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芹菜过敏原蛋白Api g1.02的克隆、表达及单抗制备
1
作者
王海艳
袁飞
+3 位作者
吴亚君
杨海荣
李刚
陈颖
《中国食品学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2012年第5期144-148,共5页
提取芹菜总RNA,反转录PCR(RT-PCR)扩增出过敏原蛋白Apig1.02基因,经PCR、酶切和序列测定后,得到重组质粒pET-32a-Apig1.02。将重组质粒转化到BL21(DE3)pLys感受态细胞中,用1mmol/L异丙基硫代-B-D-半乳糖苷(IPTG)对转化菌进行诱导表达及S...
提取芹菜总RNA,反转录PCR(RT-PCR)扩增出过敏原蛋白Apig1.02基因,经PCR、酶切和序列测定后,得到重组质粒pET-32a-Apig1.02。将重组质粒转化到BL21(DE3)pLys感受态细胞中,用1mmol/L异丙基硫代-B-D-半乳糖苷(IPTG)对转化菌进行诱导表达及SDS-PAGE分析后,将表达蛋白提取纯化,制备单克隆抗体并进行Western blot分析。结果表明芹菜过敏原蛋白Apig1.02在体外获得了高效表达,表达融合蛋白分子质量约35ku,诱导6h后表达量最高,占菌体总蛋白的40%左右;制备的单克隆抗体能与表达蛋白发生免疫印迹反应,说明所表达的蛋白具有良好的免疫原性。该研究结果为建立芹菜过敏原蛋白的免疫学检测方法奠定了基础。
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关键词
芹菜过敏原蛋白apig1.02
克隆
蛋白
表达
单克隆抗体
原文传递
题名
芹菜过敏原蛋白Api g1.02的克隆、表达及单抗制备
1
作者
王海艳
袁飞
吴亚君
杨海荣
李刚
陈颖
机构
中国检验检疫科学研究院
内蒙古出入境检验检疫局
出处
《中国食品学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2012年第5期144-148,共5页
基金
国家"十一五"科技支撑项目(2009BAD9B03)
科技部公益性行业科研专项(10-46)
文摘
提取芹菜总RNA,反转录PCR(RT-PCR)扩增出过敏原蛋白Apig1.02基因,经PCR、酶切和序列测定后,得到重组质粒pET-32a-Apig1.02。将重组质粒转化到BL21(DE3)pLys感受态细胞中,用1mmol/L异丙基硫代-B-D-半乳糖苷(IPTG)对转化菌进行诱导表达及SDS-PAGE分析后,将表达蛋白提取纯化,制备单克隆抗体并进行Western blot分析。结果表明芹菜过敏原蛋白Apig1.02在体外获得了高效表达,表达融合蛋白分子质量约35ku,诱导6h后表达量最高,占菌体总蛋白的40%左右;制备的单克隆抗体能与表达蛋白发生免疫印迹反应,说明所表达的蛋白具有良好的免疫原性。该研究结果为建立芹菜过敏原蛋白的免疫学检测方法奠定了基础。
关键词
芹菜过敏原蛋白apig1.02
克隆
蛋白
表达
单克隆抗体
Keywords
Celery allergen Api g
1.02
cloning
protein expression
monoclonal antibody
分类号
R155.5 [医药卫生—营养与食品卫生学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
芹菜过敏原蛋白Api g1.02的克隆、表达及单抗制备
王海艳
袁飞
吴亚君
杨海荣
李刚
陈颖
《中国食品学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2012
0
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已选择
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