玉米花粉粒直接PCR技术研究

利用成熟花粉粒制成悬液作为玉米基因组DNA模板直接进行PCR扩增 ,研究了不同花粉悬液浓度、花粉上清液对RAPD -PCR的影响。结果表明 :花粉悬液浓度在 4μg 5 0 μl以上 ,用 10碱基随机引物均能扩增出较清晰的PCR条带 ,且与叶片按改良Guidet法提取的DNA模板扩增的RAPD带型无明显差异 ,利用花粉悬液能有效地进行基因组DNA变异的RAPD分析和基因SCAR标记的检测。玉米单株花粉量可用于数百次以上的PCR反应 ,较叶片等植物组织用常规法提取DNA快速、简便、廉价 ,可有效地应用于以PCR为基础的植物基因组DNA变异、农艺性状的RAPD标记和分子标记辅助育种的研究。