻素含量为0.42~17.06 mg/g,随生育期进程呈不断增加趋势。幼果期是红花椒花椒麻素快速增长期,增加19.9倍;成熟早期较快增加,增幅51.93%;成熟期增幅减小,7月28日达峰值。青、红花椒花椒麻素主要成分均为羟基-α-山椒素、羟基-β-山椒素、羟基-γ-山椒素、羟基-ε-山椒素,其中羟基-α-山椒素含量最高。生长成熟期,青、红花椒花椒麻素主成分中羟基-ε-山椒素动态变化趋势高度一致,其它3种成分存在明显差异;羟基-β-山椒素是青、红花椒麻素主成分的最大变量,在青花椒成熟早期与成熟期间含量大幅上升再快速下降,青花椒花椒麻素含量与之同步升降,是成熟早期和成熟期青花椒花椒麻素含量变化的关键因子。[结论]不同生长成熟期青、红花椒花椒麻素及主成分含量积累呈动态变化,且动态积累具有明显的差异。根据花椒麻素及主成分积累变化规律,选择6月12日为青花椒花椒麻素及青花椒花椒麻素成分中羟基-α-山椒素、羟基-β-山椒素和红花椒花椒麻素成分中羟基-β-山椒素的最佳研究利用时期;7月13日为红花椒花椒麻素成分中羟基-α-山椒素、青花椒花椒麻素成分中羟基-γ-山椒素的最佳研究利用时期;7月28日为红花椒花椒麻素及红花椒花椒麻素成分中羟基-γ-山椒素、羟基-ε-山椒素的最佳研究利用时期;8月中旬为青花椒花椒麻素成分中羟基-ε-山椒素的最佳研究利用时期。

花椒麻素与辣椒素的不同质量比对大鼠降血脂的协同作用

目的:研究不同质量比的花椒麻素与辣椒素对实验性高血脂症大鼠血脂水平的协同作用。方法:将40只Sprague-Dawley(SD)雌性大鼠按体质量分为5组,空白组、高脂模型组、其余3组按花椒麻素和辣椒素的质量比分为1:8(剂量A组)、2:7(剂量B组)和3:6(剂量C组)3个剂量组,研究花椒麻素和辣椒素不同质量比时的降血脂作用。所有大鼠饲喂基础饲料,自由采食和饮水,每天测量大鼠体质量和采食量,灌胃4周后处死解剖测定大鼠血清总胆固醇、甘油三醋、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和肝脏总脂肪、总胆固醇、总甘油三酯含量,观察大鼠肝脏的切片。结果:灌胃不同质量比的花椒麻素与辣椒素的剂量组能延缓大鼠的体质量增加,降低大鼠的血脂和肝脂水平,减轻大鼠的脂肪肝症状,对胆固醇代谢循环有较好效果,但不影响大鼠肝脏的正常发育。其中花椒麻素与辣椒素的质量比为3:6时效果最好。结论:不同质量比的花椒麻素和辣椒素有降血脂和延缓体质量增加的作用。

花椒麻素的抗氧化活性

为研究花椒麻素的抗氧化活性,采用体外抗氧化实验,评价不同剂量花椒麻素的总抗氧化能力、还原力以及对羟自由基（？OH）和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基的清除作用,并以人肝癌细胞Hep G2为模型,探讨其在细胞水平的抗氧化能力。结果表明：花椒麻素具有一定的还原力和总抗氧化能力,且呈现良好的剂量-效应关系;但对DPPH自由基、？OH的清除作用较弱。花椒麻素在较低质量浓度（0~50μg/m L）条件下可使Hep G2细胞内超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性降低,丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量增加,但当花椒麻素质量浓度达到100μg/m L时,细胞SOD活性显著增加,MDA含量则显著降低（P〈0.05）。因此,花椒麻素是一类潜在的抗氧化物质,可用于此类功能食品的开发。

花椒麻素对SD雄性大鼠骨骼肌蛋白质代谢的影响及机理

为进一步了解花椒麻素对机体蛋白质代谢的影响及调控机理,将40只健康SD雄性大鼠按体质量随机分为空白对照组、花椒麻素的大豆油溶液高剂量灌胃组(8 mg/(kg·d))、中剂量灌胃组(4 mg/(kg·d))和低剂量灌胃组(2 mg/(kg·d)),各组10只,饲养28 d。实验结束后,测定血清中血尿素氮、总蛋白、胰岛素样生长因子(insulin-like growth factorⅠ,IGF-Ⅰ)、氨基酸和骨骼肌中氨基酸水平及变化;实时荧光定量聚合酶链式反应检测肝脏中IGF-Ⅰ、胰岛素样生长因子受体-Ⅰ(insulin growth factorⅠreceptor,IGF-ⅠR)的mRNA转录水平,骨骼肌中IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR、肌细胞生成素(myogenin,MyoG)、肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)、钙蛋白酶-1(μ-calpain,CAPN-1)、钙蛋白酶抑制蛋白(calpastatin,CAST)的m RNA转录水平。结果表明:与空白对照组相比,花椒麻素可显著提高大鼠相对骨骼肌的质量,降低腹脂率,对其他脏器的相对质量没有显著影响;显著降低大鼠血尿氮水平;显著升高大鼠血清和骨骼肌总蛋白质水平。此外,花椒麻素可显著上调大鼠骨骼肌中IGF-Ⅰ、MyoG、CAPN-1和CAST mRNA相对表达量,显著下调MSTN mRNA相对表达量。花椒麻素提高大鼠骨骼肌相对质量的主要机制是通过上调MyoG mRNA表达量的同时下调抑制基因MSTN mRNA相对表达量,促进骨骼肌的生长;另外花椒麻素可由CAPN-1/CAST系统增强骨骼肌蛋白质的更新,并促进蛋白质的沉积。

HPLC检测大鼠组织样品中花椒麻素方法的建立

目的：建立高效液相色谱法测定大鼠组织样品中花椒麻素含量的方法。方法：采用Intersil ODS-sPC18（250mm×4．6mm，5μm）为分析柱，流动相甲醇-水（70：30，V／V），流速0．5mL／min，检测波长254nm。结果：心、肝、脾、肺、肾脏、脑、胃、小肠、脂肪、肌肉、皮肤、睾丸及前列腺的线性范围分别为0．1～10pg／mL（r=0．9986）、0．1～50pg／mL（r=0．9999）、0．1～10μg／mL（r=0．9997）、0．1～10μg／mL（r=0．9989）、0．1～20μg／mL（r=0．9993）、0．1～10μg／mL（r=0．9995）、0．1～100μg／mL（r=0．9999）、0．1～50μg／mL（r=0．9982）、0．1～20μg／mL（r=0．9956）、0．1～10μg／mL（r=0．9988）、0．1～10μg／mL（r=0．9997）、0．1～10μg／mL（r=0．9998）及0．1～10μg／mL（r=0．9998）。方法平均回收率大于82％，日内日间变异均小于11％，稳定性良好。结论：本方法准确、快速、重复性好，适用于大鼠组织样品中花椒麻素含量的测定。

花椒麻素的生物功能研究进展

花椒麻素作为最主要的呈麻味物质,其与多种热点药物靶点受体(大麻素受体、香草酸受体)的亲和力极强,可激活或阻断多种离子通道,在体内发挥广泛的生物学效应。本文综述了花椒麻素的结构、理化性质、呈味机理及其生物活性作用,重点探讨了不同结构花椒麻素的感觉、对肠蠕动的影响、抗癌作用、镇痛作用、减肥功效和对糖尿病的辅助治疗作用,并展望了未来花椒麻素的研究方向,为其结构与功能研究提供参考。

花椒麻素在大鼠肠道的吸收动力学研究

【目的】研究花椒麻素在大鼠肠道的吸收动力学特征。【方法】以SD大鼠为供试动物，建立大鼠体循环肠灌流模型，并采用建立的高效液相色谱法（HPLC）测定肠循环液中花椒麻素质量浓度，研究花椒麻素在大鼠肠道不同部位（十二指肠、空肠、回肠、结肠）的吸收特性，分析不同质量浓度花椒麻素对大鼠肠吸收速率常数（Ka）、吸收百分率（P）和吸收半衰期（t1/2）的影响。【结果】 25～100 μg/mL花椒麻素在大鼠肠道Ka为30.0～65.0 min-1，P为30.16%～56.81%，t1/2为100.10~232.09 min。花椒麻素在各肠段的P和Ka均随其质量浓度的增加而增大，而t1/2随其质量浓度的增加而减少。花椒麻素Ka和P均按空肠、回肠、十二指肠、结肠顺序依次下降，而t1/2依次升高。【结论】花椒麻素在大鼠肠道的吸收过程属于一级动力学过程，属被动转运，其吸收主要部位是空肠和回肠。

花椒麻素和辣椒素对大鼠体内脂质的调节作用

拟研究花椒麻素与辣椒素对试验性高血脂症大鼠血脂水平的共同调节作用。将40只SD雌性大鼠按体质量分为5组,即普通饲料空白组、模型对照组、花椒麻素组[3 mg/(kg·d)]、花椒麻素和辣椒素的混合组[2 mg/(kg·d)花椒麻素+7 mg/(kg·d)辣椒素]、辣椒素组[9 mg/(kg·d)],研究花椒麻素和辣椒素以及两者混合时的降血脂作用。所有大鼠饲喂基础饲料,自由采食和饮水,每天测量大鼠体质量和采食量,灌胃4周后处死,解剖测定大鼠血清总胆固醇(total cholestrol,简称TC)、甘油三酯(triglyceride,简称TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,简称HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,简称LDL-C)含量和肝脏总脂肪、总胆固醇、总甘油三酯含量,观察大鼠肝脏的切片。结果表明,灌胃花椒麻素、辣椒素能延缓大鼠的体质量增加,降低大鼠的血脂和肝脂水平,减轻大鼠的脂肪肝症状,对胆固醇代谢循环有较好效果,且不影响大鼠肝脏的正常发育,增加大鼠粪便中的胆固醇、甘油三脂含量以及小肠内容物和粪便中总胆汁酸的含量,其中混合组降血脂的效果最好。由研究结果可知,花椒麻素与辣椒素混合时,对胆固醇的调节效果优于单一组分。

花椒麻素改善2型糖尿病小鼠糖脂代谢紊乱的作用

为了研究花椒麻素对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)小鼠糖脂代谢紊乱的治疗效果,采用高脂高糖饲料和链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)联合建立T2DM小鼠模型,设置空白组、模型组、花椒麻素高剂量(0.8 mg/kg·bw)、花椒麻素低剂量(0.4 mg/kg·bw)及阳性对照组,每组10只。实验期间测定小鼠的采食量、饮水量、体重和空腹血糖值,给药28 d后,测定小鼠的糖耐量,以及小鼠血清及肝脏的总胆固醇(TotalCholesterol,TC)、甘油三酯(Triglyceride,TG)、高密度脂蛋白(High-density Lipoprotein,HDL-C)、低密度脂蛋白(Low-density Lipoprotein,LDL-C)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的含量并通过HE染色观察各组小鼠肝组织形态学变化。结果显示,花椒麻素可显著(p<0.05)降低血清中TG、TC、LDL-C及MDA含量,且显著(p<0.05)提高了HDL-C含量;高剂量组的肝脏TG、TC、及MDA含量分别比模型组显著(p<0.05)降低了28.31%、43.56%、52.14%,与阳性对照组作用相当;且形态学检测结果显示,经过28 d的给药治疗,与模型组相比,其高、低剂量组的肝组织损伤程度明显减轻,结果表明花椒麻素具有改善T2DM小鼠的糖脂代谢和氧化应激的作用。

花椒麻素对SD大鼠肥胖模型脂代谢的影响

旨在研究花椒麻素对肥胖症模型SD大鼠体内脂质代谢功能的影响。将48只SD雄性大鼠按体质量分为空白对照组、高脂模型组、花椒麻素低/中/高剂量组[4、8、12 mg/(kg·d)]、非诺贝特阳性对照组[40 mg/(kg·d)],经过灌胃6周,记录大鼠的初质量、末质量及采食量,计算实验动物饲料效率。解剖后分别测定SD大鼠血清中的总胆固醇(total cholestrol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇胆固醇(low density lipoprotein,LDL-C)及肝脏组织的肝脏指数和总脂肪、TC、TG的含量。结果表明,花椒麻素有效降低了SD大鼠的饲料效率。与高脂模型组(MC)相比,高剂量组SD大鼠血清中TC、TG、LDL-C含量显著降低(P<0.05),HDL-C含量显著提高(P<0.05),动脉粥样化程度显著降低(P<0.05);相对于MC组,高剂量组SD大鼠肝脏组织中的总脂肪、TC和TG降低了29.66%、16.74%和43.78%(P<0.05)。实验表明花椒麻素可有效预防SD大鼠由于高脂膳食引起的肥胖,减少肝脏脂肪蓄积,本研究可为进一步探索花椒麻素对脂代谢产生影响的机制提供依据。

花椒麻素和辣椒素降血脂机理的研究

通过不同质量比的花椒麻素和辣椒素,对大鼠进行胃溃疡和肠道蠕动性试验,围绕胆固醇在体内的代谢途径,肠道组织形态学观察,胆固醇相关代谢基因的测定,从分子学角度探讨花椒麻素和辣椒素调节胆固醇代谢的机理。

影响花椒麻素提取效果的研究

对影响花椒中花椒麻素提取的各个因素进行了分析。经过实验得出了温度、花椒粉碎粗细度、提取次数和提取花椒麻素的溶剂等条件对花椒麻素提取效果的影响。

近红外光谱快速无损检测花椒中麻素及精油含量

利用近红外光谱法结合偏最小二乘法构建定量分析模型,同时实现花椒中麻素及精油含量的快速无损检测。取92份花椒样品,采集近红外光谱用于模型的建立及验证。采用二阶导数进行光谱预处理,在优选的波数范围和主因子下,建立的麻素及精油定量模型的相关系数分别为0.9665和0.9778,预测均方差分别为0.470和0.413,在外部验证中相对偏差均小于5%,说明所建模型预测性能良好,可用于花椒品质的快速评价。

花椒精油和麻素对赤拟谷盗成虫的控制作用

在30℃的恒温条件下,研究了青椒精油、红椒精油、一级麻素和二级麻素这4种花椒提取物对赤拟谷盗成虫的触杀、驱避及种群抑制作用,结果表明二级麻素和青椒精油的触杀效果较好,红椒精油的效果最差;两种花椒麻素对赤拟谷盗都表现出较好的驱避效果,且随着浓度的提高而增强,随着时间的延长而降低;花椒精油及麻素对赤拟谷盗的种群抑制作用随着药剂浓度的增大而增强,其中一级麻素的抑制效果最好,两种花椒精油的抑制效果较差。

花椒及其提取物中花椒麻素的HPLC测定方法

试验建立了通过质量吸收系数校准羟基-α-山椒素工作液浓度的方法,解决了花椒麻素标准品不稳定的问题;建立了以羟基-α-山椒素为标样同时测定花椒及其提取物中羟基-ε-山椒素、羟基-α-山椒素、羟基-β-山椒素和羟基-γ-山椒素的高效液相色谱方法,方法采用Agilent Zorbax SB-C18 (4.6 mm×100 mm, 5μm)色谱柱,流动相为乙腈-1%冰醋酸水(40︰60, V/V),流速为1.5 mL/min,检测波长为270 nm,柱温为40℃。羟基-α-山椒素在0.007 84~0.078 4 mg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系, R2为0.999 8,花椒和花椒提取物的花椒麻素检出限分别为0.005 mg/g和0.05 mg/g,在14.4~54 mg/g范围内加标平均回收率为99.75%,样品检测RSD (N=9)均在1.5%以内。试验评价了三种不同产地和品种的花椒样品,通过对花椒麻素的组成进行分析,得出不同产地和品种的花椒中各种花椒麻素成分比例具有特征性,羟基-γ-山椒素成分比例可以作为鉴别不同产地和品种的特征指标。

不同海拔和采摘期下遵义花椒的品质、次生代谢产物初步研究

为探究不同海拔和采摘期对遵义花椒产量、品质、花椒麻素和花椒精油含量的影响,对种植在海拔600 m和900 m的遵义花椒分6个时间点进行采样,测定其重量、含水量、花椒麻素和花椒精油含量。结果表明,1)不同海拔下,遵义花椒千粒鲜重、千粒干重随其成熟度升高呈先升高后降低的趋势,而含水量随其成熟度升高呈急剧下降后微增趋势,以8月7日为极限值;同一采摘期下,种植在海拔600 m的遵义花椒重量高于900 m。2)海拔900 m下,花椒麻素和花椒精油含量随遵义花椒成熟度升高呈先升高后降低趋势,在8月7日最高;而海拔600 m下,其含量随遵义花椒成熟度升高不断升高;种植在海拔600 m的遵义花椒的花椒麻素和花椒精油最终含量高于900 m。低海拔较高海拔更利于遵义花椒种子重量和次生代谢物积累,其适宜采摘期为8月7日—8月15日。

花椒精有效成分对高脂膳食大鼠脂质代谢的影响

目的研究花椒精有效成分对高脂膳食大鼠脂质代谢的影响及作用机制。方法用高脂饲料饲喂大鼠,并分别给与花椒精和含花椒精组相同剂量的花椒挥发油及花椒麻素灌胃4w后,检测大鼠血脂、肝脂及粪便中胆汁酸和中性固醇含量;用RT-PCR法检测肝脏及回肠中与脂质代谢相关基因m RNA的表达。结果与模型组相比,花椒精和花椒麻素组显著降低大鼠血清及肝脏中胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)(P<0.05),增加粪便中胆汁酸及中性固醇含量(P<0.05),有效下调肝脏和回肠中3-羟基-3-甲基-戊二酰Co A还原酶(HMG-Co A R)及回肠胆盐转运蛋白(ASBT)等基因m RNA表达(P<0.05),显著上调肝脏7α–羟化酶(CYP7A1)及回肠法尼酯受体(FXR)m RNA表达(P<0.01);花椒挥发油组可显著降低大鼠血清及肝脏TG水平(P<0.05),增加粪便中性固醇含量,但增加了肝脏TC和减少粪便中胆汁酸含量,下调肝脏CYP7A1和HMG-Co A还原酶m RNA表达,上调肝脏和回肠FXR m RNA表达(P<0.05)。结论花椒精、花椒挥发油及花椒麻素对高脂膳食大鼠脂质代谢紊乱均有良好的改善作用,其中花椒麻素效果最佳,其可能机制与上调肝脏中胆固醇分解、下调胆固醇合成及回肠胆汁酸重吸收的相关基因表达有关。

喷雾干燥对花椒精油成分及应用的影响

以花椒精油为芯材,通过喷雾干燥制备花椒精油微胶囊,测定花椒精油微胶囊的包埋率、精油利用率以及表面微观结构。通过紫外可见光分光光度计测定花椒精油及其微胶囊花椒麻素含量,并采用GC-MS(气相色谱-质谱联用仪)对花椒精油以及微胶囊挥发性成分进行分析。采用感官评价对比花椒精油及其微胶囊在油炸酥肉中应用效果。结果显示:通过喷雾干燥制备的花椒精油微胶囊包埋率为97.9%、精油利用率为89.0%,扫描电子显微镜显示其微观形态为大小均匀、表面紧密的颗粒,表明喷雾干燥制备的花椒精油微胶囊包埋效果良好,但损失精油11%。测定花椒精油微胶囊的花椒麻素为49.2 mg/g,高于花椒精油微胶囊的理论值。GC-MS结果证明微胶囊中精油挥发性成分的相对含量发生改变。感官评价结果显示花椒精油微胶囊在油炸酥肉中的应用效果优于等含量的花椒精油,表明微胶囊虽在喷雾干燥过程中损失部分精油,但在应用效果上表现良好。