芹菜籽提取物诱导卵巢癌SKOV-3细胞凋亡的实验研究

目的研究芹菜籽提取物(celery seed extracts,CSE)诱导卵巢癌SKOV-3细胞凋亡的作用。方法培养卵巢癌细胞株SKOV-3,配制不同浓度的芹菜籽提取液混合物(CSE)溶液,以2,2-二苯代苦味肼基自由基(DPPH)实验检测芹菜籽粗提物的抗氧化活性;应用激光共聚焦显微镜观察其凋亡的形态学表现,Western blot检测Caspase-3蛋白的表达。结果一定浓度范围的CSE对SKOV-3细胞的增殖均有抑制作用,且呈量效关系,激光共聚焦显微镜观察CSE作用12 h后SKOV-3细胞凋亡显著。Western blot分析表明药物处理后SKOV-3细胞的Caspase-3蛋白表达增加。结论 CSE能抑制卵巢癌SKOV-3细胞的增殖,促进其凋亡,其作用机制可能与提高Caspase-3活性有关。

芹菜籽提取物抑制卵巢癌细胞SKOV-3生长的机制研究

目的研究芹菜籽提取物(CSE)对卵巢癌细胞生长抑制的作用及机制。方法超临界提取芹菜籽成分(CSE),体外培养人卵巢癌细胞株SKOV-3,MTT法检测CSE对细胞生长的抑制作用,流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡以及PI单染色法检测细胞周期。结果成功提取芹菜籽成分(CSE),MTT法检测显示CSE可呈现剂量依赖性抑制卵巢癌细胞的生长,流式细胞术结果显示CSE抑制细胞周期进程、促进细胞凋亡。结论 CSE抑制卵巢癌细胞株SKOV-3生长繁殖,其机制可能与阻滞细胞周期、促进凋亡有关。

芹菜籽提取物灌胃对大鼠慢性高原病的治疗作用

目的 观察芹菜籽提取物灌胃对大鼠慢性高原病(CMS)的治疗作用。方法 将50只SD大鼠随机分为A、B、C、D、E组各10只,其中A、B、C、D组大鼠制备CMS模型,制模成功后A组灌胃芹菜籽醇提物270mg/kg,B组灌胃芹菜籽水提物270mg/kg,C组灌胃硝苯地平片2.7mg/kg,D组灌胃纯净水,1次/d,共15d;E组大鼠在平原条件下正常喂养30d,后灌胃纯净水,1次/d,共15d。比较各组灌胃15d,末次给药24h后测定肺动脉压(PAP)及血清C反应蛋白(CRP)、红细胞生成素(EPO)、血管内皮生长因子(VEGF)、载脂蛋白A1(Apo-A1)和心脏组织形态学。结果 各组PAP及血清CRP、EPO、VEGF、Apo-A1水平两两比较,P均<0.05。E组大鼠心肌纤维排列整齐,横纹清晰,心肌细胞染色清晰,心肌间质无明显病理改变;D组大鼠心脏组织心外膜下大量出血,心脏纤维排列紊乱,横纹不清,心肌纤维化嗜酸性病变细胞浸润,心肌细胞颗粒样变性;心肌间质血管明显扩张和充血,偶见部分间质血管炎细胞浸润;A、B、C组大鼠心脏组织形态明显改善,A组改善效果最佳。结论 芹菜籽提取物可降低CMS大鼠PAP,调整心肌损伤相关血清学指标,减轻心肌损伤,对大鼠CMS有治疗作用,且芹菜籽醇提物效果略优于芹菜籽水提物。

芹菜籽提取物保护Toll样受体4参与的内皮细胞过氧化损伤

目的观察芹菜籽提取物(CSE)在保护氧化性低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤时,细胞生长与炎症反应Toll样受体4(TLR4)表达的影响,探讨CSE抗氧化损伤的可能作用机制。方法体外培养HUVEC,CSE三个浓度预处理,加入ox-LDL氧化损伤,应用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)测定细胞活力、流式细胞术PI染色检测细胞周期、激光共聚焦显微镜JC-1染色检测线粒体膜电位,Western blot检测TLR4蛋白水平的表达。结果与正常对照组相比,经ox-LDL损伤后HUVEC细胞吸光度(OD值)下降(P<0.05,P<0.01),且呈浓度依赖性效应、细胞周期阻滞在G0期,S期细胞比例下降(P<0.01)、细胞线粒体膜电位明显下降、TLR4的表达与正常组相比明显升高;CSE预处理使细胞吸光度上升、细胞周期S期细胞比例显著增加(P<0.05或P<0.01)、线粒体膜电位上升、TLR4的表达与损伤组相比下降(P<0.05或P<0.01)。结论抑制TLR4的表达可能是CSE抗内皮细胞氧化损伤、阻止经线粒体途径的细胞周期停滞的可能机制之一。

HPLC测定芹菜籽提取物中木犀草素含量

目的建立高效液相色谱法测定芹菜籽提取物中木犀草素的含量。方法采用Apollo C18柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液（30∶70）;流速为1.0 mL.min-1;进样量为20μL;检测波长为269 nm;柱温为30℃。结果木犀草素浓度线性范围为0.50~10.0μg.mL-1（r=0.999 8）,3个浓度的加样回收率分别为100.2%,100.1%和101.2%,RSD分别为1.02%,1.91%和1.75%。结论本法操作简单、准确、专属性强,可作为芹菜籽提取物质量控制的方法。

一测多评法测定芹菜籽中芹菜甲素、芹菜乙素和新蛇床内酯

目的建立一测多评法同时测定芹菜籽中芹菜甲素、芹菜乙素和新蛇床内酯的含量,验证该方法在芹菜籽中应用的准确可行性。方法以芹菜籽原料药中主要成分芹菜甲素、芹菜乙素和新蛇床内酯为指标,在一定范围内建立芹菜甲素与芹菜乙素、芹菜甲素与新蛇床内酯的校正因子。测定芹菜甲素的含量,测得校正因子f芹菜甲素/芹菜乙素=0.226;用校正因子测定芹菜乙素和新蛇床内酯的含量,测得校正因子f芹菜甲素/新蛇床内酯=0.702,同时,采用外标法测定6批不同批次中3个成分的含量,以验证一测多评法的准确性和科学性。结果不同仪器所得相对校正因子的RSD为4.4%～6.7%,同一台仪器不同色谱柱所得相对校正因子的RSD为2.3%～3.6%,建立的校正因子重现性良好,原料药中采用校正因子计算的含量值与外标法实测值之间没有明显差异。结论在缺乏对照品的情况下,该方法可用于芹菜籽中多成分质量评价研究。