7112例过敏性鼻炎患者花粉过敏原检测分析

目的 了解宁夏地区过敏性鼻炎(allergic rhinitis,AR)患者的花粉过敏原致敏谱,分析不同年龄和性别间阳性致敏原的差异,为AR患者的治疗和预防提供依据。方法 采用皮肤点刺试验(skin prick test,SPT)对2021年12月至2022年12月就诊于宁夏8所监测医院呼吸科、耳鼻喉科和儿科门诊的7 112例AR患者进行花粉过敏原检测,分析检测结果,并探讨检测结果的年龄和性别差异。结果 7 112例AR患者花粉SPT阳性率为68.81%,其中AR患者花粉过敏原阳性率最高的两种花粉为大籽蒿花粉(57.27%)和黄花蒿花粉(41.42%),合并4种及以上花粉过敏原SPT阳性者占35.45%;大籽蒿花粉和黄花蒿花粉致敏级别主要为3~4级;AR患者花粉过敏原SPT阳性率随年龄增长呈现先递增后递减趋势,10~<20岁年龄组花粉过敏原SPT阳性检出率达峰值(79.59%),8种花粉过敏原在不同年龄组的差异均有统计学意义(P均<0.05);不同性别间比较,大籽蒿花粉、葎草花粉、柳树花粉、杨树花粉、家榆花粉、槐树花粉阳性率男性高于女性(P均<0.05)。结论AR患者常合并4种及以上花粉过敏原致敏,10~<20岁年龄组SPT阳性检出率达峰值,大籽蒿花粉和黄花蒿花粉是宁夏地区AR患者最常见的花粉过敏原。

重组法国梧桐花粉过敏原2(rPla a2)对诱导型一氧化氮合酶(NOS2)基因启动子活性及基因表达的影响

目的:构建人诱导型一氧化氮合酶(NOS2)基因启动子区,对NOS2启动子序列进行鉴定并分析其活性;探索重组法国梧桐花粉过敏原2(r Pla a2)对人NOS2基因启动子活性及基因表达的影响。方法:利用PCR扩增、限制性内切酶双酶切、DNA连接酶连接、大肠杆菌转化等方法将NOS2基因启动子区克隆至pGL3-Basic载体上,将所构建重组报告质粒转染至人胚肾(HEK293T)细胞中,利用双荧光素酶活性分析检测该重组报告质粒启动子活性及检测rPla a2对人NOS2基因启动子活性的影响;用实时荧光定量PCR法检测rPla a2对人NOS2基因mRNA水平的影响。结果:成功构建含有NOS2启动子的重组报告质粒,与对照(p GL3-Basic)组相比,含NOS2启动子区的重组质粒转染组荧光素酶活性显著增高;与不加刺激(NOS2)组相比,加入rPla a2刺激后含NOS2启动子区的重组报告质粒转染组荧光素酶活性显著增高,加入rPla a2刺激后NOS2 mRNA相对表达水平显著增高。结论:rPla a2可增强人NOS2基因启动子活性,并增加其基因表达。

间接ELISA法检测蚕豆花粉过敏原最优条件的建立

油菜花粉过敏原粗提液为抗原包被酶标板,文章通过对间接ELISA各反应条件的优化,确定了最佳反应条件。结果血清稀释度为1∶10,anti-human Ig E/HRP稀释度为1∶1000。采用已建立的间接ELISA反应条件,对10份阴性血清的检测结果进行统计学分析,确定间接ELISA的判定标准,D450值大于等于0.158为阳性。

重组法国梧桐花粉过敏原2(rPla a2)通过GATA3上调NIH3T3细胞ORMDL3表达

目的探索重组法国梧桐花粉过敏原2(rPla a2)对小鼠NIH3T3细胞血清类黏蛋白1样蛋白3(ORMDL3)表达的影响及相关调控机制。方法实时定量PCR和Western blot法分别检测rPla a2对NIH3T3细胞ORMDL3和GATA3 mRNA和蛋白水平的影响;通过干扰和过表达观察GATA结合蛋白3(GATA3)在rPla a2调节ORMDL3表达中的作用;通过双荧光素酶活性分析检测rPla a2和GATA3对ORMDL3基因启动子活性的影响。结果 rPla a2增强NIH3T3细胞ORMDL3基因启动子活性,并增加其mRNA水平和蛋白表达;同时增加GATA3 mRNA和蛋白表达。敲低GATA3抑制rPla a2对ORMDL3基因的诱导作用,过表达GATA3则可增强该诱导作用。结论 GATA3可介导rPla a2对NIH3T3细胞ORMDL3基因的转录调控。

欧蓍草花粉主要过敏原Parj1的重组表达及鉴定

目的:克隆、表达和纯化欧蓍草花粉主要过敏原Par j1。方法:根据Parj1.0102在GenBank中的序列号获得其核苷酸和氨基酸序列,确定开放阅读框,采用DNAstar软件优化密码子,合成全基因,并克隆到表达载体pET-44a中,转化表达宿主大肠杆菌Rosetta,优化蛋白表达条件并进行亲和层析纯化和Western blot鉴定。结果:PCR扩增及重组质粒测序结果表明成功地构建了pET-44a+/Par j1.0102原核表达质粒。对表达菌表达条件进行优化,最终确定在30℃,IPTG浓度为1.0 mmol/L,诱导4小时时蛋白表达量最高,重组蛋白经亲和层析纯化,SDS-PAGE分析纯化产物在23 kD处有明显的条带。Western blot表明重组蛋白具有与StrepII标签抗体结合活性。结论:国内首次获得融合StrepII标签的Par j1.0102重组蛋白,为欧蓍草花粉过敏诊断及特异性免疫治疗奠定基础。

昆明市城区皮肤过敏花粉的调查研究

目的探讨昆明城区皮肤过敏患者花粉过敏原与空气中主要气传花粉的相关性,为过敏性疾病的防治提供科学依据.方法采用皮内试验检测96例昆明城区皮肤过敏患者的过敏花粉,同时采用Durham重量法连续收集昆明市城区气传花粉;用光学显微镜鉴定并统计花粉种类、数量.结果芸苔属花粉致敏阳性率最高,为39.5%,桤属和松属花粉分别位居第2和第3,致敏阳性率分别为35.4%和34.4%.全年搜集花粉共36555粒,松花粉在空气中含量最多,桤属花粉位居第2,禾本科、蔷薇科花粉分别居第3和第4.并在2～4月及9～11月形成两个花粉飘散高峰期.结论昆明城区皮肤过敏花粉主要是芸苔属、桤属和松属花粉,空气中含量多的花粉是松花粉、桤属和禾本科花粉有相关性.

宁夏吴忠地区过敏性鼻炎过敏原筛查260例

目的了解宁夏吴忠地区过敏性鼻炎发病情况,掌握其过敏原分布特点。方法选择2007年以来260例诊断为季节性过敏性鼻炎患者,通过皮肤点刺试验行过敏原筛查。结果 260例患者中检出阳性(+)以上者235例,阳性率为90.38%;蒿属花粉阳性(+)以上者193例,过敏原阳性率占74.23%。结论皮肤点刺试验检测蒿属花粉过敏原在过敏性鼻炎病因筛查及相应治疗中具有重要的临床应用价值。

舌下过敏原免疫治疗剂对季节性过敏性鼻结膜炎有效

德国研究者报道，用禾本科花粉提取物进行长期舌下免疫治疗可减少对禾本科花粉患季节性过敏性鼻结膜炎(SAR)儿童的抢救用药，但对SAR症状无明显作用。他们的多中心研究包括97名该病患者，年龄3～14岁，随机用0．5μg主要禾本科植物花粉过敏原(Pangramin SLIT)舌下免疫治疗，或接受安慰剂治疗，每周3次共32个月。

上海地区常见气传树木类花粉研究进展

伴随着工业化的进程、生活方式的变化、植物栽培的发展以及空气污染的加重,过敏性疾病,尤其是过敏性鼻炎、哮喘的发病率在世界范围内逐年增加。树木类花粉是世界各国最常见的春季致敏花粉,是诱发季节性过敏性鼻炎及哮喘的主要原因之一。本文就与上海地区常见树木气传花粉相关的花粉飘散、人群致敏、致敏蛋白组分、诊断及治疗等相关研究进行综述。

重阳木花粉相关变应原profilin基因的克隆、表达及免疫学鉴定

克隆、表达和纯化重阳木花粉相关变应原profilin基因,并对其免疫学活性进行鉴定。采用RT-PCR和3-’RACE技术获得整个profilin基因的开放阅读框,将其与PET28a载体连接并转化大肠杆菌E.cdiBL21(DE3)进行诱导表达,通过Ni2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,采用Western blot检测其IgE结合活性。克隆获得了profilin的全长基因,开放阅读框为396个碱基(包括终止密码子),编码131个氨基酸。成功地构建了原核表达载体,并在大肠杆菌中大量地表达了profi-lin,纯化后的重组蛋白进行免疫印迹,结果显示重阳木花粉过敏患者血清对重组profilin反应呈阳性。