黑果腺肋花楸果中多种活性成分同时纯化及体外活性研究

研究大孔树脂对黑果腺肋花楸果中多种活性成分同时纯化工艺条件及各组分进行体外活性,并考察在体外模拟胃肠条件下总皂苷的释放量。采用静态、动态的吸附与解吸方法进行纯化工艺研究,采用UVVis进行各组分的体外活性研究。最佳纯化工艺条件为:LSA-10大孔树脂,生药浓度48.0 mg/mL,吸附流速1.0 mL/min,洗脱流速1.5 mL/min。通过水、20%和80%乙醇水溶液的洗脱得到多组分。纯化后干浸膏中多糖、花色苷、总黄酮和总皂苷的含量分别为615.20、127.55、48.97、797.49 mg/g。体外活性实验表明各组分均具有不同活性的IC50值。该工艺条件下的大孔树脂可以同时有效纯化多种活性成分,所得各组分均具有不同的体外活性,胃肠消化酶可促进总皂苷释放量。本研究为黑果腺肋花楸果的开发利用提供了数据参考。

基于UPLC-Orbitrap-MS/MS技术联合GNPS分子网络快速分析黑果腺肋花楸果实成分

本研究建立了超高效液相色谱-轨道阱串联质谱(UPLC-Qrbitrap-MS/MS)技术联合GNPS分子网络快速分析黑果腺肋花楸果实成分。在正、负离子模式下,采集黑果腺肋花楸果实提取物的高分辨质谱数据,总结串联质谱信息和碎裂规律,依据特征裂解规律的相似性创建分子网络。根据对照品的保留时间、精确相对分子质量及碎片离子等,对黑果腺肋花楸果实成分进行归属和鉴定。创建了花色苷类、原花青素类、黄酮类和有机酸类的分子网络,共鉴定出黑果腺肋花楸果实中42个成分,包括20个花色苷类、3个原花青素类、12个黄酮类和7个有机酸类。该方法能够快速、准确归类并鉴定黑果腺肋花楸果实成分,为其功效物质基础研究及开发利用提供了依据。

不同预处理方式黑果腺肋花楸果酒营养品质和抗氧化活性的对比

实验以黑果腺肋花楸果(简称黑果)为实验原料,对黑果进行无预处理(CK,为对照)、温水浴处理(HTWB)、苹果催熟处理(AMWA)、晚采收处理(DH)、冷冻处理(LTF)5种不同方式的预处理,并加工成果酒,对比果酒中营养物质含量和抗氧化活性的差异。结果表明,5种果酒相比,黑果经过预处理后,果酒的总酸和抗氧化活性均有显著的降低,营养成分含量也有较大差异。LTF的多酚含量(8.94 mg/g)和羟自由基清除率(40.9%)显著高于其他果酒(P<0.05);HTWB的总黄酮(19.23 mg/g)含量、单宁含量(0.782%)和超氧自由基清除率(68.08%)显著高于其他果酒(P<0.05);DH的花青素含量(0.155 mg/g)和DPPH.清除率(97.91%)显著高于其他果酒(P<0.05)。主成分分析结果说明5种预处理方式中晚采收处理可以更好的保留果酒中的营养物质,且操作简单,费用低,适宜广泛推广应用。

红外光谱的不同产地黑果腺肋花楸果实鉴别

黑果腺肋花楸是已被列入新食品原料名单中的小浆果,富含花青素等成分,在酒类、饮料、功能食品、化妆品等领域广泛应用,具有较高的经济价值。因受不同产地气候等环境因素及种植条件的影响,黑果腺肋花楸果实品质差异明显。为规范黑果腺肋花楸果品市场管理,以中红外光谱技术结合化学计量学方法对不同产地黑果腺肋花楸果实进行鉴别。采集15个产区共750份黑果腺肋花楸果实红外光谱数据,采用K-S样本划分法,按4∶1比例将样本划分为训练集和测试集,并进行多元散射校正(MSC)、标准正态化(SNV)、移动平滑(SG)、一阶导数(FD)、二阶导数(SD)等光谱预处理,与原始光谱进行支持向量机(SVM)建模识别效果对比,确定最佳光谱预处理方法,同时对最佳光谱数据进行归一化处理。采用竞争性自适应重加权算法(CARS)和连续投影算法(SPA)提取光谱特征信息,并结合随机森林(RF)、极限学习机(ELM)、支持向量机(SVM)、偏最小二乘-判别分析(PLA-DA)进行建模对比,确定最佳模型。结果表明,MSC为最佳光谱预处理方法,MSC-SVM训练集识别率为93.33%,测试集识别率为92.67%,能有效减少光谱采集时产生的随机误差。经CARS、SPA提取MSC特征光谱波长,进行4种算法的建模结果对比,确定SPA-SVM模型为最佳识别模型,其训练集与测试集识别率均为100%,且仅需16个波长点即可完成准确识别。红外光谱结合化学计量学方法,尤其是SPA-SVM模型,可准确鉴别黑果腺肋花楸果实产地,为黑果腺肋花楸果实产地溯源、质量评价提供快速、简便的方法支撑,为打造地区特色品牌提供技术基础。

体外模拟胃肠消化过程中黑果腺肋花楸果提取物活性成分及其抗氧化作用变化规律

通过体外模拟,探究黑果腺肋花楸果提取物胃肠消化过程中的活性成分及抗氧化作用变化规律。采用紫外分光光度法测定黑果腺肋花楸果提取物口腔消化液、胃消化液、肠消化液、肠透析液以及黑果腺肋花楸果提取物溶液5种样品中总黄酮、多酚、花青素、原花青素含量变化;同时,检测5种样品对羟基自由基、DPPH自由基、ABTS+自由基、超氧阴离子自由基的清除能力。结果表明:黑果腺肋花楸果提取物中原花青素含量最高,为(333.86±3.46)mg/g,其次是多酚,花青素含量最少。在模拟消化过程中活性成分变化趋势存在差异,花青素含量在口腔消化液中最多,肠消化液次之,胃消化液和肠透析液中较少;原花青素在口腔消化液中最多,胃消化液中减少,肠消化液和肠透析液中消失。多酚在肠消化液中含量最高,口腔和胃消化液中差距不大,肠透析液中明显减少。模拟消化液清除羟基自由基、DPPH自由基的变化趋势相似,其中口腔消化液抗氧化能力最强(清除羟基自由基IC50值为71μL,强于维生素C,清除DPPH自由基IC50值为13.7μL,弱于维生素C),肠消化液抗氧化能力最弱,而清除ABTS+自由基能力的结果略有不同,清除超氧阴离子自由基的能力有待进一步研究。通过研究结果可以看出黑果腺肋花楸果提取物消化产物具有潜在的抗氧化活性,并与相关活性成分含量具有一定相关性。

黑果腺肋花楸果茶的研制及品质评价

为改善黑果腺肋花楸果茶冲泡出色慢、花青素损失较大、口感香气不佳等缺点,该研究通过黑果腺肋花楸果渣和黑果腺肋花楸冻干果浆块复配开发一种黑果腺肋花楸果茶。以果茶产品的感官品质、冲泡特性及总花色苷含量为主要评价依据,优化筛选出最佳的黑果腺肋花楸果茶生产工艺。黑果腺肋花楸果茶中果渣的最佳制备工艺为烘干温度80℃、果渣粒径20~30目;冻干果浆块的最佳制备工艺为助干剂选择添加量10%(质量比)的麦芽糊精或β-环糊精,香精选择黑加仑香精与蓝莓香精复配,每种香精添加量均为0.05%(质量比)。该文创造性地在黑果腺肋花楸果茶中添加黑果腺肋花楸冻干果浆块,所得黑果腺肋花楸果茶的花青素含量高,茶汤出色更快速,多次冲泡持色更好,口感甜润不酸涩,香气更浓郁。

黑果腺肋花楸果实的降血糖活性及其对脂代谢的影响

目的:探究黑果腺肋花楸果实(Aronia melanocarpa Fruit,AMF)的降血糖活性和对脂代谢的影响。方法:采用链脲佐菌素(streptozocin,STZ)法建立Ⅱ型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)小鼠模型。将小鼠随机分为7组:模型组、盐酸二甲双胍组(40 mg/kg·bw)、AMF总黄酮组(75、150、300 mg/kg·bw)、AMF果汁组(10 mL/kg·bw)及空白对照组。检测各组对T2DM小鼠的生理指标、饮水量、采食量、脏器指数、空腹血糖值的影响,测定血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)含量,并对小鼠肝脏和胰腺组织进行病理学观察。结果:AMF总黄酮组和果汁组均对STZ诱导的T2DM小鼠具有显著的降血糖作用(P<0.05),能降低其脏器指数和TG、TC、LDL-C、HDL-C、MDA、SOD水平(P<0.05),修复小鼠胰腺和肝脏组织,AMF总黄酮组能显著改善T2DM小鼠“三多一少”症状(P<0.05)。AMF总黄酮高剂量组的效果最佳。结论:AMF对STZ诱导的T2DM小鼠具有降血糖、降血脂、修复胰腺和肝脏损伤的功效,作用机制可能与其调节氧化应激相关。

黑果腺肋花楸果酒生产工艺研究进展

黑果腺肋花楸(Aronia melanocarpa)是一种具有优良经济效益的新兴浆果,目前已在我国形成了一定种植规模。果酒酿造是解决当前黑果腺肋花楸(黑果花楸)资源高效利用难题的重要途径,同时也是亟待突破的关键深加工技术。文章对黑果花楸果实及果酒营养成分、风味物质、前处理工艺、发酵菌种、发酵工艺、澄清、降酸技术等方面的研究进行了梳理和总结,提出了黑果花楸果酒生产工艺现存问题并探讨了相应的解决方案,以期为黑果花楸果酒的开发提供技术参考与理论支持,促进黑果花楸产业可持续性发展。

花楸果多酚物质提取及抗氧化性的研究

以花楸果为原料,对花楸果多酚进行乙醇提取,分别研究料液比、乙醇浓度、提取时间和温度对花楸果多酚物质提取率的影响,获得最佳提取工艺参数。并通过研究花楸果多酚提取物对羟自由基、DPPH自由基、过氧化氢等的清除能力,同时与相同浓度的抗坏血酸进行比较,对其进行抗氧化性的研究。由结果可知,最佳提取工艺参数为:料液比1∶25,40%乙醇浓度,40℃下提取90 min,该条件下多酚得率达6.73%。通过比较花楸果多酚提取物与相同浓度的抗坏血酸的抗氧化性,确定花楸果多酚提取物的抗氧化能力较抗坏血酸要弱,但仍具有很强的抗氧化能力。

黑果腺肋花楸果制剂中有效成分测定及体外活性研究

建立黑果腺肋花楸果制剂中有效成分的含量测定方法,并对制剂清除亚硝酸盐的能力、抑制脲酶、α-葡萄糖苷酶、胰脂肪酶的活性进行考察.采用紫外-可见分光光度法对颗粒剂中的总黄酮、原花青素、花色苷和多糖进行含量测定及方法学验证;用半数浓度(IC50值)作为指标来评价颗粒剂的不同体外活性.实验结果表明,两种颗粒剂均在显色前360 min内和显色后60 min内有良好的稳定性,重复性和精密度良好,加样回收率为98.63%~102.50%和98.27%~103.00%,且RSD<2.0%,建立的方法可满足含量测定要求.3批黑果颗粒剂和双果颗粒剂中总黄酮、原花青素、花色苷、多糖的含量平均值分别为7.27、14.10、1.56、473.95 mg/g和12.35 mg/g、3.44 mg/g、0.80 mg/g、700.12 mg/g.体外活性实验表明两种颗粒剂均具有一定的清除亚硝酸盐能力,抑制脲酶、α-葡萄糖苷酶和胰脂肪酶活性的能力.且建立的4类有效成分的含量测定方法,具有较好的重复性,回收率符合要求,可用于黑果腺肋花楸果制剂中总黄酮、原花青素、花色苷、多糖的含量测定,能为评价制剂的质量提供参考.该研究为黑果腺肋花楸果制剂的进一步开发利用提供了的实验基础.

黑果腺肋花楸果酒发酵条件优化及抗氧化活性分析

以黑果腺肋花楸果实为原料制作果酒,以感官评分和酒精度为评价指标,通过单因素和响应面试验优化黑果腺肋花楸果酒的发酵条件,并对产品的理化、微生物指标和抗氧化活性进行测定。结果表明,黑果腺肋花楸果酒最优发酵条件为酿酒酵母接种量1.0%、初始糖度21.8°Bx、初始pH值4.5、发酵时间6.4 d,在此条件下,黑果腺肋花楸果酒呈深红色,花楸果香浓郁,感官评分为87.2分,酒精度为9.56%vol,多酚含量为3 617.3 mg/L,花青素含量697.6 mg/L,DPPH·、ABTS+·、羟基自由基清除率分别为93.8%、88.4%、76.5%,均显著高于未发酵的果汁(P<0.05)。

黑果腺肋花楸果花青素提取工艺优化及抗氧化研究

以黑果腺肋花楸果为原料,利用响应面法优化花青素超声-微波协同提取工艺,分析花青素在体外模拟胃肠消化过程中的抗氧化活性。结果表明,黑果腺肋花楸果花青素的超声-微波协同提取法响应面优化工艺为乙醇体积浓度71%、提取温度52℃、提取时间36 min、提取功率527 W,花青素的提取含量为0.553 mg/g。花青素提取物、VC、芦丁三者单一抗氧化能力由强到弱依次为花青素提取物> VC>芦丁。体外模拟胃肠消化过程中花青素提取物和VC消化产物均具有较强的自由基清除能力,并随着消化反应的进行,两者的自由基清除能力均逐渐减弱。

超声辅助双水相萃取黑果腺肋花楸果实抗氧化成分

【目的】为高效制备黑果腺肋花楸果实中的抗氧化活性物质,评价其抗氧化活性,提高其利用率和产品附加值,获得与传统提取方式相比更加环保且活性优良的提取方法。【方法】以黑果腺肋花楸果为原料,以ABTS+·和OH·清除率为考察指标,采用响应面法优化超声辅助双水相法萃取黑果腺肋花楸抗氧化成分的工艺,以VC为阳性对照,分别测定了黑果腺肋花楸提取物对OH·、ABTS+·和DPPH·清除率的IC50值,并分析提取物中多酚、黄酮、花青素与抗氧化的相关性。【结果】黑果腺肋花楸抗氧化成分的最佳提取工艺条件为:料液比1∶21 g/mL,硫酸铵质量浓度0.31 g/mL,乙醇体积分数43%,超声功率510 W,超声时间50 min;此时提取物对2种自由基平均清除率为(59.36±0.80)%,其中OH·清除率为(51.77±0.97)%,ABTS+·清除率为(65.20±1.43)%,较单一双水相法和常规醇提法均有显著提升。在此条件下,黑果腺肋花楸提取物得率为(12.67±0.43)%。提取物中多酚、黄酮、花青素含量分别达到了(128.75±0.85)、(47.70±0.74)、(19.95±0.67)mg/g。提取物对ABTS+·、OH·和DPPH·清除率的IC50值分别为0.614、2.273、0.386 mg/mL。【结论】超声辅助双水相法较超声辅助醇提法的ABTS+·清除率提高了8.24%(P<0.01),OH·清除率提高了11.38%(P<0.01);较单一双水相法的ABTS+·清除率提高了10.43%(P<0.01),OH·清除率提高了11.75%(P<0.01)。超声辅助双水相提取法能高效制备黑果腺肋花楸中活性成分,并保持其良好的抗氧化活性。

黑果腺肋花楸果实总黄酮的抗氧化活性探究

探究黑果腺肋花楸果实总黄酮体外抗氧化活性。采用课题组前期优化后的提取纯化方法制备黑果腺肋花楸总黄酮冻干粉末,以维生素C为对照品,测定黑果腺肋花楸果实总黄酮对ABTS+自由基、羟自由基(·OH)、超氧自由基(O_(2)^(-))和DPPH·自由基的清除能力。结果表明:黑果腺肋花楸果实总黄酮具有较强的体外抗氧化活性。

发酵工艺对黑果腺肋花楸果酒贮藏期品质和抗氧化活性的影响

以黑果腺肋花楸为原料,用果汁、带渣汁和熟汁三种不同发酵工艺酿造黑果腺肋花楸果酒,测定其在贮藏期理化指标、功能性成分、抗氧化活性的变化,并采用电子鼻和气相色谱-质谱(GC-MS)分析其挥发性香气成分。结果表明,熟汁发酵酒具有较高的酒精度[(12.13±0.11)%vol]、花色苷[(644.63±12.08)mg/L]和总酚[(4213.41±89.03)mg/L]含量,有较强的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和2,2'-联氮-双(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)(ABTS)自由基清除能力,分别为(75.33±2.08)%和(60.21±1.83)%;带渣汁发酵酒的黄酮含量最高为(555.50±24.15)mg/L,有较强的羟自由基清除能力;果汁、带渣汁和熟汁发酵酒分别检测出35种、40种、31种挥发性香气成分,其中醇类物质占比较高,分别是39.78%、42.70%和45.76%;熟汁发酵酒感官评价较高为83.03分。综上所述,熟汁发酵较其他两种发酵工艺获得的果酒香气协调,口感醇厚,整体品质较佳。

黑果腺肋花楸果中原花青素和花色苷的提取及其结合牛磺胆酸钠能力研究

试验旨在研究提取条件对黑果腺肋花楸果原花青素、花色苷提取量的影响及其与牛磺胆酸钠的结合能力。试验以乙醇水溶液为溶剂同时提取黑果腺肋花楸果中原花青素和花色苷,以原花青素、花色苷提取量为考察指标,通过单因素试验和正交试验优化提取工艺。结果显示,在提取溶剂为50%乙醇水溶液、温度为80℃、时间为1.5 h、液料比为65 mL/g、提取2次的优化条件下,原花青素提取量为10.37 mg/g,花色苷提取量为0.88 mg/g,总提取量为11.25 mg/g,出膏率29.90%。黑果腺肋花楸果提取物与牛磺胆酸钠结合率IC50值为0.83 g/L。研究表明,采用50%乙醇水溶液同时提取黑果腺肋花楸果原花青素、花色苷,优化后的提取效果良好,工艺稳定,其提取物具有与牛磺胆酸钠结合的能力,结合能力随提取物浓度的增加逐渐增强。

柱层析提取黑果腺肋花楸果多种活性成分及体外活性研究

探索一种从黑果腺肋花楸果中分离总黄酮、总皂苷、花色苷和多糖的方法,并对各组分的抗氧化活性、抑制酪氨酸酶活性和抑制α-葡萄糖苷酶活性的能力进行考察。以目标组分的质量为评价指标,确定了总黄酮、总皂苷、花色苷和多糖的最佳提取溶剂分别为无水乙醇、60%乙醇、60%乙醇和水,吸涨率分别为1.5、2.5、2.5、2.5 mL/g,浸泡平衡时间分别为2、2、2、1 h;用半数浓度(IC_(50)值)作为指标来评价各组分的不同体外活性。结果表明循环提取第1轮总黄酮、总皂苷、花色苷和多糖的提取率分别是76.09%、84.38%、73.75%、72.23%,第4轮开始各组分的提取率均达到90%以上,分别得总黄酮、总皂苷、花色苷和多糖的粗产品,含量分别为8.93±0.16、70.39±0.26、1.51±0.02和695.46±1.39 mg/g,经纯化处理后总黄酮、总皂苷、花色苷和多糖干浸膏中的各组分的含量分别为30.29±0.24、252.78±0.73、3.66±0.24和884.62±2.03 mg/g,体外活性实验表明各组分均具有一定的抗氧化活性、酪氨酸酶活性抑制和α-葡萄糖苷酶活性抑制的能力。柱层析循环法联合提取可以同时高效地分离多种活性成分,提取所得的各组分均具有不同的体外活性,实验结果为黑果腺肋花楸果的食品开发与利用提供实验依据和技术支持。

黑果腺肋花楸果酒酿造工艺研究进展

黑果腺肋花楸是一种小浆果,其营养物质丰富,含有丰富的花色苷、多酚和黄酮等活性物质,在食药养生方面备受关注。2018年国家卫生健康委员会将黑果腺肋花楸果实正式列为新食品原料。由于该果实的单宁含量较高,涩味较重,将其发酵成果酒能更好地提高该果实的食用性。本文对黑果腺肋花楸果酒的发酵与陈酿工艺进行综述,为其果酒的开发提供参考。

百花花楸果中β-谷甾醇及其衍生物的制备及抗抑郁活性研究

目的:制备百花花楸果中β-谷甾醇(简称为"Sit")及其衍生物,并考察其抗抑郁活性。方法:以百花花楸果实为原料,经过75%乙醇和20%KOH溶液提取,并经萃取结晶后得到Sit。以Sit的C3位羟基作为结构修饰位点,以二氯甲烷为反应溶剂、4-二甲氨基吡啶为催化剂、1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亚胺为脱水剂,分别加入4种有机酸(水杨酸、2-四氢糠酸、苯丙氨酸、山梨酸),通过羧合反应生成相应的酯类衍生物Sit-S、Sit-T、Sit-P、Sit-Sr,并采用红外和核磁共振等波谱技术鉴定其化学结构。根据悬尾实验和强迫游泳实验初步探讨Sit及其4种衍生物的抗抑郁活性,然后再根据悬尾实验和自发运动能力实验筛选抗抑郁活性较好的化合物的有效剂量。将筛选出的该化合物单用以及分别与阿戈美拉汀[40 mg/kg,5-羟基色胺(5-HT)和5-HT 2C受体拮抗剂]、氟哌啶醇[0.2 mg/kg,非选择性D2受体拮抗剂]和荷包牡丹碱[4 mg/kg,竞争性γ-氨基丁酸(GABA)拮抗剂]联用,腹腔注射给药60 min后,进行悬尾实验,然后通过酶联免疫吸附法检测小鼠脑组织中5-HT、多巴胺(DA)、GABA水平,初步探索该化合物的抗抑郁作用机制。实验均设置空白对照组,腹腔注射等量10%丙二醇溶液。结果:经波谱技术鉴定,Sit与4种有机酸成功地反应生成了相应的酯类衍生物。在Sit及其4种衍生物中,Sit-S组小鼠在悬尾实验和强迫游泳实验中的不动时间均最短,且显著短于空白对照组(P<0.05)。Sit-S的筛选结果显示,其抗抑郁的有效剂量为4 mg/kg,且与空白对照组比较不影响小鼠的自发活动(P>0.05)。该剂量作用下,Sit-S可显著缩短小鼠在悬尾实验中的不动时间(P<0.01),显著提高小鼠脑组织中5-HT、DA和GABA水平(P<0.05或P<0.01),但该作用效果可被阿戈美拉汀、氟哌啶醇和荷包牡丹碱不同程度地逆转。结论:Sit的水杨酸酯衍生物Sit-S具有良好的抗抑郁活性,其作用机制可能是通过提高脑组织中5-HT、DA和GABA水平所介导的。

黑果腺肋花楸果泡腾颗粒剂制备工艺研究

优选黑果腺肋花楸果泡腾颗粒剂的制备工艺。以泡腾颗粒的成型率、吸湿性、溶化性、流动性及口感为考察指标,在单因素试验基础上,采用正交试验优选颗粒剂的辅料及其配比、用量和最佳制备工艺,并对泡腾颗粒剂原花青素的含量等进行考察。最佳制备工艺为:稀释剂采用乳糖+甘露醇,乳糖与甘露醇配比1∶1(质量比),浸膏粉用量为颗粒剂质量的2%,酸碱崩解剂的质量比为1∶1.5,酸碱崩解剂的用量为颗粒剂质量的35%,包合碳酸氢钠的聚乙二醇6000与碳酸氢钠的质量比为0.3∶1,黏合剂为10%聚维酮K30的无水乙醇溶液,甜味剂为颗粒剂质量0.4%的甜菊糖,润滑剂为聚乙二醇6000粉末。结果表明,优选出的黑果腺肋花楸果泡腾颗粒剂的制备工艺稳定可行,研究结果为上述泡腾颗粒剂的工业化生产提供试验依据。