铁死亡调控因子花生四烯酸脂氧合酶-15与肿瘤相关性的研究进展

铁死亡(Ferroptosis)是一种铁依赖性的新型的细胞程序性死亡(PCD)方式。花生四烯酸脂氧合酶-15(Arachidonate 15-lipoxygenase,ALOX15)是铁死亡的重要调控因子,它可以催化多不饱和脂肪酸(Polyunsaturated fatty acid,PUFA)生成脂质氢过氧化物,从而促进铁死亡的发生。ALOX15参与了多种癌症的发生发展,并发挥重要作用。本文对铁死亡的重要调控因子ALOX15与乳腺癌、食管癌、胃癌、结直肠癌以及前列腺癌的相关性进行综述,为相关肿瘤的研究提供参考。

花生四烯酸5-脂氧合酶激活蛋白基因多态性与急性冠状动脉综合征的易感性

目的探讨花生四烯酸5脂氧合酶激活蛋白(ALOX5AP)基因SG1 3S114T/A多态性与急性冠状动脉综合征(ACS)的易感性。方法选择住院的胸痛患者714例,将确诊为ACS的患者377例作为ACS组,非ACS患者337例作为对照组,采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性方法检测ALOX5AP基因SG13S114T/A多态性,并进行logistic回归分析。结果 ACS组患者AA、AT和TT基因型频率分别为1 3.79%、50.93%和35.28%,对照组患者分别为12.76%、38.58%和48.66%,2组AT和TT基因型频率差异有统计学意义(P=0.041,0.020);ACS组男性AT基因型频率高于对照组(P=0.040),女性TT基因型频率低于对照组(P=0.013)。SG13S114T/A位点AT和TT基因型以及T等位基因是所有ACS(P=0.004、0.001和0.013)和男性ACS(P=0.014、0.005和0.020)发病的危险因素。结论 ALOX5AP基因SG1 3S114T/A多态性AT和TT基因型以及T等位基因可能与老年人,特别是老年男性ACS的易感性相关。

花生四烯酸5-脂氧合酶激活蛋白基因多态性与心肌梗死关系的研究

目的探讨在中国北方汉族人群中花生四烯酸5-脂氧合酶激活蛋白(ALOX5AP)基因单核苷酸多态性T(8733)C与心肌梗死的关系。方法采用PCR-重测序法对随机选取的无亲缘关系的48例中国北方汉族个体进行ALOX5AP基因单核苷酸多态性筛查,对经冠状动脉造影证实的125例心肌梗死患者和158例正常对照者,采用聚合酶链反应?限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测ALOX5AP基因T(8733)C多态性基因型和等位基因分布情况。结果通过筛查发现7个多态。心肌梗死患者ALOX5AP基因T(8733)C3种基因型(TT型、TC型和CC型)及C等位基因分布频率分别为35.2%、48.8%、16.0%和40.4%,正常对照者分别为32.9%、50.0%、17.1%和42.1%,其差异均无统计学意义(P>0.05);按性别分层进行亚组分析,心肌梗死患者与正常对照者ALOX5AP T(8733)C多态的基因型和等位基因频率差异亦均无统计学意义。结论ALOX5AP基因T(8733)C多态性与中国北方汉族人群心肌梗死的发生可能无关。

抗银屑病药物在花生四烯酸脂氧合酶途径上的作用靶位

为探讨抗银屑病药物在花生四烯酸脂氧合酶途径上的作用靶位。采用反相高效液相色谱法检测 5 -脂氧合酶产物 5 -羟基二十碳四烯酸和白三烯B4量的变化来反映该酶活性。结果 :地蒽酚、环孢素A、全反式维A酸和雷公藤内酯醇可抑制 5 -羟基二十碳四烯酸和白三烯B4的生成 ,提示 5

糖尿病兔心房5脂氧合酶及12脂氧合酶蛋白变化研究

目的观察糖尿病兔心房炎症和心房纤维化改变及5脂氧合酶(ALOX5)、12脂氧合酶(ALOX12)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)在心房组织中表达变化。方法选择健康雄性日本大耳白兔13只,随机选取8只白兔建立1型糖尿病兔模型,其中5只建模成功作为糖尿病组,另外5只白兔作为对照组。检查超声心动图、病理指标,并提取左心房组织蛋白进行Western blot检测。结果与对照组比较,糖尿病组室间隔厚度明显增加,LVEF明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。糖尿病组左心房组织胶原容积分数较对照组明显增加[(7.97±1.01)%vs(3.11±0.99)%,P<0.01]。糖尿病组左心房组织ALOX5、ALOX12表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);2组MCP-1表达比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论ALOX5、ALOX12表达可能与糖尿病兔心房炎症及纤维化相关。

5-脂氧合酶及Ki-67在星形细胞瘤中的表达及其相关性研究

目的:研究5-脂氧合酶(5-LOX)和Ki-67在星形细胞瘤中的表达及相关性。方法:免疫组织化学法检测60例星形细胞瘤(低度恶性33例,高度恶性27例)中5-LOX和Ki-67的表达,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测5-LOX和Ki-67的mRNA水平,另取14例行脑外伤内减压术的脑组织作为对照。结果:对照组中5-LOX和Ki-67不表达或低表达,星形细胞瘤中5-LOX阳性表达率66.7%(40/60),Ki-67阳性表达率71.7%(43/60);高度恶性组5-LOX和Ki-67的阳性表达率高于低度恶性组(P<0.01);5-LOX和Ki-67表达呈正相关(γ=0.875,P<0.01)。星形细胞瘤5-LOX和Ki-67的mRNA含量高于正常脑组织(P<0.01),高度恶性组5-LOX和Ki-67的mRNA含量高于低度恶性组(P<0.01),5-LOX和Ki-67在星形细胞瘤中的mRNA水平呈正相关(γ=0.781,P<0.01)。结论:5-LOX和Ki-67的表达与星形细胞瘤恶性程度有关,二者在星形细胞瘤发生发展过程中有协同作用。

5-脂氧合酶激活蛋白基因多态性增加阿司匹林抵抗易感性

目的探讨5-脂氧合酶激活蛋白（ALOX5AP）基因单核苷酸多态性与中国汉族人群阿司匹林抵抗（AR）的相关性。方法纳入450例持续服用阿司匹林（100mg,≥7d）的缺血性心脑血管病中的高危患者,血栓弹力图检测花生四烯酸途径的血小板聚集率,依据诊断标准分为AR组110例,阿司匹林敏感（AS）组340例。聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术分析SG13S32、SG13S89和SG13S114单核苷酸多态性。应用Haploview软件构建单倍型,并进行分析。结果 AR组与AS组SG13S114T/A突变A等位基因频率分布（40.5%vs 31.3%,P=0.01）和AA/TA基因型及TT基因型比较,差异有统计学意义（35.5%vs 46.2%,P=0.03）。而2组SG13S89、SG13S32基因型和等位基因分布频率比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。logistic回归分析显示,携带SG13S114AA/TA基因型的人群发生AR的风险是携带TT基因型的3.241倍（95%CI：1.552~6.767,P=0.002）。单倍型分析显示,TG是1种危险单倍型,携带TG单倍型的人群AR发生风险是不携带TG单倍型人群的1.490倍（95%CI：1.088~2.040,P=0.014）,AG是1种保护单倍型,可以减少AR发生的风险（OR=0.691,95%CI：0.502~0.952,P=0.029）。结论 ALOX5AP rs10507391与汉族人群AR相关;危险单倍型TG可增加AR发生风险。

七氟醚预处理对脊髓缺血再灌注大鼠5脂氧合酶表达的影响

目的探讨七氟醚预处理对大鼠脊髓缺血再灌注损伤时5脂氧合酶（5-LOX）表达的影响。方法雄性成年SD大鼠45只,体重250~300 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为3组（n=15）：假手术组（S组）、脊髓缺血再灌注组（I/R组）和七氟醚预处理组（I组）。采用胸主动脉球囊阻断＋体循环低血压法制备大鼠脊髓缺血再灌注模型。I组吸入3.4%七氟醚2 h,24 h后制备模型。于再灌注24 h时采用神经功能缺陷评分（NDS）法评价大鼠神经功能,随后处死取脊髓,分别采用Western blot法和RT-PCR法测定5-LOX、p-ERK1/2和t-ERK1/2蛋白及其m RNA的表达水平。应用ELISA检测血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量。结果与S组比较,I/R组和I组神经功能缺陷评分升高,I/R组5-LOX和p-ERK1/2蛋白及其m RNA表达上调,TNF-α含量升高,I组5-LOX m RNA和p-ERK1/2蛋白及其m RNA表达上调（P〈0.05）;与I/R组比05）。结论七氟醚预处理可能通过下调5-LOX表达,抑制ERK1/2信号通路,从而减轻大鼠脊髓缺血再灌注损伤。

AA861对人胃癌细胞凋亡及5-脂氧合酶mRNA表达的影响

目的探讨5-脂氧合酶(5-LOX)选择性抑制剂AA861对胃癌AGS细胞株凋亡及其5-LOX mRNA表达的影响。方法体外培养人胃癌AGS细胞,噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度(25,50,100μmol/L)组AA861不同作用时间(24,48,72 h)后AGS细胞的存活率。TUNEL染色法计数细胞凋亡指数。透射电子显微镜技术检测细胞的凋亡形态。RT-PCR检测AGS细胞5-LOX mRNA表达及AA861对其5-LOX mRNA表达的影响。结果AA861以时间剂量依赖的方式抑制AGS细胞的生长,与对照组比较差别有统计学意义(P<0.05,25μmol/L作用24 h除外),不同药物浓度作用后72 h细胞存活率最高为59.9%(25μmol/L组),最低为36.2%(100μmol/L组);TUNEL染色法显示50,100μmol/L作用48 h后细胞凋亡率为(24.6±3.3)%和(51.2±1.8)%,均高于对照组(P<0.01);透射电镜观察到典型的细胞凋亡形态。AGS细胞存在5-LOX mRNA的表达,AA861作用前后细胞5-LOX mRNA表达无改变。结论AA861能抑制AGS细胞株的生长,亦能诱导其凋亡,但不影响其5-LOX mR-NA的表达。

5-脂氧合酶激活蛋白基因多态性与缺血性卒中分子遗传学的研究进展

缺血性卒中是一个复杂性状的多基因遗传病，遗传流行病学研究结果提示遗传变异决定了其遗传易感性。近年来缺血性卒中遗传学的研究取得了长足的进展，通过连锁分析和关联分析陆续报告了一些与缺血性卒中相关的新的易感基因。5-脂氧合酶激活蛋白（5-lipoxygenase activating protein，ALOXSAP）基因是2004年鉴定出来的第一个与缺血性卒中密切相关的基因。本文就ALOXSAP基因多态性与缺血性卒中相关性的研究进展作一综述。

15-脂氧合酶-1在胃癌细胞AGS中的表达

目的研究15-脂氧合酶-1(15-LOX-1)基因在人胃癌细胞AGS中的表达及其对AGS增殖凋亡的影响。方法通过脂质体介导瞬时转染15-LOX-1基因于培养的AGS中,逆转录PCR法和免疫印迹法检测15-LOX-1 mRNA及蛋白表达;四甲基偶氮唑盐法(MTT)、流式细胞术、AnnexinV/PI染色与原位末端标记法(TUNEL)比较转染前后AGS的增殖和凋亡情况。结果胃癌细胞AGS转染后表达有15-LOX-1的mRNA及蛋白。与非转染组及空质粒转染组相比较,转染重组质粒组AGS细胞生长明显受到抑制并且细胞周期停滞在G1期,其凋亡率明显高于非转染组及空质粒转染组。结论15-LOX-1基因能够抑制胃癌细胞AGS的增殖,并促进其凋亡。

5-脂氧合酶代谢通路与肿瘤

花生四烯酸（AA）可通过环氧化酶（COX）途径代谢,亦可通过5-脂氧合酶（5-LOX）途径生成多种有生物活性的物质。5-LOX代谢通路中的蛋白在肿瘤中高表达,其表达水平与肿瘤的分期、转移、预后以及肿瘤对传统放化疗的敏感性相关,该代谢通路可通过影响细胞的增殖和凋亡、血管生成以及细胞的侵袭和迁移等机制参与肿瘤的发生发展：抑制该通路可以抑制肿瘤生长。现就5-LOX通路与肿瘤的关系及其在肿瘤诊治中的研究进展，综述如下。

5-脂氧合酶与细胞增殖及凋亡

5-脂氧合酶是5-脂氧合酶代谢通路中催化花生四烯酸转化为白三烯和氢氧化物的关键酶,在恶性肿瘤和多种病变细胞中高表达。它可以通过分裂原活化蛋白激酶激酶/细胞外信号调节激酶以及磷酯酰肌醇3激酶/蛋白激酶B等信号转导途径促进肿瘤细胞增殖,抑制肿瘤细胞凋亡。除此之外,5-脂氧合酶还可通过多种方式调控呼吸系统、消化系统以及循环系统等病变细胞的增殖与凋亡。

地塞米松、齐留通对哮喘大鼠5-脂氧合酶的调节

目的探讨哮喘大鼠中地塞米松、齐留通与5-脂氧合酶(5-LOX)基因、蛋白表达的关系。方法制备卵蛋白致敏哮喘大鼠模型;通过原位杂交、免疫组化等方法,观察地塞米松、齐留通对模型鼠5-LOX基因、蛋白表达的影响。结果哮喘组、地塞米松组肺组织中5-LOX mRNA、蛋白表达显著高于正常组、齐留通组(P<0.05);齐留通+地塞米松组5-LOX mRNA表达显著低于齐留通组(P<0.05)。结论糖皮质激素不能抑制5-LOX基因表达、蛋白合成;齐留通可抑制5-LOX基因表达、蛋白合成;糖皮质激素、齐留通联用较齐留通单用具有更强的抑制5-LOX作用。

5-脂氧合酶与消化系肿瘤的关系

5-脂氧合酶是催化花生四烯酸代谢产生5-OH-6,8,11,14-廿碳四烯酸和白三烯等类花生酸产物的重要酶类。近年来研究发现5-脂氧合酶与人类多种肿瘤的发生发展有关。本文主要综述5-脂氧合酶及其抑制剂与消化系肿瘤的关系。

5-脂氧合酶与脑缺血再灌注

5 脂氧合酶 (5 lipoxygenase,5 LO)是催化花生四烯酸转化为白三烯的关键酶。研究表明 ,5 LO参与了Alzheimer病、脑血管病、癫和脑肿瘤等多种神经系统疾病的发生和演变过程。脑缺血再灌注时 ,5 LO的表达增加可能促进了神经细胞死亡。

5-脂氧合酶在肾细胞癌中的表达及其临床意义

目的:探讨5-脂氧合酶(5-lipoxygenase,5-LOX)在肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)中的表达情况及意义。方法:应用免疫组织化学方法检测80例RCC组织和12例正常肾脏组织中5-LOX的表达及RCC中微血管密度(microvascular density,MVD),并分析其表达情况与RCC的临床病理学指标的关系。结果:5-LOX在RCC组织的阳性表达率(72.5%)高于正常肾组织(33.3%),差异有显著性(P<0.05),RCC组织中5-LOX表达与肿瘤大小、Fuhrman分级、临床分期及是否伴淋巴结转移密切相关,而与患者年龄、性别、肿瘤组织类型无关。RCC组织中5-LOX阳性表达组的MVD明显高于5-LOX阴性表达组(P<0.01)。结论:RCC组织中存在5-LOX的过表达,5-LOX可促进肿瘤血管形成,从而进一步促进肿瘤的生长,抑制5-LOX表达有可能成为治疗RCC癌的一个新的途径。

人支气管上皮细胞5-脂氧合酶介导4-氨基联苯的活化及DNA损伤

目的探讨人支气管上皮(HBE)细胞内5-脂氧合酶(5-LOX)对4-氨基联苯(4-ABP)的氧化活化及所致DNA损伤,为LOX作为前致癌物氧化活化的代谢途径提供依据。方法①体外酶系统实验:4-ABP在含有大豆脂氧合酶(SLO)的体外酶体系中反应,用分光光度法检测体系中反应产物生成。②细胞实验:4-ABP 100～800μmol.L-1染毒HBE细胞,MTT法检测HBE细胞存活率;Western印迹法检测5-LOX蛋白表达;单细胞凝胶电泳检测DNA损伤。同时,检测特异性5-LOX抑制剂AA861对5-LOX蛋白表达和多种酶抑制剂对细胞存活率和DNA损伤的影响。结果在过氧化氢参与下,SLO可以协同氧化4-ABP,LOX抑制剂去甲二氢愈创木酸可抑制该协同氧化作用。4-ABP可以使HBE细胞内5-LOX蛋白表达增加,AA861对5-LOX蛋白表达没有影响;4-ABP 400μmol.L-1可以使HBE细胞产生明显的DNA损伤,彗星细胞的阳性率达47.7%(P<0.01),AA861和萘普生可以抑制该浓度4-ABP所致的DNA损伤,最大保护率分别为58.1%和21.7%。结论 4-ABP上调HBE的5-LOX蛋白表达。5-LOX可能通过介导4-ABP协同氧化,导致DNA损伤,这可能是4-ABP致癌的机制之一。