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矮牵牛PhABCG26基因克隆及花药特异性表达分析 被引量:3
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作者 李娅 杜菊花 +4 位作者 江海燕 李玉立 胡惠蓉 王良桂 岳远征 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期27-34,共8页
以矮牵牛为试验材料,结合前期矮牵牛花药转录组数据库信息,通过PCR克隆从矮牵牛花药中获得ABCG26基因cDNA全长,该基因开放阅读框2 091 bp,编码696个氨基酸。通过生物信息学分析发现,PhABCG26蛋白是一类典型的ABCG半分子转运蛋白,具有跨... 以矮牵牛为试验材料,结合前期矮牵牛花药转录组数据库信息,通过PCR克隆从矮牵牛花药中获得ABCG26基因cDNA全长,该基因开放阅读框2 091 bp,编码696个氨基酸。通过生物信息学分析发现,PhABCG26蛋白是一类典型的ABCG半分子转运蛋白,具有跨膜结构,无信号肽,预测定位于细胞质膜上。系统进化分析表明,PhABCG26与其同科烟草、辣椒、番茄以及马铃薯ABCG家族亲缘关系较近。荧光定量qRT-RCR发现PhABCG26基因为矮牵牛花药组织特异性表达基因,花药发育前期表达量较高。研究结果为进一步探究该基因功能及培育矮牵牛雄性不育系植株奠定基础。 展开更多
关键词 矮牵牛 PhABCG26 基因克隆 生物信息学分析 花药特异性
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矮牵牛PhACOS5基因的克隆及花药特异性表达分析 被引量:5
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作者 岳远征 王晰 +4 位作者 李娅 王良桂 郭苏明 田绍泽 胡惠蓉 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期4861-4866,共6页
酰基辅酶A合成酶5基因(ACOS5)是孢粉素前体生物合成过程中的关键基因,对植物花药的育性具有重要的影响。本研究以矮牵牛(Petunia hybrida)品种‘幻想’为材料,结合前期矮牵牛花药转录组数据库信息,通过PCR克隆从矮牵牛花药中获得了ACOS... 酰基辅酶A合成酶5基因(ACOS5)是孢粉素前体生物合成过程中的关键基因,对植物花药的育性具有重要的影响。本研究以矮牵牛(Petunia hybrida)品种‘幻想’为材料,结合前期矮牵牛花药转录组数据库信息,通过PCR克隆从矮牵牛花药中获得了ACOS5基因的c DNA全长,命名为Ph ACOS5。该基因开放阅读框为1 683 bp,编码560个氨基酸,没有信号肽和跨膜结构,预测定位于细胞质中。氨基酸序列分析表明,该基因编码的氨基酸序列具有ACOS家族中保守存在的结构域。序列进化分析表明,Ph ACOS5与其同科的辣椒属植物辣椒以及番茄属植物番茄和马铃薯的ACOS5蛋白亲缘关系较近。荧光定量RT-PCR(q RT-RCR)分析证实了该基因为矮牵牛花药组织特异性表达的基因,且在花药发育的前期表达量较高,并具有花药发育时期的特异性。本研究结果将为今后使用基因编辑等技术创造矮牵牛雄性不育植株提供有效的基因资源。 展开更多
关键词 矮牵牛 酰基辅酶A合成酶5 育性 花药特异性
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烟草花药特异表达基因启动子的克隆及序列分析 被引量:10
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作者 彭仁旺 周雪荣 +2 位作者 周奕华 方荣祥 莽克强 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期247-250,共4页
通过PCR扩增,从烟草(Nicotiana tabacum cv.NC89)中克隆了花药绒毡层中特异表达基因的启动子,序列分析表明,该启动子含1303个核苷酸,与已报道的序列比较,核苷酸的同源性为99.4%。
关键词 烟草 花药特异性 启动子 基因表达 序列分析
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百合花药和雌蕊特异启动子功能分析
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作者 娄倩 刘雅莉 +1 位作者 辛轶 李莉 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2010年第10期138-144,共7页
【目的】从"索邦"百合(Lilium orential"Sorbonne")中克隆查尔酮合成酶基因启动子相似序列PCHS2,并对其进行表达模式分析。【方法】从"索邦"百合中PCR扩增PCHS2启动子序列,与GUS报告基因融合,构建植物表... 【目的】从"索邦"百合(Lilium orential"Sorbonne")中克隆查尔酮合成酶基因启动子相似序列PCHS2,并对其进行表达模式分析。【方法】从"索邦"百合中PCR扩增PCHS2启动子序列,与GUS报告基因融合,构建植物表达载体,通过农杆菌介导法转化模式植物拟南芥(Arabidopsis thaliana var.Columbia)和矮牵牛(Petuniahybrida "Dreams Midnight"),抗性筛选和PCR检测鉴定转基因植株,GUS组织化学检测分析启动子在转基因植株中的表达模式。【结果】转基因拟南芥和矮牵牛的抗性筛选和PCR检测结果显示,成功地获得了转基因阳性植株。GUS活性分析表明,在PCHS2的驱动下,仅能在花药和雌蕊中检测到GUS活性,茎、叶和其他花组织中都没有发现GUS活性的表达。【结论】PCHS2启动子具有花药专一性。 展开更多
关键词 “索邦”百合 查尔酮合成酶基因 花药和雌蕊异性启动子 矮牵牛 拟南芥
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白菜型油菜PABP5基因启动子的克隆及表达特性分析 被引量:2
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作者 石磊 董彩华 +4 位作者 白泽涛 郭学兰 柴国华 黄军艳 刘胜毅 《分子植物育种》 CAS CSCD 2009年第2期341-346,共6页
本研究中利用基因组步移法从白菜型油菜中克隆到Poly(A)结合蛋白基因PABP5起始密码子上游长588bp的一段序列,经软件分析预测表明,该序列具有典型的启动子结构,并且具有多个与花药特异性表达相关的顺式作用元件,如TATA box,CAAT box,AGAA... 本研究中利用基因组步移法从白菜型油菜中克隆到Poly(A)结合蛋白基因PABP5起始密码子上游长588bp的一段序列,经软件分析预测表明,该序列具有典型的启动子结构,并且具有多个与花药特异性表达相关的顺式作用元件,如TATA box,CAAT box,AGAAA motif,AGGTCA motif,AAACCCTAA motif,GTGA motif等。为了研究该片段的表达特性,本文将克隆到的序列置换pPBI121中的CaMV35S启动子,驱动其下游的GUS基因,构建了植物表达载体,转化拟南芥,获得了转基因植株。组织化学染色表明,在PABP5启动子Ppabp5的驱动下,报告基因GUS在拟南芥的根尖、第一片真叶叶原基以及花药中特异表达。本研究为PABP5基因的进一步功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 白菜型油菜 PABP5 启动子 拟南芥 花药特异性表达
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Molecular Cloning and Characterization of the Tapetum- specific Gene RA39 from Rice
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作者 丁兆军 吴孝槐 王台 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2003年第2期219-222,共4页
A novel tapetum-specific cDNA clone of rice, its corresponding gene designed as RA39, is isolated by RNA subtractive hybridization, differential screening and rapid amplification of cDNA ends. The RA39 cDNA is 1013 bp... A novel tapetum-specific cDNA clone of rice, its corresponding gene designed as RA39, is isolated by RNA subtractive hybridization, differential screening and rapid amplification of cDNA ends. The RA39 cDNA is 1013 bp in length with an open reading frame encoding 298 amino acid residues. mRNA in situ hybridization reveals that RA39 is a tapetum-specific gene, and highly expressed at the meiosis stage of pollen mother cells. The deduced protein contains a signal peptide, a transmembrane region and a cytoplasmic tail, and is predicted to localize in endoplasmic reticulum by PSORT program. This cDNA sequence did not show significant homology to any known sequences in Genbank database. RA39 is the first gene identified to be expressed specifically in tapetal cells at the meiosis stage of pollen mother cells from cereals. 展开更多
关键词 RICE ANTHER tapetum-specific gene
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