紫花芸豆肽修复H2O2对HepG2细胞的氧化应激损伤

目的:研究紫花芸豆肽(Phaseolus vulgaris peptides,PVPs)对H2O2诱导的HepG2细胞氧化损伤的保护作用及其作用机制。方法:体外培养HepG2细胞,实验分为空白组、模型组(正常培养24 h后加2 mmol/L H2O2刺激1 h)以及PVPs低、中、高剂量组(分别用50、100、200μg/mL PVPs处理24 h后,加2 mmol/L H2O2刺激1 h),采用水溶性四唑盐法(WST-1法)检测细胞增殖率,流式细胞仪检测胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,酶联免疫吸附测定法检测胞内抗氧化物酶系活力,Western blot法检测凋亡蛋白表达量。结果:PVPs能缓解H2O2导致的HepG2细胞生长抑制,降低胞内ROS、丙二醛水平,提高超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶活力,并且下调p53、Caspase-3蛋白表达量。结论:PVPs对H2O2引起的HepG2细胞氧化损伤具有一定的保护作用,能抑制凋亡蛋白的表达,同时可以调节细胞的氧化还原系统、清除胞内ROS、提高胞内抗氧化物酶系的活力。

芸豆肽的抗氧化活性研究(英文)

采用Sephadex-G50凝胶柱层析分离具有强抗氧化活性的小分子芸豆肽,以VC为对照,研究3种肽分离组分的还原能力及对羟自由基、超氧阴离子自由基和DPPH自由基的清除能力。结果表明:随着相对分子质量的减小和肽质量浓度的增加,其还原能力及对羟自由基、超氧阴离子自由基和DPPH自由基的清除能力逐渐增大;小分子芸豆肽(C组分)的还原能力低于VC;对羟自由基、超氧阴离子自由基和DPPH自由基的半清除质量浓度分别为2.301、2.553、1.386mg/mL。该小分子肽组分的相对分子质量主要集中在100～1000,该组分疏水性氨基酸含量为36.78%,其疏水值达到364.73kcal/mol。说明小分子肽组分的抗氧化活性与其氨基酸种类和组成、相对分子质量分布密切相关。

双酶分段水解制备紫花芸豆肽工艺优化及抗氧化测定

研究紫花芸豆蛋白双酶分段水解的最佳工艺及产物的抗氧化特性。以水解度和抗氧化能力为测定指标,筛选酶种类及双酶组合方式,采用正交实验优化双酶分段水解工艺参数,提高紫花芸豆肽的水解度和抗氧化能力。最终确定胰蛋白酶+碱性蛋白酶分段水解为最佳水解工艺,参数为胰蛋白酶添加量7%、pH 10、温度50℃、时间4.5 h;碱性蛋白酶添加量7%、pH 9、温度60℃、时间3 h,水解度达到58.58%;对水解产物进行抗氧化性分析得到:当水解时间分别为6.5 h、7.0 h时,抑制脂质过氧化能力、超氧阴离子清除能力达到最大为46.53%、44.25%。结果均表明胰蛋白酶+碱性蛋白酶双酶分段水解工艺能显著提高紫花芸豆肽的水解度和抗氧化能力。

响应面优化紫花芸豆蛋白水解及多肽抗氧化研究

研究碱性蛋白酶水解紫花芸豆蛋白的工艺条件及其水解产物的抗氧化特性分析。采用响应面分析法,以水解度为响应值,对碱性蛋白酶水解紫花芸豆蛋白工艺条件中的温度、酶添加量、p H值和水解时间进行优化。研究结果表明:最佳水解工艺条件为温度62℃、酶添加量7.4%、p H 9.2、水解时间3.6 h,此时水解度达到36.5%。此条件下制得的紫花芸豆肽具有显著的羟自由基和超氧自由基清除能力,分别在水解时间为3.0 h、3.5 h时,对羟自由基和超氧自由基清除能力达到最高为28.2%、26.9%,综合评价,当水解时间为3.0 h作为制备抗氧化肽的最佳水解时间。

不同菌种发酵制备白芸豆多肽的研究

以白芸豆豆渣为原料,比较了米曲霉、酿酒酵母和黑根霉发酵法对白芸豆豆渣蛋白的水解度,从而探索几种微生物中能够最大程度的利用白芸豆豆渣蛋白制取白芸豆多肽的菌种及发酵条件的优化。实验结果表明,酿酒酵母对白芸豆蛋白质的水解度比较彻底;35℃,72h的水解度为6.5%;温度为30℃、发酵时间为48h时的水解度可达6.8%。为进一步利用发酵法制取白芸豆多肽提供了依据。

糖基化改性对英国红芸豆抗氧化肽抗氧化活性的影响

为了提高英国红芸豆抗氧化肽的抗氧化活性,利用木糖对其进行糖基化改性。首先利用单因素和正交实验对糖基化改性条件进行优化,然后利用荧光光谱、紫外-可见光谱和傅里叶中红外光谱对糖基化改性产物进行分析。结果表明,糖基化改性的最佳反应条件为:抗氧化肽质量浓度10 mg/mL、反应温度90℃、pH 7、反应时间4 h、糖肽比为1∶1;在此条件下制备的糖基化产物的羟基自由基清除率、DPPH自由基清除率、还原力和亚铁离子螯合能力分别提高了80.9%、75.1%、135.7%、27.2%,褐变程度为0.52,接枝度为39%。糖基化改性产物的荧光和紫外吸收特性增强,产物的-OH含量增加,在N-H、■和C-N键都发生了伸缩和振动。糖基化改性可以显著提高英国红芸豆抗氧化肽的抗氧化活性。

白芸豆多肽和氨基酸鲜味剂的研制

以白芸豆豆渣为原料,比较了以生熟豆渣用植物蛋白水解专用酶、木瓜蛋白酶、动物蛋白水解复合酶和碱性蛋白酶制备多肽和氨基酸的产量和口感。实验结果表明,以熟豆渣为原料,用碱性蛋白酶水解,得到的白芸豆多肽和氨基酸的产量和口感是最佳的。