花粉介导法获得油菜转基因植株研究

以甘蓝型冬油菜品种晋油7号为受体,载有GUS基因的质粒pBI121为供体,在7.5%的蔗糖等渗溶液中,通过花粉介导转化方法将GUS基因导入油菜花粉,随着花粉管的萌发进入胚囊,参与有丝分裂,将外源质粒转入受体材料。经田间植株性状比较、GUS组织化学定位检测、PCR扩增检测及PCR-Southern杂交检测,证明外源GUS基因已整合到油菜基因组中。

玉米耐热DNA聚合酶基因表达载体构建与花粉介导转化

实验构建热稳定性聚合酶的基因表达双元载体,利用花粉介导法将热稳定性DNA聚合酶基因导入玉米幼胚,获得耐热转基因玉米株系。用热稳定性DNA聚合酶基因构建表达载体;然后利用花粉介导法进行转化,花粉收集自仲恺自交系玉米甜1号和自交系糯2号,将花粉与构建好的基因表达载体混合,利用花粉介导法进行转化;将收集到的T1代种子用PCR凝胶电泳技术和Southern杂交技术进行检测,选出阳性的转化株;在T2代经过田间耐热压力试验结合测定的玉米生理指标,筛选出9个具有良好耐热性玉米株系。