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桑树花青素合酶基因的克隆与信息学分析 被引量:2
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作者 张琼予 李军 +4 位作者 赵爱春 王茜龄 金筱耘 李镇刚 余茂德 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1253-1263,共11页
花青素合酶ANS是花青素合成过程中的一个关键限速酶。本文利用同源克隆、RT-PCR从桑椹中克隆出花青素合酶(MaANS)基因,并进行生物信息学分析和组织特异性表达分析。通过染色体步移法获得的MaANS基因的5′端和3′端,获得基因全长1535bp,... 花青素合酶ANS是花青素合成过程中的一个关键限速酶。本文利用同源克隆、RT-PCR从桑椹中克隆出花青素合酶(MaANS)基因,并进行生物信息学分析和组织特异性表达分析。通过染色体步移法获得的MaANS基因的5′端和3′端,获得基因全长1535bp,由2个外显子和1个内含子组成,包含完整CDS区域为1077bp,编码358个氨基酸,与来源于草莓、甘薯、苹果、沙梨的ANS基因同源性均达到80%以上。MaANS编码的蛋白质属于2-酮戊二酸双加氧酶家族。MaANS在进化树中的位置与草莓最近,与苹果、沙梨次之。组织表达分析表明,MaANS基因在幼叶和成熟果实中高水平表达,表明该基因的表达具有组织特异性,为研究桑树果色的形成原因和表达调控奠定了基础。 展开更多
关键词 桑树 花青素(ANS) 克隆 信息分析 组织表达
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桑树二氢黄酮醇-4-还原酶和花青素合酶基因在桑椹中的表达谱及其与花青素含量的关系 被引量:5
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作者 王如凤 苗珂 +6 位作者 曹方园 方荣俊 潘刚 赵卫国 张林 程嘉翎 刘利 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期790-798,共9页
二氢黄酮醇-4-还原酶(DFR)和花青素合酶(ANS)是植物花青素生物合成途径的2个重要酶类。从鲁桑品种育711号植株中克隆得到MmDFR和MmANS基因,生物信息学分析表明,MmDFR基因的ORF长度为1011 bp,编码336个氨基酸,预测蛋白质分子质量为3951 ... 二氢黄酮醇-4-还原酶(DFR)和花青素合酶(ANS)是植物花青素生物合成途径的2个重要酶类。从鲁桑品种育711号植株中克隆得到MmDFR和MmANS基因,生物信息学分析表明,MmDFR基因的ORF长度为1011 bp,编码336个氨基酸,预测蛋白质分子质量为3951 kD,等电点为534;MmANS基因ORF的长度为1077 bp,编码358个氨基酸,预测蛋白质分子质量为42.23 kD,等电点为5.25;MmDFR和MmANS蛋白的氨基酸序列有很高的保守性。qRT-PCR检测结果表明,MmDFR和MmANS在不同桑种质成熟桑椹中的表达丰度存在显著差异,在同一品种中随着果实成熟,基因的表达水平逐渐提高。结合对桑椹花青素含量的检测,表明桑椹花青素含量与MmDFR和MmANS基因的表达量呈正相关,推测MmDFR和MmANS在桑椹花青素合成途径中具正向调控作用。 展开更多
关键词 桑树 二氢黄酮醇-4-还原 花青素 基因克隆 表达特征 花青素
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高温胁迫对茄子花青素含量及其合成相关酶活性和基因表达的影响 被引量:10
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作者 张圣美 刘晓慧 +3 位作者 尚静 张爱冬 朱宗文 朱月林 《上海农业学报》 2020年第6期6-12,共7页
以紫色茄子(Solanum melongena L.)为试验材料,利用人工气候室进行高温处理。以27℃为对照,测定38℃和45℃条件下处理1 h、3 h、6 h、12 h、24 h、48 h、60 h果皮花青素、类黄酮含量,以及花青素生物合成过程中苯丙氨酸解氨酶(PAL)、查... 以紫色茄子(Solanum melongena L.)为试验材料,利用人工气候室进行高温处理。以27℃为对照,测定38℃和45℃条件下处理1 h、3 h、6 h、12 h、24 h、48 h、60 h果皮花青素、类黄酮含量,以及花青素生物合成过程中苯丙氨酸解氨酶(PAL)、查尔酮合成酶(CHS)、查尔酮异构酶(CHI)、二氢黄酮醇还原酶(DFR)、花青素合成酶(ANS)、类黄酮3-葡糖基转移酶(UFGT)的活性,并测定3 h和6 h时关键酶基因的表达。结果表明:与对照相比,随着时间的延长,高温胁迫诱导花青素和类黄酮浓度显著降低,其中45℃较38℃下降幅度大;PAL的活性呈现先升高后降低的变化趋势;CHS、CHI、DFR、ANS、UFGT的活性呈现持续下降的趋势,且高温胁迫下,其活性显著低于对照;处理3 h时,SmPAL、Sm4CL的表达量随着温度的升高逐渐增加,38℃和45℃条件下处理6 h,其表达量均低于对照。SmCHI的表达量在38℃时显著升高,而在45℃时降低至与对照相当的水平。SmF3H、SmANS、SmUFGT表达量的变化趋势基本一致,处理时间相同时,温度越高,表达量越低。上述结果表明,高温胁迫降低了茄子果皮花青素合成关键酶的活性及相关基因的表达量,花青素和类黄酮含量降低。 展开更多
关键词 茄子果皮 高温胁迫 花青素 花青素合成关键活性 基因表达
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酶在水果加工中的应用 被引量:3
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作者 李和平 《郑州牧业工程高等专科学校学报》 1995年第1期50-52,共3页
水果加工的产品有糖水罐头、果汁、果酱、果冻、果酒等.由于原料中含有果胶、苷类、色素、蛋白质等物质,其中的一部分物质对加工过程不利,而且使产品产生汁液混浊、苦味、不正常颜色,影响产品的质量,因此,要设法消除这些不利因素,应用... 水果加工的产品有糖水罐头、果汁、果酱、果冻、果酒等.由于原料中含有果胶、苷类、色素、蛋白质等物质,其中的一部分物质对加工过程不利,而且使产品产生汁液混浊、苦味、不正常颜色,影响产品的质量,因此,要设法消除这些不利因素,应用酶可以达到较好的效果.水果加工中应用的酶主要包括果胶酶、橙皮苷酶、柚苷酶、花青素酶等.1 果胶酶柑桔、苹果、山楂、桃、梨、杏等果实中含有较多的果胶物质,它以原果胶、果胶、果胶酸等三种形式存在,在水果的不同成熟期其成分含量不同,成熟度适中,果胶含量较高.在有糖存在的条件下,果胶溶于水并形成粘胶体. 展开更多
关键词 水果加工 果胶 花青素酶 果汁 出汁率 解聚 葡萄糖 黄酮类化合物 糖水桔子罐头 半纤维素
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金荞麦花青素合酶基因的克隆及其表达与花青素量的相关性研究 被引量:16
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作者 卜星星 雒晓鹏 +3 位作者 白悦辰 李成磊 陈惠 吴琦 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期985-989,共5页
目的获取金荞麦花青素合成途径关键酶花青素合成酶(anthocyanins synthase,ANS)基因的全长序列,并进行序列分析;对花期金荞麦ANS基因在各组织中表达水平与花青素量的相关性进行分析。方法利用同源克隆技术获得ANS基因cDNA序列;采用半定... 目的获取金荞麦花青素合成途径关键酶花青素合成酶(anthocyanins synthase,ANS)基因的全长序列,并进行序列分析;对花期金荞麦ANS基因在各组织中表达水平与花青素量的相关性进行分析。方法利用同源克隆技术获得ANS基因cDNA序列;采用半定量RT-PCR对ANS表达量进行分析;采用分光光度法测量花青素量。结果金荞麦ANS基因cDNA包含一个1 077 bp的ORF,编码358个氨基酸,命名为FdANS。生物信息学分析表明,该基因编码蛋白与其他植物ANS蛋白氨基酸序列同源率较高。FdANS在花期金荞麦不同组织中的表达量分析表明,其表达量花>叶>茎>根,花青素量为花>叶>茎>根。结论在金荞麦中首次获得ANS基因的cDNA序列,编码蛋白具有ANS同源蛋白的典型特征。FdANS基因在金荞麦根、茎、叶和花中的表达量与花青素量具有相关性。 展开更多
关键词 金荞麦 花青素 基因克隆 CDNA序列 花青素
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百脉根花青素合酶基因(LcANS)的克隆及表达分析 被引量:5
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作者 马兰 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期2926-2933,共8页
花青素合成酶是牧草百脉根中原花青素合成途径的关键酶。在分析百脉根转录组基础上,采用RT-PCR从百脉根中首次克隆到花青素合成酶基因的全长编码c DNA序列,命名为Lc ANS。Lc ANS全长c DNA为1 098 bp,包含一个1 068 bp的开放读码框,编码... 花青素合成酶是牧草百脉根中原花青素合成途径的关键酶。在分析百脉根转录组基础上,采用RT-PCR从百脉根中首次克隆到花青素合成酶基因的全长编码c DNA序列,命名为Lc ANS。Lc ANS全长c DNA为1 098 bp,包含一个1 068 bp的开放读码框,编码355个氨基酸。生物信息学分析显示Lc ANS编码蛋白具有植物ANS典型的2OG-FeⅡ_Oxy氧化酶结构域,与豆科的红豆草、苜蓿、大豆等植物中同源ANS具有较高的序列一致性。Lc ANS蛋白定位于细胞质中,没有信号肽和跨膜结构域。实时荧光定量PCR结果表明,Lc ANS基因在百脉根不同组织器官中差异表达,在果荚和花中表达量最高,同时又可以响应ABA和低温的诱导。 展开更多
关键词 百脉根 花青素 基因克隆 生物信息学分析 表达模式
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荷兰鸢尾突变株‘紫韵’的花色突变相关机理分析 被引量:1
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作者 林兵 陈艺荃 +3 位作者 方能炎 钟淮钦 叶秀仙 樊荣辉 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期1509-1515,共7页
为了探索荷兰鸢尾蓝紫色花及突变紫色花的显色分子机制及色素沉积差异,该研究以蓝紫色野生型‘展翅’和紫色突变株‘紫韵’为材料,通过花色素苷测定、转录组测序和qRT-PCR方法对花色变异进行分析。结果表明:(1)紫色突变株‘紫韵’花旗... 为了探索荷兰鸢尾蓝紫色花及突变紫色花的显色分子机制及色素沉积差异,该研究以蓝紫色野生型‘展翅’和紫色突变株‘紫韵’为材料,通过花色素苷测定、转录组测序和qRT-PCR方法对花色变异进行分析。结果表明:(1)紫色突变株‘紫韵’花旗瓣中的总花色素苷含量(392.7μg·g^(-1))显著低于野生型‘展翅’(543.5μg·g^(-1));与‘展翅’相比,‘紫韵’有3种花色素苷含量显著下降[矢车菊素-3-芸香糖苷含量由144.42μg·g^(-1)降为46.39μg·g^(-1),矮牵牛素-3-(6-鼠李糖基-2-木糖基葡萄糖苷)含量由61.86μg·g^(-1)降为31.67μg·g^(-1),矢车菊素-3-(2G-木糖基芸香糖苷)含量由25.22μg·g^(-1)降为7.65μg·g^(-1)],但6-羟基矢车菊素-3-葡萄糖苷含量由5.88μg·g^(-1)升为10.34μg·g^(-1)。(2)RNA-seq分析共获得46530个unigenes,与‘展翅’相比,‘紫韵’有43个基因上调表达,73个基因下调表达;层次聚类分析发现,花色素苷途径中共有2个差异表达基因——查尔酮合成酶(CHS)基因(IhCHS1)和花青素3-O葡萄糖转移酶(UFGT)基因(IhUFGT1),且二者均下调表达。(3)qRT-PCR分析表明,随着花的发育,IhUFGT1在2个品种中表达量均上升,始花期达到最高,且在‘紫韵’花中的表达明显低于‘展翅’。研究认为,4种花色素苷含量的显著变化,可能是导致花色由野生型‘展翅’蓝紫色向突变株‘紫韵’紫色方向转变的主要原因;IhUFGT1基因在紫色‘紫韵’花中表达量比‘展翅’相对大幅度的降低,致使花色素苷含量相应变化,最终导致花色由蓝紫色转为紫色。 展开更多
关键词 荷兰鸢尾 花色素苷 转录组分析 花青素3-O葡萄糖转移基因
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毛白杨花青素合酶基因的克隆与特性分析 被引量:2
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作者 姚建忠 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2018年第3期349-356,共8页
花青素合酶(anthocyanidin synthase,ANS)是植物中花青素合成代谢途径的关键酶之一,它可以催化无色花青素转化为有色花青素这一关键步骤。为了研究毛白杨花青素合酶基因功能并最终利用其进行叶色基因工程改良,在分析已有毛白杨转录组数... 花青素合酶(anthocyanidin synthase,ANS)是植物中花青素合成代谢途径的关键酶之一,它可以催化无色花青素转化为有色花青素这一关键步骤。为了研究毛白杨花青素合酶基因功能并最终利用其进行叶色基因工程改良,在分析已有毛白杨转录组数据的基础上,设计了两对PCR引物,以毛白杨叶片基因组DNA为模板,采用PCR技术分离克隆了毛白杨ANS基因两个成员,命名为Pt ANS1、Pt ANS2。测序结果表明,基因序列全长分别为1 694 bp、1 820 bp,CDS长度均为1 083 bp,编码360个氨基酸,两者氨基酸序列一致性为88.3%,相似性达到91.9%。结构分析表明,Pt ANS1和Pt ANS2均包含2个外显子和1个内含子,基因结构高度相似,二者氨基酸序列中均包含有1个2OGFe II_Oxy保守域,但分别定位于1号和3号染色体上。氨基酸序列同源性分析和进化分析表明,Pt ANS1和Pt ANS2与可可、荔枝、葡萄和拟南芥的距离较近,具有较高的同源性。进一步的转录组数据分析显示,Pt ANS1和Pt ANS2在不同组织器官中的表达趋势十分相似,但两者的表达量存在明显差异,在各组织器官中Pt ANS2与Pt ANS1相对表达量比值为5~506,推测Pt ANS2基因可能在杨树色素合成及其他生理生化功能方面发挥着更重要的作用。这一重要发现将为进一步深入探究杨树花青素合酶基因的功能奠定良好的基础。 展开更多
关键词 毛白杨 花青素 基因克隆 表达模式
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Optimization of Enzyme-assisted Extraction Technology for Tartary Buckwheat Shell Procyanidins with Response Surface Methodology 被引量:1
9
作者 Lihuan YUAN Jiangyan DUAN 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2017年第7期1196-1201,共6页
This study was conducted to investigate the effects of cellulase dosage, enzymolysis time, pH and enzymolysis temperature on procyanidin extraction rate by single factor experiment, with tartary buckwheat shell as an ... This study was conducted to investigate the effects of cellulase dosage, enzymolysis time, pH and enzymolysis temperature on procyanidin extraction rate by single factor experiment, with tartary buckwheat shell as an experimental material.Main process parameters were optimized to obtain a regression model by response surface methodology. The results of variance analysis indicated that the regression model reflected the relationship between buckwheat shell procyanidin extraction rate with enzyme dosage, enzymolysis time, pH and enzymolysis temperature; and the optimal process parameters were enzyme dosage of 6.5 mg/g, enzymolysis time of 1.5 h, pH at 4.7 and enzymolysis temperature at 46 ℃. Three parallel experiments were conducted under these process parameters. In practice, the highest procyanidin extraction rate was 6.78 g/100 g. The relative error between the predicted value of regression model and the actual value was 1.3%. The regression equation fitted the real situation better. 展开更多
关键词 Tartary buckwheat Procyanidin extraction rate Extraction technology Response surface methodology
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Coronatine Induces an Accumulation of Anthocyanin and Starch in Purple-fleshed Sweetpotato(Ipomoea batatas Lam.)
10
作者 Baoqing WANG Beitao XIE +2 位作者 Haiyan ZHANG Liming ZHANG Qingmei WANG 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2013年第10期1495-1499,共5页
[Objective] The objective of this research was to examine the effects of COR on anthocyanin and starch content in storage roots of two PFS genotypes, and to explore the relationships between anthocyanin synthesis and ... [Objective] The objective of this research was to examine the effects of COR on anthocyanin and starch content in storage roots of two PFS genotypes, and to explore the relationships between anthocyanin synthesis and starch accumula- tion. [Method] A field experiment was carried out to determine the changes in yielc components, yield, contents of anthocyanin and starch, activities of phenylalanine ammonia-lyase (PAL) and adenosine 5-diphosphate glucose pyrophosphorylase (AG- Pase) in two genotypes of PFS (Ipomoea batatas L., var. 'Ayamurasaki' and 'Jishu18'). [Result] The application of COR significantly increased starch and antho- cyanin content in storage roots of Jishu18 across developmental stages by inducing the activities of PAL and AGPase, and finally enhanced yield by promoting fresh weight of storage roots. Ayamurasaki was insensitive to treatment with COR al- though its PAL activity temporally increased. The starch and anthocyanin content of Aya, and the anthocyanin content of Jishu18 increased progressively across devel- opmental stages with or without COR application, but the starch content of Jishu18 increased initially, then decreased before increasing again without application of COR. Treatment with COR reduced downward trend of starch accumulation in Jishu18. Thus, the effect of COR on accumulation of anthocyanin and starch in storage roots of PFS differs according to genotypes. [Conclusion] The application of 0.05 μmol/L COR may increase starch and anthocyanin content in PFS genotypes with lower starch and anthocyanin content in storage roots. 展开更多
关键词 CORONATINE Purple-fleshed sweet potato ANTHOCYANIN STARCH
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Characterization of proanthocyanin-related leucoanthocyanidin reductase and anthocyanidin reductase genes in Lycium ruthenicum Murr. 被引量:3
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作者 沈笑飞 曾少华 +2 位作者 吴敏 刘春朝 王瑛 《Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences》 CAS CSCD 2014年第6期369-377,共9页
Proanthocyanidins (PAs) are a set of important phytochemical compounds in Lycium ruthenicum Murr. However, PAbiosynthesis in L. ruthenicum remains unclear. In this study, leucoanthocyanidin reductase (LAR) and ant... Proanthocyanidins (PAs) are a set of important phytochemical compounds in Lycium ruthenicum Murr. However, PAbiosynthesis in L. ruthenicum remains unclear. In this study, leucoanthocyanidin reductase (LAR) and anthocyanidin reductases(ANR) involved in PA biosynthesis were retrieved from L. ruthenicum EST database. Polymerase chain reaction (PCR) resultsconfirmed that LrLAR and LrANR encoded a protein composed of 333 and 338 amino acids, respectively. Phylogenetic analysisshowed that LrLAR and LrANR were clustered with known LAR and ANR proteins of other plants, respectively. Quantitativereverse-transcription PCR (qRT-PCR) results indicated that both genes expressed in a sharp increase manner from unripe stage tocolor break stage and were down-regulated increasingly hereafter, and that both expression levels are extremely low in youngleaves, mature leaves, stems, and roots compared with fruits. Phytochemical assay revealed that the content of total PA in fruitwas higher than that in young leaves, mature leaves, stems, and roots, and that the total PA level was increased sharply andthen relatively stable hereafter during fruit ripening. Our results lay a foundation for uncovering the PA biosynthesis and furtherengineering manipulation in L. ruthenicum. 展开更多
关键词 ANR LAR Lycium ruthenicurn Proanthocyanidin
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