紫背天葵叶片中花青素种类及合成调控基因转录组分析

为获取紫背天葵(Cynurabicolor DC.)叶片中花青素种类及其合成调控基因等信息,该试验以紫背天葵叶背面紫色以及经处理叶背面几乎全绿(对照)的叶片为材料,进行转录组测序分析,同时进行6个相关差异表达基因的qRT-PCR分析和6种花青素苷元的HPLC检测,以揭示紫背天葵特有的花青素苷元及其合成调控关键基因信息。结果表明:(1)在紫背天葵中共获得14个花青素苷元及32个花青素合成调控基因信息,其中表达量差异显著下调的4个基因为Pg(c11692)、Cy(c42112)、ANS(c38551)和3GT(c9064),表达量差异显著上调的2个基因是DFR(c35961)和3GT(c20283)。(2)qRT-PCR检测结果显示,上述6个基因在2种紫背天葵叶中的表达趋势(上调或下调)与转录组测序结果完全一致,但转录组测序检测到的表达趋势差异倍数比qRT-PCR检测结果更加明显。(3)HPLC分析显示,紫背天葵叶中均未检测到Dp、Pt、Pn及Mv等4类花青素苷元,但紫背天葵叶中富含Cy花青素苷元,且背面紫色的叶中Cy类花青素苷元含量(62.21mg/kg)显著高于绿色叶对照(6.86mg/kg);背面紫色和全绿叶中的Pg花青素苷元含量均低于0.43mg/kg。研究推测,Cy和Pg花青素苷元在绿叶紫背天葵(对照)中含量显著降低可能是因为存在1个ANS和1个3GT正调控以及1个DFR和1个3GT负调控所致。

蓝莓花青素糖苷和苷元制备技术及其抗氧化活性研究

已有研究表明蓝莓花青素具有较强抗氧化作用,但花青素以何种结构形式存在会具备更强的抗氧化活性国内外尚无系统报道。本文运用组合的浸提、萃取、柱色谱等技术手段研究了蓝莓花青素糖苷及苷元的制备技术,采用紫外光谱、高效液相色谱进行了纯度分析及结构鉴定,并通过考察花青素样品对DPPH和ABTS自由基的清除能力来比较两种样品中抗氧化能力强弱。结果如下：蓝莓花青素糖苷经酸化乙醇浸提、乙酸乙脂萃取、Amberlite XAD-7HP大孔树脂层析分离后,制得了纯度达59.46%的花青素糖苷,并从中鉴定出14种糖苷单体;在此基础上,将糖苷纯化物进行酸水解、层析分离后,制得了纯度为50.58%的蓝莓花青素苷元,从中鉴定出5种苷元单体;得出蓝莓花青素苷元的抗氧化能力显著高于糖苷形式（p〈0.05）,且为Trolox对照品抗氧化能力的1.31-1.72倍。本研究结果表明,将蓝莓花青素糖苷转化为苷元形式能增强花青素的抗氧化活性。