血清芳香基酰胺酶连续监测法测定

报道了血清芳香基酰胺酶的连续监测法。酶促反应最适pH为7．6，用0．1mol／LTris—HCl缓冲液可发挥酶的最大催化活性。线性范围0～400U／L。批内CV1．9％～2．5％，批间CV3．1％～3．8％。121例健康成人血清酶活性为23.8±6．0U/L（x±s），男女性别间无差异（P＞0．05）。临床初步应用表明肝胆疾病时明显升高，特别是肝内外胆道阻塞时升高幅度较大。

人肝癌组织中芳香基酰胺酶表达与异常改变的研究

为探讨肝癌不同部分组织中ＡＡＤ的表达和改变规律。方法将自身配对的肝癌、癌周和远癌组织中总ＲＮＡ和ＡＡＤ纯化，并分析了肝匀浆中ＡＡＤ及不同分子形式ＡＡＤ比活性，并与对应组织中ＧＧＴ进行了比较。结果肝癌组织总ＲＮＡ浓度，癌组织明显低于癌周和远癌组织（Ｐ＜０．０１）；总ＡＡＤ比活性（Ｕ／ｇ）在癌组织明显高于远癌组织（Ｐ＜０．０５）；肝癌组织中膜结合性ＡＡＤ升高，但差别不明显（Ｐ＞０．０５），而可溶性ＡＡＤ在肝癌组织中明显地高于癌周和远癌组织（Ｐ＜０．０５）。结论资料提示肝癌组织可表达大量ＡＡＤ，且以可溶性ＡＡＤ升高为主。

微柱层析法分离和检测高分子芳香基酰胺酶

芳香基酰胺酶(Arylamidase,EC,3.4,11,2,AAD)广泛存在于人体组织,以肝细胞和胆管上皮细胞含量最高。AAD在许多恶性肿瘤时表现为活性明显升高或同工酶谱型改变,它的检测对肿瘤的研究及临床诊断很有价值。血清AAD经聚丙烯酰胺凝胶电泳可分出8条区带,而高分子AAD(HM—AAD)则留在加样原位。本文根据Wenham等凝胶过滤层析研究高分子酶的原理,应用自制小桂进行模索。

大肠癌组织芳香基酰胺酶同工酶的研究

采用自行建立的圆盘等电聚焦电泳将大肠组织中芳香基酰胺酶（ＡＡＤ）分离出１０条区带，从阳极到阴极依次为ＡＡＤⅠ～ＡＡＤⅩ，其中ＡＡＤⅥ主要见于大肠癌组织（７５％）、癌旁组织（５０％），面远癌组织仅９．１％，前二者与后者有显著性差异（ｐ＜０．０５）。大肠癌中ＡＡＤⅥ与Ｄｕｋｅｓ分期和分化程度无相关性（ｐ＞０．０５），其等电点和胎盘型ＡＡＤ（Ｐ－ＡＡＤⅡ）等电点一致（ＰＩ６．３３）。结果表明，ＡＡＤⅥ是大肠癌组织异位表达的证据，可望成为大肠癌及癌前病变的标志物。

多种分子形式芳香基酰胺酶的分离及其临床应用

对肝病患者血清芳香基酰胺酶（ＡＡＤ）的不同分子形式进行了分离和定量研究，发现在正常人、急性肝炎、慢性肝炎和肝硬化患者中可分出ＡＡＤ３种组分，肝癌患者除出现这３种组分外，还可见亚组分出现。ＡＡＤ谱型正常人以ＡＡＤ－１为主；急性肝炎、慢性肝炎和肝硬化患者ＡＡＤ－１减少，ＡＡＤ－２和ＡＡＤ－３增加；肝癌患者则ＡＡＤ－１明显减少，ＡＡＤ－３显著升高。显示ＡＡＤ谱型分析有助于肝病的诊断或鉴别诊断。

胃癌及癌前期病变粘膜芳香基酰胺酶同工酶的表达意义

目的探讨胃癌及癌前期病变粘膜芳香基酰胺酶（ＡＡＤ）同工酶的表达规律，寻找癌前期病变及早期癌的标志物．方法采用本室建立的圆盘等电聚焦电泳（ＣＩＥＦ）分离１２２例各种胃病粘膜（胃癌４１例，浅表性胃炎４８例，萎缩性胃炎３０例，胃溃疡８例，其中伴肠化１９例，异型增生８例）中ＡＡＤ同工酶．以６０ｇ／Ｌ丙烯酰胺作支持递质，ｐＨ３５～５０和ｐＨ３５～１００两种载体两性电解质建立ｐＨ梯度，加匀浆液５０μｌ，阴极及阳极电极液分别用０２ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ和０５ｍｏｌ／ＬＨ３ＰＯ４，恒压电泳（１０℃）１８ｈ后以亮氨酰β萘胺作为基质呈色．结果ＡＡＤ分为８条区带，从阳极到阴极依次命名为ＡＡＤⅠ～ＡＡＤⅧ，其中ＡＡＤⅣ主要见于胃癌（９０２％），不完全大肠型肠化（８６７％）和异型增生（７５０％）；而不伴有肠化或异型增生的良性胃病和正常胃中则未发现．ＡＡＤⅣ的阳性率与胃癌病理类型、细胞分化程度及临床分期无相关，且ＡＡＤⅣ等电点和胎盘型ＡＡＤ等电点相当．结论ＡＡＤⅣ是一种癌胚蛋白，即胃癌组织特异性同工酶，是癌前期病变及早期癌的标志物．

一种新的腹水鉴别诊断指标──芳香基酰胺酶

对２９例恶性腹水和６０例良性腹水用者进行了芳香基酰胺酶总活力（Ｔ－ＡＡＤ）测定。同时测定以下指标作为对比：总胆固醇、纤维连接蛋白、癌胚抗原和α１－抗胰蛋白酶。结果示恶性腹水Ｔ－ＡＡＤ显著升高（±ｓ２１．３８±１５．０Ｕ／ｍｌ），与良性腹水比较（±ｓ５．２４±４．４Ｕ／ｍ１）差异有非常显著性（Ｐ＜０．００１）。腹水Ｔ－ＡＡＤ以１５Ｕ／ｍｌ作为最佳界值，其诊断恶性腹水的阳性率为８６．２％、特异性９６．７％、准确性９３．０％，研究表明腹水Ｔ－ＡＡＤ测定对良、恶性腹水的鉴别有较高的诊断价值。