豆豉纤溶酶Subtilisin FS33的提取纯化与鉴定

探讨了凝胶层析法提取纯化新型纤溶酶Subtilisin FS33的方法。芽胞杆菌(Bacillus subtilis)DC33发酵液或固态豆豉抽提液在30%～65%硫酸铵饱和度下分段盐析沉淀,再经DEAE-Sepharose FF、Phenyl Sepharose 6FF、Sephadex G-50连续凝胶层析纯化,得到电泳纯纤溶酶Subtilisin FS33,其最终纯化倍数和回收率分别达到34.6倍和13.0%,酶蛋白比活力达到15495U/mg。该酶在还原和非还原条件下SDS-PAGE电泳分析均呈现单一条带,分子量为30kDa;活性电泳FS33凝胶条带在纤维蛋白平板上也表现出强烈纤溶活性。