密码子优化α-L-鼠李糖苷酶基因在酿酒酵母细胞的表面展示表达及产物的酶学性质

桑树富含黄酮苷类化合物,利用糖苷酶生物转化可有效提高其生物利用度,对挖掘桑树资源的药食用价值具有重要意义。天然来源的糖苷酶催化选择性强,但异源表达量低。以源自黑曲霉(Aspergillus niger)的α-L-鼠李糖苷酶基因rha为目的基因,改善该基因的密码子偏爱性和适应性,将密码子优化后的corha基因展示表达到酿酒酵母细胞表面,以达到高效催化的实用目的。与转入原始rha基因的重组酿酒酵母菌株相比,转入密码子优化corha基因的重组酿酒酵母菌株表面展示coRHA蛋白的表达量提高了2.9倍,培养60 h后coRHA的酶活力提高了2.7倍。以对硝基苯-α-L-鼠李糖苷(p NPR)为底物检测含corha基因重组菌株生产coRHA的酶活力,其最适p H及温度分别为5.0和45℃;以芦丁为底物,在p H 5.0、60℃条件下,coRHA水解芦丁合成异槲皮苷的得率为79.81%±3.1%。采用系统密码子优化策略,为利用工程菌工业化生产coRHA,用于催化桑树黄酮苷类化合物定向水解提供了可行的方法。

从Bruguiera gymnorrhiza叶中分离得5-甲基醚黄酮糖苷类化合物

作者从Bruguiera gymnorrhiza树叶中分离鉴定出2种新的5-甲基醚黄酮糖苷类化合物，即7,4’，5＇-三羟基-5，3’-二甲氧基黄酮7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（5）和7,4’-二羟基-5-甲氧基黄酮7-O-β-D吡喃葡萄糖苷（6），以及7,3’，4’，5＇-四羟基-5-甲氧基黄酮（1）、7,4’，5＇-三羟基-5，3’-二甲氧基黄酮（2）、木犀草素5-甲基醚7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（3）、7,4＇-二羟基-5，3’-二甲氧基黄酮7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（4）、栎精3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（7）、芦丁（8）、山奈酚3-O-芦丁糖苷（9）、杨梅黄素3-O-芦丁糖苷（10）和1种芳香基-四氢化萘木酚素鼠李糖苷（11）。

云南白族民间药小叶石梓的抗肿瘤活性研究

目的:研究云南白族民间药小叶石梓的化学成分及抗肿瘤活性,以期为民族药小叶石梓的综合开发利用提供理论和实践依据。方法:将小叶石梓根的乙醇提取液利用不同极性的溶剂进行萃取,通过MTT实验检测这些极性部位对人乳腺癌细胞(MCF7)、人小细胞肺癌细胞(NCI-H446)以及人宫颈癌细胞(Hela229)增殖的影响。结果:乙酸乙酯部位对于3株细胞均具有明显的细胞毒性,IC_(50)分别为(39.79±0.87)、(43.29±0.62)、(41.82±0.37)μg/mL。通过Q-TOF-MS/MS鉴定出乙酸乙酯部位主要成分为芳基酰化的鼠李糖苷类化合物。结论:芳基酰化的鼠李糖苷类化合物为小叶石梓抗肿瘤的有效成分,小叶石梓具有较好的研究前景和应用价值。