HPLC法同时测定白芍、甘草药对提取物中9种有效成分

目的建立反向高效液相色谱法,同时测定白芍甘草药对提取物中芍药内酯苷、芍药苷、甘草苷、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖、芹糖基异甘草苷、异甘草苷、苯甲酰芍药苷、甘草酸、异甘草素9种成分。方法采用Dikma Technologies-C18(200mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.1%磷酸(B),梯度洗脱,体积流量1.0mL/min,检测波长为267nm(0～13min)、258 nm(13～17min)、230 nm(17～27min)、276 nm(27～42min)、360 nm(42～46 min)、276nm(46～50min)、230nm(50～53min)、275nm(53～55min)、250nm(55～90min),柱温30℃。结果在色谱条件下,芍药内酯苷、芍药苷、甘草苷、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖、芹糖基异甘草苷、异甘草苷、苯甲酰芍药苷、甘草酸、异甘草素的进样量分别在0.004 476～0.044 76μg,0.014 67～0.146 7μg,0.004 975～0.049 75μg,0.001 031～0.010 31μg,0.005 813～0.058 13μg,0.001 744～0.017 44μg,0.000 982～0.009 82μg,0.018 20～0.182 0μg,0.000 098～0.000 98μg范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系;加样回收率(n=5)均在96.3%～103.4%,RSD均小于2.5%。结论本法快速、准确,重复性好,可更好地控制白芍炙甘草药对提取物的质量。

甘草黄酮类成分对Caco-2细胞P-糖蛋白功能和表达的影响

目的研究甘草黄酮类成分对Caco-2细胞P-糖蛋白（P-gP）功能和表达的影响，探讨甘草解毒的作用机制。方法采用流式细胞仪检测经甘草黄酮类成分处理后Caco-2细胞对罗丹明123摄取量的影响，以评价P．gP的外排功能；采用Westernblotting法检测甘草黄酮类成分对Caco-2细胞P—gp表达的影响。结果与对照组相比，甘草总黄酮5、10、50、100μg／mL作用Caco-2细胞1h后，使细胞内罗丹明123的荧光强度分别减少61．1％、56．3％、49．2％、45．4％；甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素、芹糖基甘草苷、芹糖基异甘草苷在相同质量浓度，使细胞内罗丹明123的荧光强度减少了19．3％-37．9％。与对照组相比，甘草总黄酮10-400μg／mL给药后72h，使Caco-2细胞膜上P-gP的表达显著增加（P〈0．01）；甘草苷、异甘草苷、甘草素、芹糖基甘草苷5-400μmol／L，异甘草素、芹糖基异甘草苷10-400μmol／L对此也有显著作用（P〈0．01）。结论甘草黄酮类成分增强Caco-2细胞P—gp的功能，上调P-gP的表达，促进细胞内有毒物质的外排，减少有毒物质在肠道的吸收，这可能是甘草配伍其他中药的解毒机制之一。

RP-HPLC法同时测定不同产地甘草中9个主要成分的含量

目的:建立同时测定甘草药材中芹糖基甘草苷、甘草苷、芹糖基异甘草苷、异甘草苷、甘草查尔酮B、甘草素、刺甘草查尔酮、异甘草素和甘草酸含量的高效液相色谱方法。方法:采用DiamonsilTMC18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.05%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速为0.8 mL.min-1,检测波长为276 nm(0～20 min)、360 nm(20～30 min)、276 nm(30～35 min)、370 nm(35～48 min)、248 nm(48～55 min),柱温为40℃。结果:芹糖基甘草苷、甘草苷、芹糖基异甘草苷、异甘草苷、甘草查尔酮B、甘草素、刺甘草查尔酮、异甘草素和甘草酸的浓度分别在13.1-262μg.mL-1(r=0.9994)、8.3-100μg.mL-1(r=0.9997)、5.2～104μg.mL-1(r=0.9997)、0.96～11.5μg.mL-1(r=0.9995)、0.31～10.00μg.mL-1(r=0.9999)、1.11～22.2μg.mL-1(r=0.9991)、0.23～7.25μg.mL-1(r=0.9998)、0.52～10.40μg.mL-1(r=0.9996)、25.25～808.0μg.mL-1(r=0.9995)与各自峰面积值呈良好的线性关系;平均回收率(n=6)分别为103.6%、104.5%、104.9%、100.4%、102.2%、101.5%、100.4%、98.5%、101.7%。结论:本方法简便,重复性好,可以更好地用于甘草药材的质量控制。

波长切换HPLC法同时测定甘草及其炮制品中7个物质的含量

目的:建立高效液相色谱法测定甘草及炮制品中芹糖基甘草苷、甘草苷、芹糖基异甘草苷、异甘草苷、甘草素、甘草酸、异甘草素的含量。方法:采用Dikma Technologies-C18(200 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.05%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速:0.8mL.min-1,检测波长为276 nm(0～16 min)、360 nm(16～24 min)、276 nm(24～28 min)、248 nm(28～38min)、370 nm(38～42 min),柱温30℃。结果:在本文色谱条件下,芹糖基甘草苷、甘草苷、芹糖基异甘草苷、异甘草苷、甘草素、甘草酸、异甘草素的进样量分别在0.056～0.56,0.095～0.95,0.026～0.26,0.015～0.15,0.013～0.13,0.348～3.48,0.003～0.03μg范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系;加样回收率(n=6)均在96.1%～98.1%,RSD均小于2.6%。16个来源甘草药材及其4种不同炮制品中7个物质的含量有一定差异。结论:本法快速、准确,重复性好,可更好地控制甘草药材及其炮制品的质量。