基于中药特色技术传承概述广东芸香科道地药材

基于中药传统特色技术,文章通过现场观摩调研与文献检索,概述在十大广药中占有1/3的芸香科药物的药用历史、产地采收加工、性状鉴别特点。芸香科药物多含挥发油,具有芳香气,大部分具有宽中理气的功效,临床应用广泛。据考证,柚类橘红始自清代,此前使用橘类橘红;广陈皮主产区在新会地区,也称新会陈皮,药用时间至今约有600年;广佛手以肇庆高要地区产量多且质优,“佛手柑”的记载最早见于元朝。化橘红的传统加工方法是将化州柚的外层果皮切成角状,加工成7角的毛橘红药材,称为“毛七爪”;新会陈皮需在新会地区内陈化三年,方可称为“新会陈皮”。化橘红鉴别特点为表面密被柔软毡状细绒毛,有油点,气清香;新会陈皮“鬃眼”明显,对光照视呈半透明状,香气浓郁。广佛手切面的外皮呈黄色,肉呈白色,俗称“金边白肉”。文章基于中药传统理论、技术对广东地区芸香科道地药材进行概述,以期守正创新,使中药的传统特色技术得到传承发展。

芸香中香豆素类化学成分研究

目的研究中药芸香(Ruta graveolens L.)中香豆素类化学成分,并探讨其抗炎、抗凝活性。方法本实验利用各种色谱分离技术,结合核磁共振波谱及质谱联用技术对分离得到的单体化合物进行结构鉴定。CCK-8法筛选出无明显细胞毒性的化合物,用于对脂多糖诱导小鼠巨噬细胞(RAW 264.7)释放NO的检测,进行抗炎活性筛选,通过凝血酶原时间的测试进行抗凝活性筛选。结果从芸香提取物中共鉴定出10个香豆素类化合物,分别为补骨脂素(1)、花椒毒素(2)、chalepensin(3)、rutamontine(4)、3-(1',1',dimethyl allyl)-herniarin(5)、佛手苷内酯(6)、异莨菪亭(7)、异嗪皮啶(8)、去甲基软木花椒素(9)、Chalepin(10)。对10个化合物的抗炎、抗凝进行活性评价,结果显示,化合物2、4、9在20μmol/L时对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的NO生成有较好的抑制作用,抑制率分别为54.3%±1.7%、51.2%±5.5%、52.3%±1.7%;10个化合物在浓度为1.0 mmol/L条件下,均未表现出抗凝活性。结论从芸香提取物中分离得到10个香豆素类单体化合物,化合物3~5、7~10为首次从芸香中分离得到。该研究结果丰富了芸香的化学成分和生物活性研究,为芸香抗炎活性的开发和利用提供了理论基础。

N-甲基芸香碱通过调控ERK通路诱导人胶质母细胞瘤细胞凋亡和自噬

目的:已知红树林相关植物能够产生具有抗肿瘤活性的天然化合物。尽管这些化合物具有潜在的治疗价值,但其抗肿瘤作用的分子机制尚需阐明。本研究侧重探讨一种来源于红树林相关植物大管[Micromelum falcatum(Lour.)Tan.]的生物碱N-甲基芸香碱对人胶质母细胞瘤U87细胞的影响。方法:从大管茎皮中分离得到15种化合物。其中,N-甲基芸香碱被筛选用于评估其对U87细胞生长的抑制作用。采用划痕实验、Hoechst 33342/PI染色和蛋白免疫印迹等多种方法,研究了该化合物对细胞迁移、凋亡以及与自噬相关的蛋白的影响。结果:N-甲基芸香碱在24 h内抑制了U87细胞的迁移活动,抗凋亡蛋白Bcl-2的表达减少,促凋亡蛋白Bax的表达增加,促使U87细胞发生凋亡,同时提高了U87细胞中自噬相关蛋白LC3-II/LC3-I的比值。此外,在N-甲基芸香碱处理细胞后,发现ERK信号通路被下调。结论:N-甲基芸香碱能够诱导U87细胞的凋亡和自噬性细胞死亡,从而抑制细胞生长,这种效应似乎与ERK信号通路有关。

毛果芸香碱减轻对乙酰氨基酚所致肝损伤的作用及机制研究

目的 研究毛果芸香碱减轻对乙酰氨基酚(Acetaminophen, APAP)所致肝损伤的作用及机制。方法 采用小鼠腹腔注射APAP建立急性肝损伤模型,将18只C57BL/6小鼠随机分为空白对照组、APAP模型组、毛果芸香碱组,每组6只。毛果芸香碱组小鼠腹腔给药毛果芸香碱(2.5 mg/kg体重)7 d,末次给药1 h后,APAP模型组和毛果芸香碱组腹腔注射APAP(400 mg/kg体重),空白对照组腹腔注射等量生理盐水,APAP注射后12 h处死所有小鼠,采集血液和肝脏等组织样本。血清生化检测仪检测血清肝功指标天门冬氨酸氨基转移酶(Aspartate aminotransferase, AST)、丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase, ALT),采用HE染色方法检测肝脏病理评估毛果芸香碱对APAP诱导肝损伤的药效作用;Western blot方法检测肝脏增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen, PCNA)及细胞外调节蛋白激酶(Extracellular regulated protein kinases1/2, ERK1/2)蛋白表达,探索肝细胞增殖作用及其可能的机制。结果 与空白对照组比较,APAP模型组小鼠的ALT和AST含量均显著升高(P<0.001),表明APAP模型建立成功;与APAP模型组比较,毛果芸香碱组小鼠血清AST含量显著降低(P<0.01),ALT含量无统计学差异(P>0.05)。HE染色病理学结果显示,与空白对照组比较,APAP模型组小鼠肝脏出现肝小叶中心坏死、肝内出血和细胞核消失或固缩;与APAP模型组比较,毛果芸香碱组小鼠改善了肝小叶中心坏死、肝内出血和细胞核固缩。Western blot结果显示,与空白对照组和APAP模型组比较,毛果芸香碱组小鼠肝脏PCNA蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.01);与空白对照组和APAP模型组比较,毛果芸香碱组小鼠p-ERK/ERK蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 毛果芸香碱能减轻APAP所致肝损伤,其分子机制可能是毛果芸香碱通过激活肝细胞中m3AchR-ERK1/2信号通路进而促进肝细胞增殖来发挥作用。

芸香苷改善大鼠椎间盘退变的机制

背景:芸香苷具有抗氧化、抗炎、抗细胞凋亡、血管保护、神经保护和心脏保护等药理活性,可用于治疗癌症、糖尿病、高血压和高胆固醇血症等多种疾病,但其在椎间盘退变性疾病中的研究较少。目的:探究芸香苷对大鼠椎间盘退变的调控和作用机制。方法:(1)从大鼠髓核组织中分离获得髓核细胞,之后用芸香苷(10,50,100,200,400μmol/L)和白细胞介素1β(10μg/L)处理髓核细胞,检测细胞活性、炎症因子和氧化应激因子的表达以及细胞代谢酶的生成、基质降解和细胞凋亡的情况;之后加入WNT/β-catenin通路激活剂R-spondin1处理髓核细胞,检测β-catenin、c-Myc和Cyclin D1表达。(2)36只SD大鼠随机选取其中26只,用针刺纤维环构建椎间盘退变模型,1周后通过磁共振成像(MRI)进行评估,其余10只为假手术组做对照。建模成功的大鼠随机分为椎间盘退变模型组和芸香苷组,芸香苷组大鼠使用40 mg/kg芸香苷灌胃处理8周,模型组和假手术组大鼠用等量的生理盐水处理。Pfirrmann分级系统评定椎间盘退变程度;ELISA检测各组大鼠血清中白细胞介素6,胶原Ⅱ浓度和caspase-3活性;Western blotting检测各组大鼠髓核组织中聚集蛋白聚糖和诱导型一氧化氮合酶的蛋白表达水平。结果与结论:(1)细胞实验:100μmol/L芸香苷能够完全缓解白细胞介素1β造成的髓核细胞毒性,抑制白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、环氧化酶2、诱导型一氧化氮合酶、基质金属蛋白酶3、13和ADAMTS-5表达,抑制胶原Ⅱ、聚集蛋白聚糖降解和细胞凋亡,R-spondin1能逆转芸香苷的作用;(2)体内研究发现,与椎间盘退变模型组相比,芸香苷组的大鼠血清中白细胞介素6质量浓度降低,胶原Ⅱ质量浓度升高,caspase-3活性降低,髓核组织中诱导型一氧化氮合酶蛋白水平下调,聚集蛋白聚糖蛋白水平升高,椎间盘退变有明显的改善;(3)结果说明,芸香苷通过抗炎、抗氧化和抑制基质降解改善大鼠的椎间盘退变。

基于叶绿体基因组数据的芸香科属间系统发育初步分析

为探究花椒属种水平系统进化关系以及为新品种培育研究奠定理论基础,该研究以芸香科物种的叶片为材料,采用改良CTAB法提取叶绿体DNA,利用BGISEQ-500平台进行叶绿体基因组测序,并对叶绿体基因组进行组装、注释,联合NCBI数据库数据,共获得芸香科19属49个物种的全叶绿体基因组序列。构建了芸香科属间系统进化关系。结果表明,(1)基于叶绿体基因组序列矩阵(总长196641 bp),ML和BI 2种方法得到的系统发育树的拓扑结构基本一致,系统发育树各分支具有较强的支持率,叶绿体基因组数据可以解决芸香科属间的系统发育关系。(2)芸香科为单系类群,并进一步形成两大分支,其中柑橘亚科为单系,与芸香亚科内的芸香属聚为分支I,分支Ⅱ由芸香亚科和飞龙掌血亚科组成,两亚科均不是单系,其中飞龙掌血亚科的香肉果属,茵芋属与芸香亚科的白鲜属,臭常山属是最早分化出来的类群,其次是蜜茱萸属和山油柑属;黄檗属和吴茱萸属与花椒属类群形成姊妹群,飞龙掌血属的物种飞龙掌血嵌套于花椒属分支中,支持飞龙掌血物种并入花椒属的处理。

源于同属植物的苏合香浸膏和芸香浸膏的成分分析及应用评价

为研究源于同属植物的苏合香浸膏和芸香浸膏的挥发性成分及应用效果差异,运用传统醇提精制方法制备两种浸膏,并通过GC/MS对两种浸膏中的挥发性成分进行对比分析,在两种浸膏中鉴定出的挥发性成分均为37种,共有成分为23种。将两种浸膏应用在电子烟中进行感官评价,苏合香浸膏表现出较明显的膏香和甜香特征,而芸香浸膏则以药草香和膏香作为主香韵。研究表明两种浸膏的应用效果与内含的化学成分具有明显的关联性。

《本草纲目》“芸香”非“山矾”考

李时珍《本草纲目·山矾》“释名”和“集解”中将芸香归入山矾进行解释,实有不妥。按照现代植物学的分类,芸香是芸香科芸香属落地植物,而山矾是山矾科山矾属乔木。无论从植物的外部形貌,还是从植物的性质功用和功效主治看,“山矾”和“芸香”都有明显的差异,它们是两种不同的植物,不可混同一物。山矾当归入《本草纲目》中“木部”进行训释,而芸香应列入“草部”进行训释。

论紫砂壶作品《芸香》的艺术特色与文化品格

紫砂创作重视古典美特色,在发展、创新的过程中,注重融合、吸收一切优秀的艺术元素,彰显了紫砂壶艺术的优秀品质。《芸香》一壶充满古雅之美,其泥色经典,形态稳重,陶刻装饰具有文化韵味。此壶力图通过组合传统元素彰显紫砂壶艺术的古典特色,并通过文化的融合体现紫砂壶的艺术品质。

芸香苷铜(Ⅱ)络合物的电喷雾多级串联质谱分析

利用电喷雾离子阱质谱对黄酮苷类化合物———芸香苷与二价金属铜的络合物在软电离质谱条件下的络合行为进行了系统分析。所形成的 1∶1、2∶1、2∶2和 3∶2等不同化学计量比的芸香苷铜离子 (Ⅱ )络合产物 ,分别用 [R -H +Cu]+ ,[2R -H +Cu]+ ,[2R -3H +2Cu]+ 和 [3R -3H +2Cu]+ 表示。在多级串联质谱实验中 ,主要得到糖苷键断裂丢失寡糖链末端的鼠李糖基与苷元连接的葡萄糖基及整个寡糖链等中性碎片 ,同时也有寡糖链开环断裂和失水反应发生。

辅助苦荞粉乙基芸香苷超声提取工艺优化研究

为对苦荞粉乙基芸香苷超声辅助提取工艺进行优化。文章以苦荞粉为原料,以超声功率、料液比、萃取温度、萃取时间4个因素进行单因素实验,研究某因素不同水平对乙基芸香苷提取的影响;在此基础上进行正交实验确定苦荞粉乙基芸香苷最佳提取工艺。结果显示当超声功率300 W、料液比1:35 g/mL、萃取温度50℃、萃取时间6 min时,乙基芸香苷提取率最大。本文建立了苦荞粉乙基芸香苷超声辅助提取工艺,为苦荞相关保健产品的开发提供数据支持。

复方芸香片质量控制的实验研究

采用薄层色谱法对其进行定性研究。采用薄层扫描法测定其补骨脂素的含量。

芸香酸有机锡酯的红外光谱研究

合成了二丁基、三丁基和三苯基锡的芸香酸酯，进行了表征，并报道红外光谱研究结果。

高效液相色谱化学发光抑制检测法测定烟草中的绿原酸和芸香苷

1 引言绿原酸和芸香苷是烟草中含量最多、最重要的多酚类化合物,发展绿原酸和芸香苷的高灵敏度和高选择性的分析方法对于烟叶质量的控制、植物生理的研究具有重要意义.基于绿原酸、芸香苷对鲁米诺化学发光的抑制作用,首次建立了绿原酸、芸香酸的高效液相色谱化学发光抑制检测法.该法灵敏度高、选择性好,用于烟草样品中绿原酸与芸香苷的测定,结果令人满意.

芸香甙对脑缺血再灌损伤的保护作用

目的研究芸香甙（Ｒｕ）对脑缺血再灌损伤的保护作用。方法小鼠脑缺血再灌模型通过结扎双侧颈总动脉并尾部放血０．３ｍｌ，再灌后，记录异常神经症状和断头后张口喘气时间，测定脑组织中乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）含量；利用４血管模型，大鼠前脑缺血３０ｍｉｎ后再灌注４０ｍｉｎ。取脑组织测定ＬＤＨ、过氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、丙二醛（ＭＤＡ）、一氧化氮（ＮＯ）及脑水肿。结果Ｒｕ（５０，１００ｍｇ·ｋｇ－１，ｉｖ），显著改善小鼠脑缺血再灌损伤后的异常神经症状和抑制断头后张口喘气时间的缩短及脑组织中ＬＤＨ的减少。Ｒｕ显著抑制大鼠脑缺血再灌损伤所致的脑水肿形成和脑组织中ＬＤＨ、ＳＯＤ、ＭＤＡ及ＮＯ的变化。结论Ｒｕ对脑缺血再灌损伤有显著的保护作用，其机制与抗自由基和ＮＯ有关。

芸香苷与铝的显色反应研究及其应用

为了测定烟叶中的铝含量 ,研究了芸香苷与铝的显色反应。在pH =5.6HAc -NaAc缓冲介质中和溴化十六烷基三甲基胺 (CTMAB)存在下 ,芸香苷与铝反应生成稳定的络合物。该络合物的λmax=4 30nm ,ε=4 .4 5× 10 4 L·mol- 1·cm- 1,铝含量在 0～ 10 μg/ 2 5ml内符合比尔定律 ,结合微波消化样品技术 ,建立了一种烟草样品中铝含量测定的新方法。平行 5次测定 ,该方法的RSD在 1.8%～ 2 .4 %之间 ,标准回收率为 96%～ 10 2 % 。

芸香甙对应激性胃粘膜损伤保护作用的机制研究

目的初步研究芸香甙（Ｒｕ）对应激性胃粘膜损伤保护作用的机制。方法采用大鼠冷冻－束缚应激模型，评价胃粘膜损伤指数的变化。ＭＤＡ和ＧＳＨ含量测定分别应用ＴＢＡ和ＤＴＮＢ法，胃粘膜局部血流量（ＧＭＢＦ）测定应用氢气清除法。结果给予Ｒｕ抗溃疡剂量（５，２０ｍｇｋｇ－１，ｉｇ）ｂｉｄ，连续５ｄ，使血清和胃粘膜中因应激而升高的ＭＤＡ含量明显降低，并可升高应激后降低的胃粘膜ＧＳＨ含量。高Ｃａ２＋／低Ｃａ２＋分别可拮抗／增强Ｒｕ的胃粘膜保护作用。Ｒｕ尚可提高应激后降低的ＧＭＢＦ。Ｒｕ的构效关系研究显示，３个剂量（８．２，１６．４，３２．８μｍｏｌｋｇ－１）的Ｒｕ和槲皮素（ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ，Ｑｕｅ）均可减轻应激所致的胃粘膜损伤，但Ｒｕ和Ｑｕｅ相同剂量组之间的胃粘膜损伤指数差异无显著性。结论Ｒｕ对应激性胃粘膜损伤保护作用的机制可能与其抗氧化作用、Ｃａ２＋拮抗和改善ＧＭＢＦ有关。Ｒｕ结构中的甙元部分在保护胃粘膜中起主要作用。

湖南不同烟区烤烟中绿原酸和芸香苷的研究

为了探索湖南不同生态烟区烤烟中绿原酸和芸香苷含量的差异及其对烤烟香气风格的影响,采用高效液相色谱技术,对湖南省不同生态烟区以及不同部位烤烟叶中绿原酸和芸香苷的含量进行了研究.结果表明,湖南湘南烟区K326烤烟中绿原酸和芸香苷含量显著高于湘北和湘中烟区;不同部位烤烟中芸香苷的含量差异极显著,依上部叶、中部叶、下部叶递减.但是湘南烟区种植的K326与云烟87两个烤烟品种之间绿原酸和芸香苷的含量差异不显著.

FT-NIR光谱法测定烟草中绿原酸、芸香苷、莨菪亭及总多酚含量

研究应用傅里叶变换近红外光谱法快速测定烟草中绿原酸、芸香苷、莨菪亭及总多酚含量的可行性。使用偏最小二乘法(PLS)为建模方法,选择7 500～4 000cm-1谱段,采用二阶导数和Norris滤波法进行光谱预处理,建立了烟草中绿原酸、芸香苷、莨菪亭及总多酚的近红外预测模型。组分最佳PLS预测模型的相关系数r分别为0.976 6,0.941 9,0.957 1和0.966 6,SEP均小于1.2倍的SEC,验证集样本的标准偏差(SD)/SEP均大于2。交叉检验的均方差(RMSECV)分别为1.938 9,1.046 2,0.047 9和2.745 2。实验验证了模型偏差的显著性,将近红外光谱技术与常规标准检测方法相比较。结果表明:两种方法测得值在显著水平0.05时,不存在显著性差异,近红外光谱技术可以准确地定量分析烟草中绿原酸、芸香苷、莨菪亭及总多酚。

烟草绿原酸、芸香苷、烟碱和茄尼醇的提取技术研究

为实现烟草中绿原酸、芸香苷、茄尼醇和烟碱的高效利用,探索了利用有机溶剂从烟草中同时提取绿原酸、芸香苷、茄尼醇和烟碱的实验条件。结果表明,以超声波为辅助手段,烟末样品在料液比1:10,提取温度40℃,依次以80%、95%、80%的乙醇溶液或80%、80%、95%乙醇溶液组合为提取溶剂提取3次,提取时间依次为20、10、10 min的条件下,烟草绿原酸、芸香苷、烟碱、茄尼醇的提取率均达99.75%以上,该方法适用于烟草中绿原酸、芸香苷、茄尼醇和烟碱的综合提取。