多环芳烃降解菌ZL5分离鉴定及其降解质粒

通过选择性富集培养 ,从辽河油田石油污染土壤中分离到一株多环芳烃 (PAHs)降解菌ZL5 .它能以菲和芘为唯一碳源生长 ,但是不能利用萘 .16SrDNA核苷酸序列分析结果表明 ,ZL5属于变形细菌α亚类中的鞘氨醇单胞菌属 .该菌株含有一个大小约为 6 0kb的质粒 .丝裂霉素C消除实验表明 ,随着质粒的丢失 ,菌株利用菲和芘的能力也丧失 .用电转化和氯化铷转化法分别将菌株ZL5的质粒导入大肠杆菌JM10 9和DH5α中 ,随着质粒的获得 ,这些转化子获得了降解菲和芘的能力 .本研究结果表明 ,鞘氨醇单胞菌ZL5降解PAHs的功能和质粒有关 .图 4参

一株多环芳烃降解菌在焦化废水降解中的应用研究

为了提高焦化废水的生物降解率 ,以萘为惟一碳源分离出 1株细菌CN3d .降解萘、吡啶、菲、芘时 ,其降解率分别达到 93 0 %、90 0 %、99 0 %和 72 5 % .纯培养的CN3d对焦化废水的降解率为 33 6 % ,将其投加于活性污泥 ,降解率达到 5 1 8% .鉴定CN3d为黄杆菌属 (Flavobacterium ) .将葡萄糖和FeCl3加入改良污泥 ,焦化废水的最大降解率达到 5 5 0 % ,这时若将焦化废水稀释至原浓度的 1/2 ,降解率可达 70 2 % .试验结果证明 ,CN3d对焦化废水有降解潜力 ,改善降解条件有利于提高投菌法的降解率 .

多环芳烃降解菌的筛选及其在焦化场地污染土壤修复中的应用

经过富集、分离和纯化,从沈阳某焦化厂多环芳烃（PAHs）污染土壤中获得7株菌株B1~B7。通过初步降解实验和血平板实验,发现B4、B5、B7在15d时对PAHs总降解率均高于40%,为高效PAHs降解菌,B2为高效表面活性剂产生菌。将B4、B5、B7分别与B2等质量混合后对PAHs进行降解,发现添加B2可提高PAHs总降解率,B4＋B2对PAHs的总降解率最大,在9d时平均值达到45.9%。经形态观察和16SrRNA基因序列比对,鉴定B2和B4分别归为假单胞菌属（Pseudomonas sp.）和芽孢杆菌属（Bacillus sp.）。接种B4＋B2进行微生物修复实验,结果表明,接种B4＋B2对PAHs污染土壤的微生物修复有明显的强化作用,在60d时PAHs总降解率达到48.1%;接种B4＋B2对中环（4、5环）PAHs降解率的提高尤为明显,7种中环PAHs的平均降解率比不接种菌株的对照组提高29.6百分点。

盐碱土壤多环芳烃降解菌群筛选及其降解特性

为了强化多环芳烃(PAHs)污染盐碱土壤原位微生物修复的应用,并提供高效的菌种资源,从天津大港油田盐碱化的油污土壤中富集分离出1组高效降解菲、芘的耐盐碱菌群,分离获得可培养优势细菌5株、真菌3株,考察了该菌群对菲、芘的降解效果,并进行了其对菲、芘降解特性分析。结果表明,该菌群在菲、芘质量浓度分别为25、50和75mg/L的液体无机盐培养基中培养15d,菲、芘的降解率分别达到75.3%和53.6%、56.6%和52.0%、25.2%和13.6%;该菌群对菲、芘降解具有较广泛的盐质量分数和pH值范围,在菲、芘初始质量浓度各为50mg/L,最适盐质量分数0～2%,最适pH值8.6条件下,添加质量分数0.4%葡萄糖培养15d后,菲、芘的降解率显著提高,达到92.1%和65.8%。细菌16SrDNA和真菌18SrDNA测序结果表明,该菌群由叶杆菌属(Phyllobacterium)、假单胞菌属(Pseudomonas)、盐单胞属(Halomonas)、泛菌属(Pantoea)和青霉属(Penicillium)、双曲孢属(Sigmoidea)、胶孢炭疽属(Colletotrichum)组成。

一株多环芳烃降解菌的鉴定及GST基因克隆和序列分析

由石油污染土壤中分离到一株能以多环芳烃 (菲、芴、萘 )为唯一碳源的细菌 ,经形态观察、生理生化 (Biolog GN)和G +Cmol%分析 ,鉴定该菌为少动鞘氨醇单胞菌 (Sphingomonaspaucimobilis)。与 1 6SrDNA序列同源性的比较进一步确证了鉴定结果。经菲诱导后的细菌谷胱甘肽S 转移酶 (GlutathioneS transferase ,GST)酶活明显高于未诱导前 ,表明谷胱甘肽S 转移酶可能与多环芳烃的降解有关。根据该酶基因的同源性序列设计引物 ,PCR扩增出编码谷胱甘肽S 转移酶基因片段 ,进一步证实在该菌中有GST的存在。测序后基于编码GST的基因所进行的系统发育分析表明 ,该多环芳烃降解菌与其它多环芳烃降解菌在进化上亲缘关系较近。

土壤多环芳烃降解菌培养条件优化

对筛选获得的两株多环芳烃降解菌Y1和W1的培养条件进行优化,为其应用于土壤多环芳烃污染的微生物修复积累数据。采用紫外可见分光光度法测定不同温度条件下的吸光度(Absorbance)值,得出Y1和W1的最适生长温度为28℃、最适pH为7.0、最适盐浓度为2%,其中W1可在10%盐浓度下继续生长,表明W1对盐浓度的耐受性较高。分析不同浓度梯度的菲、蒽、苯并菲的溶液降解率,得出Y1对菲的最适降解浓度为25 mg/L,W1对菲的最适降解浓度为50 mg/L,Y1和W1对蒽、苯并菲的最适降解浓度为50 mg/L。

黄河水体多环芳烃降解菌的筛选及其降解性能研究

通过选择性培养,从黄河水体中分离纯化出3株能够以(Chr)和苯并[a]芘(B[a]P)为唯一碳源和能源进行生长的细菌HKS-1,HKS-2和HKS-3,采用16S rDNA序列分析,初步断定HKS-1为杆菌属或无芽孢杆菌属的一个种,HKS-2和HKS-3为芽孢杆菌菌株.微生物降解实验表明,Chr和B[a]P在前25d的降解符合零级动力学规律,3株细菌的混合菌群对Chr和B[a]P有良好的降解效果,泥沙的加入能够促进微生物数量的增长,从而促进Chr和B[a]P的降解.当Chr和B[a]P的初始质量浓度0ρ分别为15.85和12.10μg.L-1时,培养35 d后不含泥沙体系中Chr和B[a]P的降解率分别为45.79%和37.36%;含泥沙体系中Chr和B[a]P的降解率分别为58.76%和51.69%.进一步采用膜实验对比研究了多环芳烃在水相和颗粒相的降解速率.结果表明,当用零级动力学对Chr和B[a]P的质量浓度(ρ)变化(最初4 d)进行拟合时,Chr和B[a]P在颗粒相的降解速率分别约为其在水相降解速率的3和4倍.

两株多环芳烃降解菌对菲、蒽、苯并菲的降解效果

为给微生物修复多环芳烃污染的土壤提供基础数据和参考,从汽车尾气污染土壤中筛选出两株多环芳烃降解菌(Y1和W1),分析了二者对不同浓度的菲、蒽和苯并菲溶液的降解率。结果表明:Y1和W1对菲的最适降解浓度分别为25mg/L和50mg/L,对蒽、苯并菲的最适降解浓度为50mg/L;在菲、蒽、苯并菲溶液最适浓度下,Y1在10d后对菲、蒽和苯并菲的降解率分别达到30.0%、57.8%和65.0%,25d后分别达65.4%、82.0%和90.0%;W1在10d后对菲、蒽和苯并菲的降解率分别达40.0%、70.0%和53.0%,25d后分别达68.4%、92.0%和76.0%。培养60d后,Y1和W1对菲、蒽和苯并菲的降解率均达到100.0%。

两株多环芳烃降解菌的筛选与生化鉴定

实验选用的多环芳烃为浓度大于95%的菲、蒽和苯并菲,其中菲和蒽为三环芳烃,苯并菲为四环芳烃,它们都是环境非友好物质,筛选过程中主要采用Abs法测定液体培养基中微生物对这三种多环芳烃的降解作用。所选用的微生物是从汽车尾气污染较严重的公路边土壤中采集分离而来,经过两个月的平板分离培养,获得两株高效降解菌,分别命名为Y1和W1,其中Y1为黄色,菌落较大,不透明,边缘整齐,无芽孢,革兰氏染色后为阴性杆状菌;W1为白色,菌落较小,呈半透明状,边缘不规则,无芽孢,革兰氏染色后为阴性杆状菌。经生理生化试验鉴定,Y1和W1均为假单胞菌属(pseudomonas sp)。

多环芳烃降解菌的筛选、鉴定及其特性

从黄河三角洲东营胜利油田附近石油污染的土壤中分离、筛选到菲降解菌共6株,并对其中降解率相对较高的菌株PAHs-1进行了生物学特性的研究,包括菌体形态特征、培养特征及生理生化特征的初步研究.通过形态观察、生理生化指标及16SrDNA 序列分析,鉴定该菌株为短芽孢杆菌属.研究所筛选的PAHs-1能够以多环芳烃菲为唯一碳源和能源,7d内对菲(培养液浓度为50mg/L)的降解率达到62.09%.并通过试验确定了PAHs-1对菲的最佳降解pH 为7.另外,研究中一系列试验表明随着外源碳源葡萄糖的加入,PAHs-1对菲的降解率呈微小的增大趋势,而随着菲浓度的增加,PAHs-1对菲的降解率呈减小趋势.

鄱阳湖区某农田土壤中多环芳烃降解菌物种多样性调查

从鄱阳湖区南昌县某湖畔稻田、湖畔菜地、岸堤菜地和堤内稻田分别采集土样,用浓度大于95%的PAHs试剂菲、蒽和苯并菲等为唯一碳源设置培养基,从土样中筛选PAHs降解菌。经培养和分离纯化,共筛选到菌株23种,其中细菌17种,真菌6种,对所筛选到的菌株进行形态观察和分析。

石油污染地下水中芳烃降解菌的反硝化能力分析

采用芳烃降解菌,通过反硝化培养基进行富集、分离、纯化,获取能够进行反硝化作用的芳烃降解菌,在此基础上进行具有反硝化作用的芳烃降解菌生理生化特性实验及菌种反硝化作用动态规律研究,并对菌种进行基因鉴定。研究结果表明:假单胞菌属和戴尔夫特菌属在降解芳烃的同时,具有反硝化能力,并且降解规律与反硝化规律呈现正相关性。研究成果为芳烃降解菌在石油污染地下水环境中的生物地球化学作用机制提供了辅助的分析依据,为进一步的完善石油类污染地下水的生物修复研究提供理论和实验支撑。

红霉素对多环芳烃降解菌的毒性及降解性能的影响研究

在当今医疗诊治中,随着抗生素使用的不断增加,对环境微生态造成了较大的影响,抗生素在对污染物降解菌具有较大的环境风险,它通过吸附转移,对水生陆生动植物以及人体均会造成较为明显的毒理反应,已有越来越多的学者关注到多环芳烃降解菌的降解性能,不断致力于抗生素与环境的关系,平衡微生态环境,降低药理毒性对人类及自然造成的危害。

焦化厂污染土壤中多环芳烃降解菌的分离及降解特性

分别以芴（3环）、荧蒽（4环）和苯并[b]荧蒽（5环）为唯一碳源（1 mg/L）,采用平板划线法对某焦化厂污染土壤中的多环芳烃降解菌进行分离.通过自制的呼吸器,研究所得多环芳烃降解菌对14C-菲（5μL/100 mL 40~60 mCi/mmol）的矿化情况;通过序批试验,以煤焦油为碳源（1μL/mL）,研究这些菌对19种多环芳烃的降解情况.多次划分后,得到4种菌,经鉴定命名为博特氏菌L1、苍白杆菌L1、微杆菌L1和赤红球菌L1.经过3周的矿化实验,微杆菌L1可以将14C-菲全部矿化成14CO2,赤红球菌L1可将大约60%的14C-菲矿化成14CO2,而博德特氏菌L1和苍白杆菌L1对14C-菲无矿化作用.经过5周的降解实验,博德特氏菌L1对大多数多环芳烃表现了良好的降解作用,苍白杆菌L1和微杆菌L1对部分多环芳烃有降解作用,而赤红球菌L1培养系统中某些多环芳烃的浓度甚至有增大,这可能与其在代谢过程中产生表面活性物质有关.所得4种菌在焦化厂污染土壤的微生物修复中具有较大的应用潜力.

多环芳烃降解菌的筛选与降解能力测定

从本溪多环芳烃(PAHs)污染土壤中经富集培养筛选出8株PAHs降解菌,研究了8株菌及其等比例混合培养对菲、芘和苯并[a]芘的降解能力。结果表明,在28℃,培养基中菲、芘和苯并[a]芘的浓度分别为50、50和5mg·L-1的复合底物条件下,培养28d后,菌株B3的降解效果最好,对菲、芘和苯并[a]芘的降解率分别为88.4%、54.0%和68.4%,8株菌的混合培养对菲、芘和苯并[a]芘的降解率分别为87.7%、35.3%和42.0%;经生理生化实验和16SrRNA序列比对,初步鉴定B3菌为假单胞菌属(Pseudomonas sp.)。

生物炭菌剂对多环芳烃的吸附及降解作用研究

为探讨化学吸附和生物降解协同作用去除污染水体中的多环芳烃,文章以生物炭为固定化载体,通过吸附解脂耶氏酵母菌(Yarrowia lipolytica Tzyx3)形成了生物炭菌剂,并采用吸附及降解试验对水体中的萘、菲、芘去除效率进行研究。结果表明,生物炭菌剂处理去除水体中萘、菲、芘的效率显著高于生物炭吸附及游离态菌株降解,生物炭菌剂对水中萘、菲、芘的总体去除率为88.4%、79.0%和68.7%。温度和pH值对生物炭菌剂的吸附-降解影响较明显,在温度为30~35℃、pH值为7.0~8.0范围内获得较好的去除效果。

泉州湾表层沉积物对多环芳烃潜在降解活性的研究

在泉州湾设置7个站位,测定了2004年2月航次表层沉积物在添加PAHs后呼吸活性的变化,结合多环芳烃降解菌的数量及细菌总量的测定,对泉州湾海域表层沉积物对多环芳烃的降解潜力进行综合分析.结果显示,添加碳源在一定程度上提高了土壤的呼吸活性,外加PAHs对各站点的影响有别,同一样品受菲、芘、荧蒽的影响各不相同,其影响程度与本土降解菌的数量有一定相关性,表明细菌在海洋环境PAHs的生物降解中起着至关重要的作用;19d后各样品的呼吸作用强度逐渐接近自然对照样,可见该海域表层沉积物中微生物有着强大的适应不良环境的能力与降解PAHs的潜力.

发酵牛粪和造纸干粉对土壤中多环芳烃降解的影响

运用泥浆反应法研究添加发酵牛粪和造纸干粉对土壤中多环芳烃(PAHs)降解的影响。试验按水土比2∶1制成泥浆反应器,设置对照、添加2.5%发酵牛粪和添加2.5%造纸干粉等3个处理,25～28℃摇床培养,分别于10、20、30d采样测定土壤中多环芳烃降解菌的数量和多环芳烃含量。结果发现,所有处理土壤中多环芳烃的含量均随培养时间的延长而逐渐降低,而添加发酵牛粪和造纸干粉均有利于提高土壤中多环芳烃降解菌的数量,在培养30d后土壤中多环芳烃的降解率分别从对照处理的19%显著提高到37%和35%(P<0.05)。结果还发现,多环芳烃分环降解率随苯环数增加而下降,培养30d后土壤中2环多环芳烃的降解率达95%以上,3环多环芳烃的降解率为50%左右,对照处理4～6环多环芳烃的降解率为7%～13%,而添加发酵牛粪和造纸干粉处理土壤中4～6环多环芳烃的降解率显著提高到21%～28%(P<0.05),但对2～3环多环芳烃的降解无明显影响,表明这两种物质对土壤中多环芳烃降解的影响关键在于促进高环多环芳烃降解菌的生长繁殖及降解活性。

农田土壤多环芳烃污染的微生物修复试验

从江西省南昌市南昌县鄱阳湖畔某农田采集土样,用浓度大于95%的PAHs试剂菲、蒽和苯并菲等作为唯一碳源配制培养基,从土样中筛选到一株PAHs高效降解菌,经鉴定认为该菌属于荧光假单胞菌。将该菌接种于PAHs初始浓度为20 mg/kg的培养瓶内,培养60 d后,培养瓶土壤中的PAHs基本被降解;将该菌接种于PAHs污染的农田土壤,120 d后土壤中PAHs降解率大于90%。

多环芳烃污染土壤的植物-微生物联合修复初探

在温室盆栽条件下,通过种植紫花苜蓿单独或联合接种菌根真菌(Glomus caledonium L.)(AM)和多环芳烃专性降解菌(DB),研究了利用植物-微生物强化修复多环芳烃(PAHs)长期污染土壤的效果。试验结果表明,接种菌根真菌和PAHs专性降解菌能促进紫花苜蓿的生长和土壤中PAHs的降解。经过90天修复试验,种植紫花苜蓿接种AM、DB和DB+AM处理的PAHs的降解率分别为47.9%、49.6%、60.1%,均高于只种植紫花苜蓿的对照处理(CK)(21.7%)。另外,随着PAHs苯环数的增加,其平均降解率逐渐降低,但是接种PAHs专性降解菌能够提高4环和5环PAHs的降解率。同时也发现土壤中脱氢酶活性和PAHs降解菌数量越高的处理,土壤PAHs的降解率也越高,这也是种植紫花苜蓿接种微生物能够有效促进土壤PAHs降解的原因。