羟基环氧素：一类新的具有生物活性的花生烯酸代谢物

羟基环氧素（ｈｅｐｏｘｉｌｉｎｓ，Ｈｘ）是继前列腺素（ＰＧｓ）和白三烯（ＬＴｓ）等新发现的一类具有广泛生物活性的花生烯酸经１２－脂氧酶的代谢产物，其分子结构中含有１个羟基、１个环氧基和３～４个非共轭双键。已报道的这类物质有：ｈｅｐｏｘｉｌｉｎＡ３、Ａ４及ｈｅｐｏｘｉｌｉｎＢ３、Ｂ４。其主要生物活性有：对白细胞的趋化活性及对中性白细胞的作用；促胰岛素的分泌；影响体内Ｃａ￣（２＋）的透膜速度；对中枢神经的调节作用等。

艾纳香油通过NF-κB非经典信号影响花生四烯酸代谢缓解LPS所致巨噬细胞的炎症反应

【目的】本文旨在探讨艾纳香油(BBO)通过核转录因子κB(NF-κB)非经典通路影响花生四烯酸(AA)代谢通路发挥抗炎作用。【方法】采用豚鼠离体回肠法检测BBO对慢反应物质(SRS-A)生成的影响,ELISA法检测BBO对脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞前列腺素E_(2)(PGE_(2))及白三烯B_(4)(LTB_(4))产生的影响,qRT-PCR检测BBO对LPS诱导巨噬细胞COX-2、5-LOX、FLAP和RelB表达的影响,Western blot检测BBO对NF-κB非经典通路蛋白肿瘤坏死因子受体作用因子3(TRAF3)、肿瘤坏死因子受体作用因子2(TRAF2)、NF-κB诱导激酶(NIK)、p100和RelB浓度的影响。【结果】在1mg·mL^(-1)的BBO药物浓度下减弱了豚鼠回肠的收缩张力(P<0.001),对SRS-A的生成抑制率达到65.34%;与LPS模型组相比,BBO在40-80μg·mL^(-1)浓度下降低AA代谢通路中PGE_(2)(P<0.05)和LTB_(4)(P<0.05)的浓度,降低COX-2(P<0.05)、5-LOX(P<0.05)和FLAP(P<0.05)的表达;此外,40-80μg·mL^(-1)浓度下BBO还降低LPS导致的NF-κB非经典通路中TRAF3(P<0.05)、TRAF2(P<0.05)和NIK(P<0.05)的浓度,进一步抑制p100蛋白的磷酸化(P<0.05),同时抑制转录因子RelB的表达(P<0.05)和RelB蛋白的水平(P<0.05),而BBO自身不引起这些基因与蛋白的变化。【结论】BBO可能通过抑制NF-κB非经典信号中调节蛋白TRAF3和TRAF2,转录因子RelB的浓度,造成NIK蛋白的诱导激酶作用受到抑制,进一步抑制了p100蛋白的磷酸化及其与转录因子RelB的结合,从而影响到下游AA通路中重要限速酶COX-2、5-LOX和FLAP的表达与炎症介质PGE_(2)和LTB_(4)的水平发挥抗炎作用。

体外催化花生四烯酸生产前列腺素F_(2α)

前列腺素F_(2α)(PGF_(2α))具有广泛的生理活性,是一种重要的脂质介质。为了实现PGF_(2α)的绿色生物合成,构建了pET30a-TbPGFS、pET30a-MmPGHS、pET30a-GvPGHS载体并在大肠杆菌BL21(DE3)中分别表达,同时对异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达条件进行了优化以提高重组蛋白在大肠杆菌中的表达量。另外,以最佳诱导表达条件下得到的重组蛋白为催化剂,催化花生四烯酸合成PGF_(2α)。结果表明:MmPGHS蛋白在大肠杆菌中没有表达;GvPGHS蛋白的最佳诱导表达条件为诱导剂IPTG浓度0.2 mmol/L、诱导温度30℃、诱导时间2 h,TbPGFS蛋白的最佳诱导表达条件为诱导剂IPTG浓度0.2 mmol/L、诱导温度30℃、诱导时间6 h;在最佳诱导表达条件下,由GvPGHS和TbPGFS的粗酶液构成的双酶催化未能检测到产物PGF_(2α),而在酶偶联化学催化时,GvPGHS能将花生四烯酸转化为PGH_(2),PGH_(2)被SnCl_(2)进一步还原为PGF_(2α)。综上,通过体外酶促反应结合化学法可高效转化花生四烯酸生产PGF_(2α)。

芪葛汤通过调节花生四烯酸代谢防治非酒精性脂肪肝的机制研究

目的研究芪葛汤防治非酒精性脂肪肝的体内、体外药理作用机制。方法构建单纯性脂肪变性(SS)和非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠模型,并模拟肝细胞脂质堆积的体外环境。利用芪葛汤干预模型大鼠,在体外实验中,则利用芪葛汤含药血清处理花生四烯酸诱导的肝细胞。全自动生化仪检测大鼠肝功能及血脂,油红O和血红素-伊红(HE)染色检测肝脏组织,免疫印记法检测体内和体外花生四烯酸相关蛋白的表达。结果芪葛汤显著降低了SS和NASH大鼠肝脏总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白(LDL)、ROS含量,并降低CYB5R3、CYB5和5-LOX的表达水平。结论芪葛汤通过调节花生四烯酸代谢防治非酒精性脂肪肝。

花生四烯酸(ARA)对凡纳对虾亲本繁殖、免疫及脂质代谢的影响

为探究花生四烯酸(ARA)对凡纳对虾亲本繁殖、免疫及脂质代谢的影响,实验根据实际亲虾培育与幼体生产模式,选取6月龄,大小规格一致的雄虾与单侧眼柄切除的雌虾,随机分为5组,雌雄分开养殖,分别投喂含有不同含量ARA(0.03%、2.70%、4.99%、10.63%)的软颗粒饲料(分别命名为Z1~Z4组)与纯生物饵料(沙蚕)的生产组(Z5)。结果显示,摄食饲料的雌虾增重率(WGR)比生产组显著提升,亲本肝胰腺指数(HSI)随着ARA含量的增加呈现先升后降的整体趋势,在4.99%ARA影响下亲本肝胰腺发育良好,孵化率最高,幼体产量最多质量最好,且卵巢发育相关基因(Vtg、VtgR、VASA与FAMeT2)表达最高;4.99%ARA添加量还可影响雌虾肝胰腺脂质代谢水平,提高脂质利用与转运相关基因(PL、SREPB与FATB)表达,进而影响受精卵中脂肪酸成分变化,显著增加功能性脂肪酸DHA含量,同时影响其中∑n-3 PUFA与∑n-6 PUFA含量及其之间比值。因繁殖与免疫的拮抗关系,造成该ARA含量下抗氧化应激与非特异免疫水平下降。研究表明,饲料中添加不同ARA能够影响凡纳对虾亲本生长与繁殖、免疫及脂质代谢能力,在优先考虑繁殖性能下,建议在亲虾饲料中保持4.99%ARA更能促进卵巢发育与幼体生产。

铁死亡调控因子花生四烯酸脂氧合酶-15与肿瘤相关性的研究进展

铁死亡(Ferroptosis)是一种铁依赖性的新型的细胞程序性死亡(PCD)方式。花生四烯酸脂氧合酶-15(Arachidonate 15-lipoxygenase,ALOX15)是铁死亡的重要调控因子,它可以催化多不饱和脂肪酸(Polyunsaturated fatty acid,PUFA)生成脂质氢过氧化物,从而促进铁死亡的发生。ALOX15参与了多种癌症的发生发展,并发挥重要作用。本文对铁死亡的重要调控因子ALOX15与乳腺癌、食管癌、胃癌、结直肠癌以及前列腺癌的相关性进行综述,为相关肿瘤的研究提供参考。

花生四烯酸衍生物在腹主动脉瘤发生发展中的作用

腹主动脉瘤(AAA)是老年群体常发疾病,发病率逐年上升,其容易破裂,死亡率高,目前并无有效药物可以延缓AAA的发生发展。AAA发病机制与细胞外基质降解、血管平滑肌细胞凋亡及炎症反应等密切相关。花生四烯酸衍生物广泛参与炎症反应、氧化应激等病理过程,尤其是前列腺素E2(PGE2)、前列腺素D2(PGD2)和血栓素A2(TXA2)等前列腺素,对AAA的发生发展具有重要作用。该文综述了花生四烯酸衍生物在AAA发生发展中的作用及其机制,以及药物的最新研究进展,为治疗AAA和发现新药物靶点提供思路。

花生四烯酸代谢与宫颈癌的关联研究

目的探究花生四烯酸(arachidonic acid,AA)代谢与宫颈癌的关联研究,为宫颈癌的代谢疗法提供新思路。方法采用CCK-8法、细胞划痕实验分别检测AA干预后宫颈癌细胞的活性、迁移能力;采用GEPIA 2、GSCA数据库进行生物信息学分析,研究AA代谢关键酶与宫颈癌进展、预后、通路激活和肿瘤免疫的相关性;采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测炎性细胞因子白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、环氧化酶2(cyclooxygenase 2,COX2)、花生四烯酸脂加氧酶15(arachidonic acid lipoxygenase 15,ALOX15)的mRNA表达情况。结果5μmol/ml的AA能显著促进宫颈癌细胞生长(t=7.672,P=0.0166),且同浓度下,细胞相对迁移率提高了30%(t=6.672,P=0.0026),炎性细胞因子的表达水平差异也有统计学意义(P<0.05)。进一步通过生物信息学分析发现,AA代谢关键酶COX2、ALOX15在宫颈癌中的表达水平显著上调(P<0.05),且不同分期中的表达有所差异,并增加患者不良预后的风险。其中,COX2可能通过降低酪氨酸激酶代谢水平,加重DNA损伤,加速宫颈癌进展。ALOX15可能通过提高静息CD8^(+)T细胞、B淋巴细胞浸润程度形成肿瘤炎性环境。结论AA代谢能促进宫颈癌细胞的增殖与迁移,并引起肿瘤炎性微环境的改变,其代谢关键酶COX2、ALOX15在其中可能起重要作用。

离子注入花生四烯酸产生菌诱变选育

利用离子束注入生物技术对花生四烯酸产生菌 (Mortierellaalpina)进行诱变高产菌筛选。筛选到高产菌I4 9 N18,该菌每升培养液可得生物量 30 80 g(约 4%的含水量 ) ,干菌体油脂含量为 2 5 8% ,其中花生四烯酸的含量占总脂的 45 37%。 30L和 2 5 0L发酵罐发酵试验 ,该高产菌的花生四烯酸得率为 4 0g/L。

低能离子注入在花生四烯酸(AA)高产菌株选育中的研究

利用低能离子束生物技术对花生四烯酸产生菌(Mortierella alpina)进行诱变选育。研究表明,在离子注入(10keV,3×1014N+/cm2)条件下,后代菌株离散程度明显高于自然分离。经连续诱变处理,最终获得一株花生四烯酸高产菌I49-N18,该菌每升培养液可得生物量26.3g,干菌体中油脂含量为33.8％,其中花生四烯酸的含量占总脂的52.36％。而其AA产量高达4.66g/L,比对照N7菌株产量提高126.2％,且继代遗传功能稳定,表明I49-N18是一株极具工业化前景的高产菌,同时证明离子注入是一种有效的诱变手段。

被孢霉生物合成花生四烯酸的初步研究

花生四烯酸不仅是细胞膜的重要成分，在维持细胞膜的结构与功能上发挥重要作用，而且是人体前列腺素合成的前体物质，对人体生理功能具有重要的调节作用。近年来研究发现，花生四烯酸在保护皮肤、降低胆固醇、抑制血小板聚集、提高免疫能力、促进胎儿发育等方面具有独特的...

花生四烯酸的生理学功能及利用真菌生产的研究进展

花生四烯酸是人体必需脂肪酸,具有极高的保健价值,利用真菌发酵生产花生四烯酸已成为国内外研究的热点。本文对花生四烯酸的生理功能以及利用真菌生产的研究进行概括。

氮饥饿与磷饥饿促使缺刻缘绿藻花生四烯酸含量增加的比较

以富含花生四烯酸(AA)的缺刻缘绿藻H4301为研究对象,探讨了不同光照强度条件下氮饥饿与磷饥饿对藻生物量、AA及脂肪酸含量变化的影响。发现氮饥饿与磷饥饿均降低了藻类的生长速率与生物量,当在60μmol photons/(m2.s)的低光照强度下,磷饥饿时的藻类平均生长速率最低[0.025 g/(d.L)],不足BG-11完全培养基中该藻生长速率的一半;氮饥饿与磷饥饿均能提高藻细胞总脂肪酸及AA的含量,但在低光照强度下磷饥饿的促进效果比较差;无论是完全培养基中还是饥饿处理时,200μmol photons/(m2.s)的高光照强度都不利于藻细胞AA及多不饱和脂肪酸的合成与积累;随着饥饿时间的不断持续,AA占总脂肪酸的百分含量逐渐增加,而亚油酸的百分含量逐渐降低,但在磷饥饿时,油酸的百分含量也增加,特别在高光照强度下,以油酸为主的单不饱和脂肪酸含量在第27天时占细胞干重的5.28%,以致AA含量的增加没有氮饥饿时的显著。从脂肪酸成分的变化来分析,该藻在氮或磷饥饿过程中主要是从亚油酸到γ-亚麻酸再到20∶3ω6这个途径来合成并积累AA,其中Δ6去饱和酶是限速酶,而ω3去饱和酶催化步骤受饥饿处理的负调控对确保AA的合成与积累有较大的积极作用。氮饥饿使藻细胞蛋白质合成受阻以及磷饥饿使核酸合成、糖类与能量代谢产生障碍,从而阻止藻类的生长并迫使细胞代谢流转向不含氮和磷的脂肪酸合成代谢,以提高藻细胞总脂肪酸及AA含量。

花生四烯酸及其代谢物的生物学作用

花生四烯酸 (AA)是人体的一种必需脂肪酸 .本文阐述它的存在与分布及生化代谢途径 ,并就AA及其代谢物的生理功能进行综述 .同时探讨它们与多种疾病的关系 ,说明应用药物影响AA的释放及代谢具有重要的临床意义 .

花生四烯酸和亚油酸对肝星状细胞增殖的影响

目的探讨花生四烯酸和亚油酸对大鼠肝星状细胞（ＨＳＣ）增殖的影响．方法用链霉蛋白酶和胶原酶原位灌流，ｎｙｃｏｄｅｎｚ密度梯度离心分离大鼠肝星状细胞，并以ＭＴＴ比色法观察花生四烯酸和亚油酸对ＨＳＣ增殖效应．结果花生四烯酸和亚油酸可影响ＨＳＣ的增殖．花生四烯酸２５ｍｇ／Ｌ对ＨＳＣ有增殖作用（Ｐ＜００１），而５０，１００ｍｇ／Ｌ对ＨＳＣ增殖有抑制作用（Ｐ＜００１），倒置显微镜观察可见ＨＳＣ增殖非常缓慢，ＨＳＣ细胞轮廓非常明显，胞质粗糙，内有颗粒沉积，１２５，６２５ｍｇ／Ｌ对ＨＳＣ增殖无影响．亚油酸６２５，１２５，２５ｍｇ／Ｌ对ＨＳＣ增殖无明显影响（Ｐ＞００５），但随着浓度增大，５０，１００ｍｇ／Ｌ则促进ＨＳＣ增殖（Ｐ＜００５或Ｐ＜００１）．结论花生四烯酸和亚油酸在一定浓度下可促进肝星状细胞增殖，高浓度对ＨＳＣ有毒性作用。

麝香的药理研究 Ⅳ.麝香对大鼠炎性渗出液中白细胞花生四烯酸代谢的影响

本实验从花生四烯酸(AA)代谢途径探讨麝香抗炎作用机理,用14_C标记花生四烯酸(14_C-AA)标记白细胞,观察麝香对大鼠角叉菜胶炎性渗出液中白细胞内AA释放及其代谢酶产物——白三烯B_4(LTB_4)和5-羟基廿碳四烯酸(5-HETE)生成的影响。实验表明,麝香水提物(MWF)浓度为6.25～37.5μg/ml时,抑制AA释放,释放量比对照组减少50～70％,但不抑制LTB_4和5-HETE的生成;MWF浓度加大至80μg/ml时,AA释放增加至对照组的1.5倍,但LTB_4和5-HETE生物合成却分别抑制了66.7％和90％。提示MWF具有抑制磷脂酶A_2(PLA_2)活性的作用,大剂量时又进一步阻断了AA代谢酶,如5-脂氧酶(5-LO),从而抑制了AA的过氧化,减少炎症介质,如LTB_4、5-HETE等的生成。

被孢霉菌发酵产生花生四烯酸的研究

研究了温度、培养基初始pH、碳源、氮源对被孢霉(Mortierella sp.)产生花生四烯酸的影响。正交试验结果表明,Mortierella sp.M10最佳培养基组成为(g/L):葡萄糖100,酵母膏10,KNO_3 4.0,KH_2PO_4 2.0,CaCl_2·2H_2O 0.1,MgSO_4·7H_2O 0.5,FeCl_3·6H_2O0.015,ZnSO_4·7H_2O 0.0075,CuSO_4·5H_2O 0.0005。采用最佳培养基及发酵条件,细胞干重和花生四烯酸产量分别为33.51g/L和0.827g/L。同时对摇瓶发酵过程进行了分析。

大规格鲈鱼(Lateolabrax japonicas)对饲料中花生四烯酸的需求量

选用初始体重(207.16±0.72)g的鲈鱼(Lateolabrax japonicas)为研究对象,研究大规格鲈鱼对花生四烯酸(Arachidonic acid,ARA)的最适需求量。通过在基础饲料中添加ARA?纯化油,制成ARA含量分别为0.05%、0.22%、0.37%、0.60%、1.38%及2.32%(占饲料干重)的6组等氮等能的实验饲料,进行为期84 d的生长实验。实验结束后,通过测定鲈鱼生长、体成分、抗氧化及肝脏健康等指标综合评价鲈鱼对饲料中花生四烯酸的需求量。结果显示,鲈鱼成活率在不同处理组之间无显著差异(P>0.05);鲈鱼的特定生长率(SGR)随着饲料中ARA含量的升高,呈先升高后相对平稳的趋势(P<0.05),且在ARA含量为0.37%饲料组出现最大值,饲料效率(FE)呈现出与特定生长率相同的趋势;饲料中不同ARA含量对鲈鱼的肝体比(HSI)、脏体比(VSI)、肥满度(CF)均无显著性影响(P>0.05);鱼体粗脂肪含量随着饲料ARA含量升高呈先减少后增加的趋势,粗蛋白含量则呈现出相反趋势;随着饲料ARA含量的升高,血清和肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)活力呈现先升高后降低的趋势(P<0.05),肝脏和血清中丙二醛(MDA)含量则呈现先降低后升高的变化趋势(P<0.05);血清中谷草转氨酶和谷丙转氨酶活性均在0.37%ARA水平时显著低于对照组(P<0.05)。以特定生长率与饲料效率作为评定指标,经折线模型分析得出,(207.16±0.72)g规格的鲈鱼对饲料中ARA的最适需求量均为饲料干重的0.37%。

阿魏酸钠对花生四烯酸代谢的影响

利用放射薄层方法测定兔血小板花生四烯酸代谢产物TXB_2,PGE_2和PGF_(2α)。用放射免疫法测定兔血小板TXB_2及主动脉6-keto-PGF_(1α)。阿魏酸钠(SF,0.1～3.2 mmol/L),抑制^(14)C-花生四烯酸转化为TXB_2,呈剂量效应关系,IC_(50)为0.762 mmol/L。SF在较高浓度(0.8～3.2mmol/L)时亦抑制PGE_2,PGF_(2α)的生成。用放免法观察到,SF对血小板TXB_2和动脉壁6-keto-PGF_(1α)的生成均有抑制作用,对TXB_2的作用较强。结果提示,SF可抑制兔血小板和动脉壁环氧酶活性。