花生肽亚铁离子螯合物的制备工艺研究

本研究以花生蛋白为原料,与FeCl_(2)·4H_(2)O反应制备花生肽亚铁螯合物,主要考察指标为亚铁离子螯合率,辅助考察指标为花生肽亚铁螯合物得率,在单因素实验基础上采用Box-Behnken响应面分析,考察pH值、温度、时间、肽铁质量比对螯合率的影响,从而得到花生肽亚铁离子螯合物的最佳制备工艺。结果表明,当pH值为7.0、螯合温度为35℃、螯合时间为30 min、肽铁质量比为4∶1时,螯合率最高,为65.09%。

双酶制备花生肽及其对NO·的清除能力

为对花生免疫活性肽的制备提供基础,采用蛋白酶水解花生蛋白制备花生肽,以花生蛋白水解度和NO·清除率为指标,优化酶种类组合及水解条件。结果表明:先采用Alcalase 2.4L碱性蛋白酶在花生蛋白质量浓度5 g/100 mL、超声功率400 W、超声时间5 min、pH 8.0、加酶量7 400 U/g、水解温度55℃条件下水解3 h,再加入2 480 U/g的中性蛋白酶,在pH 7.0、水解温度40℃条件下继续水解30 min,花生蛋白水解度可达到24.73%,花生肽NO·清除率的IC_(50)为1.88 mg/mL(显著低于商品大豆肽的3.51 mg/mL和商品酪蛋白肽的11.71 mg/mL);水解度在7.8%~39.1%范围内与NO·清除率有极显著线性关系,水解度超过22.6%时,与NO·清除率无显著线性关系。较高的水解度是花生肽拥有良好NO·清除能力的必要条件,但并非水解度越高越好。

花生肽亚铁稳定性及胃肠仿生消化行为研究

为研究花生肽亚铁口服后的人胃肠仿生消化行为及降解规律,以不同相对分子质量(<1.0 kDa、 1.0~3.0 kDa、>3.0 kDa)的花生肽为载体,以氯化亚铁为配体,分别制备L-PPC、M-PPC和H-PPC,考察了其稳定性和胃肠消化耐受性。研究表明:L-PPC比M-PPC和H-PPC具有更好的pH稳定性且存在极显著差异(p<0.01),H-PPC的pH稳定性最差;H-PPC热耐受性最差,特别是温度超过50℃后,亚铁螯合率低于50%,与L-PPC和M-PPC有极显著差异(p<0.01),L-PPC热耐受性最好;L-PPC胃酸耐受性明显高于M-PPC和H-PPC,胃仿生消化30 min,L-PPC和M-PPC亚铁螯合率差异不显著(p>0.05),与H-PPC差异极显著(p<0.01);胃仿生消化90 min和120 min时,M-PPC和H-PPC的亚铁螯合率分别为(71.83%±1.32)%、(56.61±1.16)%和(61.46±1.25)%、(53.90±1.33)%;胃仿生消化120 min时,L-PPC、M-PPC和H-PPC相对于胃仿生消化30 min,亚铁螯合率残存率分别为91.15%、69.05%和74.10%。M-PPC和H-PPC经十二指肠仿生消化60 min时,亚铁螯合率分别下降至(57.93±0.83)%、(45.65±0.87)%,再经小肠仿生消化180 min,亚铁螯合率分别下降至(38.42±0.85)%、(18.34±0.72)%,与L-PPC差异极显著(p<0.01),L-PPC具有较好的肠耐受性,H-PPC肠耐受性最差。结果说明,L-PPC相比M-PPC和H-PPC具有更优良的pH稳定性、热耐受性和胃肠消化耐受性。

花生肽亚铁胃肠仿生消化产物对金黄色葡萄球菌的抑菌机理

为探讨花生肽亚铁胃肠仿生消化产物作为抑菌剂的潜在可能性,从抑菌活性、表面疏水性、最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)、细胞膜渗透性、紫外吸收大分子物质和K^+泄漏等方面进行了研究。结果表明,胃肠仿生消化能增强花生肽亚铁抑菌活性;仿生消化270 min时表面疏水值最大;小肠仿生消化产物(simulated intestinal fragment,SIF 4)为0.2×10^-3 g/L时(MIC)对金黄色葡萄球菌有明显抑菌作用;试验组细胞膜渗透性、蛋白质和核酸等紫外吸收物质泄露与对照组均有显著差异(P<0.05)。经1/2 MIC、1/4 MIC和MIC处理后,金黄色葡萄球菌胞内K^+的泄露随温育时间延长呈递增趋势,特别是MIC组。研究认为,金黄色葡萄球菌经SIF 4处理后,细胞膜完整性遭到破坏而造成膜穿孔,使胞内蛋白质与核酸等生物活性物质外泄并造成菌体坏死,起到良好抑菌效果。因此,花生肽亚铁经胃肠仿生消化后可作为一种潜在的新型多肽金属抑菌剂应用于食品领域。

花生肽对小鼠抗运动性疲劳的实验研究

本文就花生肽对小鼠的抗运动性疲劳作用进行了研究。动物耐力实验中,与空白对照组相比,花生肽组能增加小鼠耐力实验中的负重游泳时间,降低生化指标中的血乳酸和尿素氮的水平,提高小鼠脏器指数,提高肝糖原、肌糖原的含量。花生肽样品的中、高剂量组均有显著抗疲劳作用,优于阳性对照人参的作用效果。因此,给予小鼠每400 mg.kg-1的花生肽可明显提高机体的抗疲劳作用,能显著促进运动能力的提高和疲劳的消除。

花生肽亚铁金属配位螯合物结构解析及稳态性研究

该试验采用紫外(UV)光谱和傅里叶变换红外(FTIR)光谱对制备得到的花生肽亚铁金属螯合物的结构进行确认,同时考察了其热稳定性、pH稳定性及醇溶性。紫外光谱结果表明,花生肽与亚铁进行了有效螯合;FTIR分析结果表明,亚铁离子可能与花生肽配体的羰基以共价配位键形成共轭结构环,花生多肽中氨基N与羧基O均参与亚铁配位螯合。结构稳态性研究结果表明,花生肽亚铁在温度10~60 ℃范围内和pH值1~8范围内均保持较好的稳定性,亚铁螯合率均>80%;醇溶性试验结果表明,在纯水和10%稀乙醇溶液中,花生肽亚铁保持较好的溶解性,溶解性达到95%以上,高浓度乙醇溶液中溶解性变差。结果表明,花生肽亚铁具有很好的热稳定性和pH稳定性,在纯水和体积分数10%的稀醇溶液中保持较好的溶解性。

响应面优化微波固相合成花生肽亚铁金属配位螯合工艺

以花生肽(相对分子质量<3.0 k D)为原料,以硫酸亚铁(Fe SO4·7H2O)为金属螯合剂,利用微波固相合成技术在单因素试验基础上,采取中心复合响应面法对花生肽亚铁配位螯合工艺进行了优化,建立了花生肽亚铁配位螯合工艺的二阶多项式非线性回归方程和数值模型,分析了微波辐射时间、花生肽亚铁配体比和引发剂用量对花生肽亚铁配位螯合的影响。结果表明,最佳花生肽亚铁配位螯合工艺为:微波辐射时间153 s,花生肽亚铁配体比5∶1,引发剂(H2O)用量3%,微波辐射功率608 W,反应物粒径120目,2.5%白炭黑(占花生肽质量)为脱酸剂,0.3%异抗坏血酸钠(占硫酸亚铁质量)为亚铁保护剂。在最佳条件下螯合率为(90.68±1.31)%,与模型预测值92.71%基本吻合。研究表明,以微波固相合成技术进行花生肽亚铁固相催化制备肽金属配位螯合营养强化剂可行。

花生肽对半乳糖致大鼠肝损伤的抑制作用

为研究花生肽对D-半乳糖诱导的大鼠化学性肝损伤的保护作用,将50只SD大鼠随机分为5组(对照组、模型组、低中高剂量花生肽组),除对照组外,其余各组大鼠按其体质量每天皮下注射D-半乳糖400mg/kg建立氧化损伤模型,同时3个花生肽组每天分别按200、500、800mg/kg的剂量灌胃,持续50d。检测血清生化指标以及肝脏中脂褐素含量和抗氧化酶活力,并进行肝组织病理学镜检。结果表明,花生肽能明显对抗氧化损伤大鼠血清中总胆汁酸的积累,抑制谷丙转氨酶和碱性磷酸酶活力的升高,提高肝脏中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶活力,并能够降低大鼠肝脏中的脂褐素含量,有效减轻大鼠肝脏的组织病理形态学变化。表明花生肽对D-半乳糖诱导的大鼠肝损伤有一定的保护作用。

花生肽的制备及其功能特性

对花生肽的功能特性、制备工艺以及主要用途进行了综述。采用碱性蛋白酶直接水解花生脱脂粕制备花生蛋白酶解物,对蛋白酶的选择、酶解条件的优化以及花生蛋白酶解物的品质等进行了讨论。将花生蛋白酶解物进一步分离纯化可获得具有特定功能性的花生肽制品。鉴于我国丰富的花生资源和花生肽制品的广泛用途,其开发前景十分广阔。

花生肽抗氧化性及抗氧化稳定性的研究

采用中性蛋白酶酶解花生蛋白制备花生肽,并对其抗氧化性及抗氧化稳定性进行研究。结果表明：采用中性蛋白酶酶解花生蛋白,最大水解度达8.0%,此条件下花生肽的平均相对分子质量为1 500;花生蛋白水解度在0~8.0%的范围内,花生肽抗氧化性随着水解度的增大而增大;花生肽抗氧化稳定性受加热和冷冻条件的影响较小,受p H的影响较大。

模拟人胃肠仿生消化对花生肽亚铁抗氧化活性的影响

为探讨花生肽亚铁在模拟人胃肠仿生消化条件下抗氧化活性变化规律,研究了仿生消化过程中表面疏水性、DPPH·清除率、O2-·清除率、·OH清除率、亚油酸氧化抑制活性和脂质过氧化抑制活性等指标变化。结果发现:模拟胃肠仿生消化后花生肽亚铁表面疏水性得到增强,仿生消化270 min时表面疏水性最大((15.84±0.33)μg);仿生消化增强了DPPH·清除活性,仿生消化300min时,DPPH·清除率为(88.77±1.00)%,显著高于1.0 mg/mL VC(p<0.05);胃肠仿生消化物O2-·和·OH清除活性分别显著低于1.0 mg/mL VC和0.6 mg/mL VC;胃肠仿生消化物具有较好的亚油酸氧化抑制作用,小肠仿生消化物抑制活性最高;仿生消化可增强脂质过氧化的保护效果,仿生消化330 min(质量浓度20 mg/L)时,脂质过氧化抑制效果最好,但显著低于VC对脂质过氧化的抑制作用(p<0.05)。试验结果表明,胃肠仿生消化可不同程度地增强花生肽亚铁的抗氧化活性。

抗氧化活性花生肽的氨基酸组成及质谱分析

目的:研究具有抗氧化活性花生肽的氨基酸组成及分子质量。方法:采用葡聚糖凝胶G-25、G-15对花生蛋白酶解液进行分离纯化,得到具有抗氧化活性花生肽组分J22和F22,通过氨基酸分析仪和液相色谱-飞行时间质谱联用仪进一步分析氨基酸组成及分子质量关系。结果:与在花生蛋白中的含量相比,J22组分中Ile从3.75%上升至13.34%,Met从0.79%上升至5.18%,Tyr由3.44%上升到45.84%,His由2.68%上升到12.53%;F22组分中Ile从3.75%上升至6.12%,Met从0.79%上升至3.78%,Tyr由3.44%上升到11.53%,His由2.68%上升到51.13%。J22组分主要是由分子质量为291.9D和391.3D的短肽组成的混合物,F22组分主要是由分子质量为205D和391.3D的短肽组成的混合物。结论:花生肽组分J22和F22中Tyr、His含量较高,分子质量小,易于吸收,且有一定分子质量及氨基酸残基决定的结构,是花生肽抗氧化活性较高的重要原因。

超滤法分离花生肽及其抗氧化活性的研究

用碱性蛋白酶解法制备花生多肽,将得到的花生肽酶解液通过超滤的方法进行分离得到不同分子量段的多肽,对其进行抗氧化活性的研究得到抗氧化活性最强的分子量段的多肽。将花生短肽酶解液稀释并分别通过5KD、3KD的卷式纤维膜进行超滤得到三个分子量段的花生短肽。比较各分子量段的多肽对二苯代苦味酰基(DPPH)自由基的清除率、抗亚油酸氧化能力、羟自由基的清除率及还原力。结果表明:花生肽具有一定的抗氧化能力,且3KD以下的多肽抗氧化能力最强,3～5KD分子量段的多肽次之,大于5KD分子量的多肽表现出较弱的抗氧化能力。

花生肽的体外抗氧化活性研究

本文对花生肽的体外抗氧化活性进行了初步研究.在对DPPH自由基的清除能力测定中,随着浓度的增加,花生肽显示出越来越强的清除能力,并呈现良好的量效关系.在还原能力的实验中,花生肽的还原能力明显不如维生素C,但随着浓度的增加呈现一定的还原能力.抗脂质过氧化能力的测定研究表明,花生肽在0.2 ～ 6.4 mg/mL浓度范围内呈现较好的剂量依赖关系,对卵黄脂蛋白脂质过氧化具有较好的抑制作用.

花生肽对衰老模型大鼠血清和心、脑组织抗氧化效果的影响

为研究花生肽的体内抗氧化效果,将50只SD大鼠随机分为5组(对照组、模型组、低中高剂量花生肽组),除对照组外,其余各组大鼠按其体重每天皮下注射D-半乳糖400 mg/kg建立衰老模型,同时3个花生肽组每天分别按200、500、800 mg/kg的剂量灌胃,持续50 d。检测大鼠血清和心、脑组织中丙二醛或脂褐质(LF)含量以及抗氧化酶活力。结果表明,花生肽能够有效抑制半乳糖致衰老大鼠体重的下降,减缓胸腺指数和脑指数的下降,提高大鼠血清、脑组织中SOD和GSH-Px活性,并能够降低大鼠血清MDA含量和脑中的LF含量,表明花生肽具有显著的抗氧化作用。

花生肽对四氯化碳致小鼠肝损伤的保护作用

研究花生肽对四氯化碳(CCl4)致小鼠急性肝损伤的保护作用。采用CCl4致小鼠肝损伤,测定血和肝组织匀浆的生化指标。花生肽组均能减轻CCl4致小鼠急性肝损伤,降低血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)的升高,增加组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力。花生肽对四氯化碳致小鼠急性肝损伤均有明显的保护作用。

花生肽对原发性高血压大鼠的降压作用

研究花生肽对原发性高血压大鼠(SHR)的降压作用。采用鼠尾体外间接血压测量方法,观察花生肽单次给药和连续给药对SHR大鼠血压的影响。单次给药后,花生肽组可以降低SHR大鼠的血压;连续给药14d,花生肽组可以稳定降低SHR大鼠的血压并维持在较稳定的水平。单次或连续给药花生肽均对SHR大鼠具有降低血压的效果。

花生肽功能特性研究进展

花生肽因其丰富的营养价值、卓越的功能特性、独特的吸收机制,近来备受关注。综述了国内外对花生肽的功能特性的研究进展,分析问题并提出展望,为花生肽的合理开发提供指导。

固态发酵结合酶解技术制备花生肽及其促生长活性的研究

通过米曲霉固态发酵花生粕,结合酶解与冷冻干燥技术,制备花生肽。促生长实验表明,以0.5%添加分子量小于3ku的花生肽对保加利亚乳杆菌的促生长作用更为明显,其中乳杆菌的活菌数可提高1个数量级,凝乳效果改善,乙醛含量增加。比较氨基酸组成结果表明,该技术可有效提高氨基酸含量,改善氨基酸组成,乳杆菌生长必需的氨基酸含量达33.61~226.33mg/g。

花生肽对小鼠运动能力及心肌抗氧化能力影响的研究

目的:观察花生肽对小鼠运动能力和心肌抗氧化能力的影响。方法:昆明种小鼠随机分为6组,安静对照组、安静花生肽样品(400 mg·kg-1)组、运动对照组、运动花生肽样品高、中、低三个剂量组。运动各组进行连续4周的游泳训练,连续给药至第28天进行一次负重耐力实验。测定心肌丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,测定血清谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、肌酸激酶(CK)活性。结果:花生肽处理组心肌MDA含量明显降低,心肌SOD、GSH-Px和CAT活性均高于相应的对照组。花生肽处理组小鼠运动能力显著增强。运动花生肽中剂量、运动花生肽高剂量组和运动对照组相比,血清中GPT、GOT和CK活性显著降低。结论:花生肽通过增强心肌抗氧化能力,减轻了剧烈运动对心脏造成的损伤,来发挥它的心脏保护作用。