1例胰腺癌患者合并中间苍白杆菌菌血症并文献回顾

目的:分析一例胰腺癌患者合并中间苍白杆菌感染引起的菌血症,探讨该菌引起菌血症的感染途径、危险因素、临床特征以及治疗方案,以期为该疾病的诊疗提供经验。方法:回顾分析威海市立医院收治的1例中间苍白杆菌菌血症病例的临床资料、实验室检查、治疗方案,并复习相关文献。结果:本患者病情复杂、免疫力低下,通过血培养、胆汁培养结果、感染指标结果以及临床症状等综合诊断为中间苍白杆菌菌血症,并及时根据药敏结果使用抗菌药物控制感染。结论:临床应提高对少见菌中间苍白杆菌的病原特点、临床特征以及血培养对菌血症的诊断意义的认识,尽早确诊并及时合理治疗从而改善患者预后。

氧化胁迫诱导苍白杆菌JP1形成VBNC状态及其特征

石油降解菌在各种有害环境因素作用下会进入活的非可培养(viable but non-culturable,VBNC)状态,从而影响其生长及石油降解率。为了研究有害环境因素对石油降解菌生长及石油降解率的影响,采用分光光度法、荧光染色-激光共聚焦显微镜观测H 2O 2胁迫下苍白杆菌(Ochrobactrum sp.)JP1细胞的生长及VBNC状态形成情况。结果表明,不同浓度H 2O 2对其生长有一定抑制作用,当培养液中H 2O 2浓度为75.0 mmol/L时,可有效抑制苍白杆菌JP1生长,处理12 h后苍白杆菌JP1进入VBNC状态。VBNC状态的苍白杆菌JP1细胞缩小变成球体,周质间隙增大;在适宜条件下,VBNC状态苍白杆菌JP1能够复苏为可培养状态,添加丙酮酸钠能够促进VBNC状态细菌细胞的复苏。复苏后的苍白杆菌RJP1具有良好的环境适应性和石油降解能力,为石油污染生物修复的菌种筛选及应用提供了新的策略。

中间苍白杆菌尼古丁降解相关基因ocnH的克隆及功能分析

通过PCR扩增获得中间苍白杆菌SCUEC4菌株中与尼古丁降解相关的ocnH基因,构建重组质粒pET28a(+)-ocnH,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株进行异源表达,并对表达条件进行优化,用高效液相色谱法测定重组表达菌株的马来酸异构酶活性.结果表明:ocnH基因大小为585 bp,编码蛋白分子量约为20.6 kDa.重组表达菌株在IPTG浓度为0.6 mmol·L^(-1)、诱导温度为25℃、诱导表达时间为20 h时,OcnH蛋白的表达量较高.转入pET28a(+)-ocnH的大肠杆菌BL21(DE3)菌株具有将马来酸转化为富马酸的功能.

苍白杆菌B2对甲基对硫磷降解途径研究

采用薄层层析、紫外吸收光谱以及气谱-质谱联用的方法分析了苍白杆菌Ochrobacterumsp.B2降解甲基对硫磷的中间产物。结果表明,B2水解甲基对硫磷产生对硝基苯酚(PNP),PNP通过产生4-硝基邻苯二酚(4-nitrocatechol,4-NC)和1,2,4-苯三酚(1,2,4-benzenetriol)的途径进一步代谢。苍白杆菌B2可以以PNP和4-NC为碳源生长,在菌的初始OD600值为0.02时,B2可在48h内将50mg/L的PNP完全降解,在60h内,将30mg/L的4-NC完全降解。

人苍白杆菌引起泌尿系感染及耐药性分析

人苍白杆菌（ Ochrobactrium anthropi, O. anthropi）属苍白杆菌属，是非发酵型革兰阴性需氧杆菌，广泛分布于土壤和水中，为一种条件致病菌。2010年8月，江苏省中医药研究院检验科从1例胃癌伴肝转移患者的中段尿中分离培养出入苍白杆菌，对大多数头孢菌素和青霉素类抗菌药物耐药，临床比较少见，由该菌引起的泌尿系感染也很罕见。

儿童感染人苍白杆菌的耐药性及DHA-1基因检出

目的初步探讨败血症患儿血标本分离的人苍白杆菌耐药机制。方法采用VITEK2compact全自动微生物鉴定药敏系统对败血症患儿分离的病原菌进行鉴定和药敏试验;聚合酶链反应(PCR)法对人苍白杆菌受试株进行AmpC、AmpR、DHA-1、AcrA、RamA、OprD、TEM、SHV等多重耐药基因检测,扩增产物经纯化后测序并进行序列分析。结果从败血症患儿的血标本中检出155株人苍白杆菌,从中随机选取30株进行检测。30株试验菌株中,有20株耐哌拉西林/他唑巴坦,其中16株(80.00%,16/20)扩增出人苍白杆菌AmpC/R基因,2株(10.00%,2/20)扩增出DHA-1基因。30株受试菌均未扩增出AcrA、RamA、OprD、TEM、SHV等基因。将155株人苍白杆菌根据其是否耐哌拉西林/他唑巴坦,分成耐药组(126株)和非耐药组(29株),其中耐药组菌株对氨苄西林、第一～三代头孢菌素、氨曲南等几乎100%耐药,但对左氧氟沙星、亚胺培南、美罗培南、环丙沙星、阿米卡星、庆大霉素等耐药率(0.00%～1.59%)低。结论产AmpC/R是儿童感染人苍白杆菌耐多种抗菌药物的机制,重症患儿可选用亚胺培南。应加强对人苍白杆菌耐药性的监测,防止DHA基因在革兰阴性杆菌中流行。

苍白杆菌还原Cr(Ⅵ)的最适条件及其豆渣培养基的优化

利用本实验室筛选的一株苍白杆菌进行还原Cr(Ⅵ)的实验,在LB培养中它对Cr(Ⅵ)具有很强的还原能力,其最适还原条件为pH 8,温度30℃,证明它是一种专性好氧偏碱性细菌。通过在豆渣培养基中培养,并对豆渣进行优化处理,证实苍白杆菌在优化后的豆渣培养基中对Cr(Ⅵ)具有良好的还原能力。这为利用苍白杆菌处理含铬工业废渣、废液提供了廉价的培养基和为其实现工程化提供了实验依据。

116例人苍白杆菌的耐药率及临床危险因素分析

目的探讨人苍白杆菌血流感染的临床特点、危险因素分布及耐药特点,为有效预防和治疗该菌血流感染提供科学依据。方法回顾性统计分析2012年1月至2014年12月广州医学院第三附属医院北院收治的116例血液细菌培养为人苍白杆菌感染的临床和检验资料。结果本研究血流感染人苍白杆菌病例中,性别分布为：男性占52.59%（61/116）,女性占47.41%（55/116）;年龄分布为：6岁以下47.41%（55/116）,50岁以上22.41%（26/116）,19~49岁17.24%（20/116）,6~18岁12.93%（15/116）;科室分布为：儿科占45.69%（53/116）,重症监护病房（ICU）占28.45%（33/116）,移植科占9.48%（11/116）,肾内科占6.03%（7/116）,泌尿外科占3.45%（4/116）,神经内科占0.86%（1/116）。人苍白杆菌对青霉素和第1、2、3代头孢菌素类、氨曲南耐药性较高,对4代头孢菌素头孢吡肟的敏感性较高,对亚胺培南、环丙沙星100.0%敏感。结论人苍白杆菌对大多数β-内酰胺类抗菌药物耐药率较高,治疗应首选喹诺酮类、碳青霉烯类等抗菌药物。预防该菌的医院血流感染,应尽量减少不必要的侵入性操作,加强抗菌药物的合理规范使用。

231例血液感染人苍白杆菌临床分布及耐药性分析

目的调查血液感染人苍白杆菌的临床分布及耐药性,为抗菌药物的使用及感染的控制提供流行病学资料。方法回顾性分析广东省深圳市中医院及四川省内江市第一人民医院2011年1月~2013年12月住院及门诊就诊患者血液培养分离的人苍白杆菌的临床分布及对12种抗菌药物的耐药情况。结果分离出人苍白杆菌231株,主要集中在感染科、重症监护科、肿瘤科等;对哌拉西林、氨曲南、头孢唑啉、氨苄西林-舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦、头孢噻肟耐药率高,耐药率〉90%;对头孢吡肟、厄他培南、亚胺培南、庆大霉素、环丙沙星、美罗培南敏感性较好,耐药率〈10%。随时间的推移,其耐药率有逐年增高趋势。结论人苍白杆菌已成为血液感染的重要病原菌之一;持续、准确地监测其流行趋势及耐药情况对该菌感染的防治具有重要意义。

140例儿童人苍白杆菌败血症临床分布及耐药性分析

目的:调查儿童人苍白杆菌败血症的临床分布及耐药性,为临床抗菌药物的使用及感染控制提供依据。方法:对我院2013年1月至2014年10月败血症住院患儿血液培养分离出的140株人苍白杆菌的临床分布及其对12种抗菌药物的耐药情况进行回顾性分析。结果:分离出人苍白杆菌的140例败血症患儿年龄以29 d^5岁为主(83.6%),主要集中在重症监护科(30.7%)、呼吸内科(22.1%)、心血管内科(17.9%);患儿多伴有呼吸道症状(80.7%)及发热(68.6%)。人苍白杆菌对哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、氨曲南、头孢唑林、氨苄西林/舒巴坦、头孢噻肟耐药率较高,达90%以上,对头孢吡肟、厄它培南、亚胺培南、庆大霉素、环丙沙星、美罗培南敏感性较好,耐药率分别为9.3%、9.3%、3.6%、0.7%、0.7%、0。结论:人苍白杆菌可致儿童败血症,其耐药率较高;治疗可选用头孢吡肟、亚胺培南或美罗培南等敏感性较高的药物。

儿童血流感染苍白杆菌的鉴定和同源性分析

目的对儿童血液样本中分离的苍白杆菌进行菌种鉴定和同源性分析。方法收集经Vitek 2 Compact仪器鉴定的人苍白杆菌26株,用API微生物鉴定药敏分析系统及配套20非肠杆菌科细菌鉴定试条(20 NE)进行再鉴定,并用手工试验进行生化表型鉴定;PCR扩增16S rRNA基因、rec A基因并进行测序分析;采用Vitek 2 Compact及配套GN13卡进行药敏试验;采用脉冲场凝胶电泳进行同源性分析。结果 26株经仪器鉴定及手工生化鉴定均为人苍白杆菌。16S rRNA基因和rec A基因扩增产物测序分析,25株为解糖假苍白杆菌,1株为假贵格纳苍白杆菌。药敏分析显示以上26株菌株对氨曲南均耐药,对喹诺酮类、氨基糖苷类、复方磺胺甲噁唑、头孢菌素和哌拉西林/他唑巴坦的敏感率在80%以上。脉冲场凝胶电泳分析显示,该25株解糖精假苍白杆菌为高度同源菌株,仅有1~3条带的差异。结论结合生化表型、基因扩增和测序分析可以将苍白杆菌鉴定至种。检测菌株中解糖精假苍白杆菌高度同源,可能为一次聚集性感染。

苍白杆菌SY286抑菌活性蛋白稳定性分析

利用饱和硫酸铵沉淀法从苍白杆菌(Ochrobactrum sp.)SY286发酵滤液中提取抑菌活性蛋白,通过温度、酸碱度、紫外线以及蛋白酶对活性物质的影响,测定活性物质的稳定性。结果表明,经60%饱和硫酸铵溶液盐析出的活性蛋白对葡萄霜霉病菌的抑菌活性最强,抑制率达81.98%。温度、酸碱度以及紫外线对抑菌粗提蛋白的活性均有一定影响。抑菌粗提蛋白在50℃以下和pH 4~10条件下抑菌活性相对稳定。抑菌粗提蛋白的抑菌活性受蛋白酶的影响较大,蛋白酶K、胰蛋白酶、胃蛋白酶和木瓜蛋白酶均对其活性具有较大影响。

苍白杆菌SY286菌株纤维素酶基因的克隆与表达

由卵菌引起的植物病害大多难以控制,常因再侵染次数多,暴发流行而导致严重损失。卵菌细胞壁的主要成分为纤维素,因此具有产生纤维素酶能力的生防菌能够更好的用于防治卵菌门真菌引起的植物病害。SY286菌株对葡萄霜霉病菌具有较强抑制活性。纤维素酶活性检测试验结果显示,SY286菌株代谢产物中含纤维素酶,菌落周围透明带宽度达5.9mm。根据已报道的纤维素酶基因序列设计引物,经聚合酶链式反应(PCR)扩增得到了561bp纤维素酶基因相关片段,经Blast比对,该与内切β^(-1),4-葡聚糖酶基因序列相似性达99%,即为SY286基因的核心序列。根据此片段的序列设计特异性引物,通过交错式热不对称PCR(TailPCR)得到其上下游序列,经拼接获得完整的纤维素酶基因的开放阅读框(ORF)序列(命名为SY286基因)。该基因序列ORF长度为1494 bp,编码1个含497个氨基酸的蛋白质,预测其蛋白分子量为55.04k Da,理论等电点PI为8.12。经Blast比对,该序列与内切β^(-1),4-葡聚糖酶编码序列相似性达99%,确定SY286基因为内切β^(-1),4-葡聚糖酶基因。并利用SDS-PAGE电泳对该蛋白在E.coli BL21(DE3)中的表达结果进行了检测。经0.5mmol·L^(-1)的IPTG诱导下,重组菌在15℃、22℃、30℃和37℃条件下的表达产物均可在PAGE凝胶上出现特异性条带。经检测重组菌具有纤维素酶活性。试验结果为研究纤维素酶在植物病害生物防治中的应用,以及SY286菌株抑菌分子机理研究和菌株的遗传改良奠定了基础。

腹水中分离出多重耐药的人苍白杆菌1株

患者女，71岁。因腹痛14个月，腹胀3个月于2010年3月21日入住我院。入院查体：腹部膨隆，质硬，可见手术瘢痕，腹部留存胃管及腹腔引流管。急查血常规WBC11．82×10^9/L，RBC3．76×10^12/L，Hb110．0g／L，NEUT73．8％，LYMPH14．7％．MONO11．1％。尿常规：白细胞（＋），蛋白（＋＋），酮体（＋＋），可见透明管型。腹水常规：蛋白（＋＋），