以胆碱脱氢酶基因对小黑杨花粉植株的遗传转化

以小黑杨(Populussimonii×P.nigra)花粉植株叶片为外植体,用根癌农杆菌介导法将胆碱脱氢酶基因(betA)导入其中,将获得的4株卡那霉素抗性转基因株系进行PCR检测,结果均为阳性。用荧光定量PCR对转基因株系的betA基因转录结果检测表明,4个转基因株系均已表达外源基因,但表达量有差异。对获得的4株转基因株系及对照进行NaCl胁迫处理,当NaCl浓度为0.55%时,非转基因小黑杨花粉植株生根率为0,转基因株系生根率为80%￣100%;在NaCl为0.70%￣0.80%时,则转基因株系生根率也为0。4个转基因株系的甜菜碱含量显著高于未转基因对照,说明betA基因的导入提高了转基因株系的耐盐性。

转betA基因的小黑杨花粉植株耐盐性分析

甘氨酸甜菜碱是植物细胞内一种重要的调渗物质,盐胁迫下,甘氨酸甜菜碱的积累可以保护细胞内蛋白质的结构和功能,降低细胞水势,从而增强植物自身的耐盐能力。从大肠杆菌中克隆的胆碱脱氢酶基因(betA)是甘氨酸甜菜碱合成的关键酶基因,该基因编码的胆碱脱氢酶(CDH)可将胆碱一步合成为甜菜碱。本实验室已将胆碱脱氢酶基因(betA)转入到小黑杨花粉植株基因组中,并最终获得了4个转基因株系。本研究以4个转betA基因株系(TB1、TB2、TB3、TB4)及非转基因对照为试材,在浓度为1.2%的NaCl盐胁迫下,测定其甜菜碱含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化物酶(POD)活性和丙二醛(MDA)含量,并调查试材的盐害情况,计算盐害指数,目的是为了研究转基因株系的耐盐效果,从中筛选出耐盐能力较强的转基因株系。试验结果表明,4个转基因株系的甜菜碱含量均高于非转基因对照;在1.2%NaCl胁迫下TB1、TB2、TB4的超氧化物歧化酶活性、过氧化物酶活性均高于非转基因对照,TB3低于对照;TB1、TB4的丙二醛含量低于对照,TB2、TB3与对照相近。进一步的盐害分析表明4个转基因株系中的TB1和TB4株系的盐害指数低于对照的42.1%和33.4%,TB2、TB3与对照无显著差异。综合各转基因株系的耐盐性及生理指标测定结果,4个转基因株系中,TB1、TB2的耐盐性明显优于对照,有希望用于盐碱地造林及推广。

用保卫细胞鉴定花粉植株倍性方法的研究

本文提出了鉴定花培再生植株结实性的可靠指标:即以主茎心叶下,第二叶尖的保卫细胞长度达65μm以上,为自然加倍的可育植株;反之,如长度在65μm以下者,则为不育的单倍体植株,准确度达90%以上,且能及时采取措施,挽救不育株以减少损失;更重要的是:看到为保证植株的结实性,保卫细胞大小必须达到一定水平。这一遗传规律,可供细胞工程和育种工作者参考。

烟草花粉植株染色体倍性苗期快速鉴定

为了提高烟草单倍体育种中花粉苗的利用效率,采用气孔保卫细胞叶绿体计数法对花粉植株染色体倍数性鉴定进行了研究.结果表明:单倍体、二倍体、多倍体的叶绿体数平均值分别为11.559,20.458,35.056个,差异极显著;通过对叶片进行失水处理,解决了幼嫩叶片不易制片的问题,结合第3,5,8,13,17叶的叶绿体数分布,将鉴定时期提到了移栽前的第5叶,得出了每株只计数1个气孔叶绿体数的一种快速、准确的计数方法——叶绿体数倍性分界法.该方法准确率高达98.5%.

光(温)敏核不育系花粉植株的育性转换及纯化效果的研究

对三个光 (温 )敏核不育系培矮 6 4 S、培选 S以及农垦 5 8S进行花药培养 ,其花粉植株均具有育性转换的特性。在 H3代花粉植株的株系中 ,获得花粉不育度 >99.5 %的植株比率 ,高于对照的株系 ,证实了应用花培对光 (温 )

栽培稻与野生稻杂交后代花粉植株的诱导及其性状表现

经多年对栽培稻与野生稻（下称栽野）杂交后代花药培养效率的研究，获得提高栽野稻杂交后 代花培效率的培养基和技术方法。通过花粉植株农艺性状和抗病性观察，认为花粉植株一代具有遗传 多样性，２～４代具有遗传相对稳定性。按育种目标选择抗病力强，传递力高的野生稻与丰产、农艺性 状优良的栽培稻杂交，通过花药培养并对后代实施严格选择，可迅速获得新的优质源。

花粉植株染色体倍性及加倍技术研究进展

主要介绍了国内外花粉植株染色体倍性、倍性鉴定以及染色体加倍技术的研究进展。

农杆菌介导小黑杨花粉植株转化体系的建立

通过对影响根癌农杆菌介导小黑杨花粉植株转化效果各种因素的研究,建立了小黑杨花粉植株高效稳定的转化体系。研究结果表明:小黑杨花粉植株叶片外植体在分化培养基中预培养2 d,用OD600值为0.1的工程菌液侵染3～5min,黑暗条件下共培养2～3 d,采用适宜的脱菌方法有利于提高遗传转化率,而用在培养基中加入CaCl2则不利于遗传转化;叶片外植体与农杆菌共培养后,经过抗性芽的诱导、叶片的再分化和根的再生,3个月后即可获得抗性苗;抗性植株经PCR和Southern斑点杂交检测,表明外源基因已转入小黑杨花粉植株的基因组中。

MET调控水稻花粉植株生长的研究

研究了 MET(多效唑)在水稻花粉植株生长调控中的效应.结果表明:(1)2 mg/L 的MET 和6%蔗糖、0.2 mg/L NAA 相配合的生根培养基,无根水稻花粉植株培养30 d 后单株生根平均可达7.2条,平均根长2.8 cm,生根苗率为94.8%;(2)在越冬过程中培养基含有MET 时,有明显的抑制花粉植株地上部生长、促进根系发育,保证花粉植株在试管内安全越冬的作用;(3)MET 处理过的花粉植株移栽后成活率为96%左右而且生长健壮.

黑麦染色体在小黑麦×小麦F_1花粉植株中的传递

对93株小黑麦×小麦的第一代花粉植株(H_1)进行细胞学观察,并用Giemsa分带技术鉴定其中的黑麦染色体,不同黑麦染色体表现出不同的传递频率。6R最高,1R、3R次之,7R最低。花粉植株中还发现黑麦染色体端体。

小黑麦×小麦杂种F_1花粉植株中D-R染色体的重组

对93株六倍体小黑麦×普通小麦杂种F_1花粉植株进行了细胞学观察,Giemsa分带鉴定黑麦染色体,分析花粉植株中D、R染色体的分布组成。花粉植株染色体数目集中在2n=23附近,D、R两组染色体表现不同的数量分布:黑麦(R)染色体从数量上趋于随机分布;小麦(D)染色体却趋于大部分保留。初步分析了产生这种现象的原因。

普通野生稻花粉植株抗白叶枯病性的研究

在自然繁衍的抗白叶枯病普通野生稻中有抗性完全和不完全纯合两种类型.通过花药培养,对H_1代花粉植株进行人工接菌鉴定,证明原抗性不纯的杂合体可变为抗性纯合体.抗性纯合的抗源在水稻育种、生物技术及其理论研究中将有更大的利用价值.

调控冬小麦花粉植株正常化生长技术的研究

3毫克/升的多效唑(MET)和8%蔗糖相结合的壮苗培养基,在22℃条件下培养30天,无根冬小麦花粉植株单株生根平均可达7.5条,平均根长为2.7厘米,生根率为89.4%.在越夏过程中培养基含有多效唑时,对花粉植株有明显的抑制发育、抑制株高生长和促进试管花粉植株增加分蘖的作用.移栽后30天调查,成活率达95.2%,与壮苗培养基中不含多效唑的对照相比提高29.7%.

玉米花粉植株的生育特性及其栽培管理

玉米花粉植株的育成,为单倍体育种提供了可能。但移栽成活率低,结实株数少,影响了在育种实践中的应用。我们研究了花粉植株的生理特性,并通过调节激素,改善相应的栽培管理措施,创造最适的生育条件培育壮苗,结果移栽成活率大幅度提高。在生育期间保持18～32℃,增加光照时间和强度,结实株数有了明显的增加。

粳稻花粉植株后代的性状遗传及其育种应用研究

本文根据十余年来对粳稻花粉植株后代性状遗传的观察研究,证明花粉植株一代染色体的倍性表现出多种效型,因而产生了多种多样不同性状的植株.从第二代(H_2) 开始,花粉植株的主要农艺性状具有相对稳定性,差异不显著,没有随世代的演变而发生退化或分离现象,也未发现育性的逆转现象. 实践证明,应用粳稻花粉植株进行育种是可行的,它能迅速稳定杂种后代和有较高的选择效率.因此,这是一种多、快、好、省的育种方法.

卡那霉素对小黑杨花粉植株叶片分化及试管苗生根的影响

探讨了卡那霉素对小黑杨花粉植株叶片分化及试管苗生根的影响。确立了由农杆菌介导的的小黑杨花粉植株遗传转化研究中转化体的筛选浓度,其中叶片转化筛选阶段卡那霉素的浓度为:20 mg.L-1～40mg.L-1;抗性芽生根培养阶段卡那霉素的浓度为20 mg.L-1。

水稻花粉植株后代主要农艺性状的遗传分析

以乙岫４－１０×矮台６６，ＳＨ５２×乙岫４－１０和乙岫４－１０×ＳＨ５２三个杂种的花粉植株后代Ｈ２、Ｈ３及其亲本、Ｆ１、Ｆ２为材料，对株高、穗长、抽穗期等３个主要农艺性状作了遗传分析，证实花粉植株株系内遗传的同质性和稳定性，以及株系间遗传的多样性。Ｈ２株高、抽穗日数、千粒重等的遗传方差（以加性方差为主）大于Ｆ２的遗传方差，因此在Ｈ２代进行选择是有效的。Ｈ２中隐性性状出现的比例高于Ｆ２中隐性性状的比例，与Ｆ２相比，Ｈ２的平均株高降低、抽穗期较早，有效穗数较多，利用花培方法有利于选择高产。

水稻花药培养育种中花粉植株群体规模探讨

水稻花药培养育种中花粉植株群体规模探讨刘保申（山东农业大学农学系）张建军，殷丽青，杨晓艳，章振华（上海市农业科学研究院）关键词水稻；在药培养；加倍单倍体；花粉植株；群体规模中国法分类号：Ｓ５１１．１ＩＮＱＵＩＲＩＮＧＩＮＴＯＴＨＥＰＯＰＵＬＡＴＩＯＮ...