GC-EI-MS同时分析食品中的苏丹Ⅰ和苏丹Ⅱ

将气相色谱-电子轰击离子源-质谱法(GC-EI-MS)应用于番茄沙司和辣椒酱中苏丹Ⅰ和苏丹Ⅱ添加剂的同时分析,并对两种化合物的EI-MS主要碎片离子的结构与断裂机理进行初步解析.分析方法的线性范围为24—800μg.kg-1,相关系数(R2)均大于0.993,相对标准偏差(RSD)均小于12.7%,样品的加标回收率为77.3%—106%,苏丹Ⅰ的方法检出限(LOQ)为7.8μg.kg-1,苏丹Ⅱ的LOQ为6.8μg.kg-1.

苏丹Ⅱ与血红蛋白相互作用的电化学研究

用循环伏安法研究了苏丹Ⅱ与牛血红蛋白(BHb)在碳纳米管(CNTs)修饰玻碳(GC)电极上的电化学行为,发现苏丹Ⅱ在CNTs修饰的GC(CNTs/GC)电极上能进行准可逆的电化学反应,式量电位E0′为55 mV.而在BHb/CNTs/GC电极上,苏丹Ⅱ电化学反应也是准可逆的,但E0′为70 mV,正移了15 mV,表明苏丹Ⅱ与BHb发生了相互作用.苏丹Ⅱ与BHb的相互作用还与溶液pH有关,在pH为4.5时,它们的相互作用最强.

食品中苏丹Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的UPLC-ESI-MS/MS测定研究

目的：建立超高效液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱快速测定食品中苏丹Ⅰ、苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ的方法。方法：采用超高效液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱仪,多离子反应监测（MRM）定量法,通过对试样净化预处理、色谱条件、质谱参数等的优化选择和方法回收率、精密度等的验证,建立了同步准确定量测定食品中苏丹Ⅰ、苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ的理想方法。结果：苏丹Ⅰ、苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ的最低检出限（LOD）分别为0.1、0.1、0.2、1.0μg/kg,在1.0-100.0 ng/ml的线性范围内,相关系数r均大于0.99,回收率在87.0%-109%。结论：采用液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱仪,可快速测定食品样品中痕量的苏丹Ⅰ、苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ,结果准确可靠,重复性好,灵敏度高。

气相色谱-质谱联用法测定调味品中苏丹红Ⅰ、Ⅱ色素

应用气相色谱-质谱联用方法的选择离子监测技术（GC-MS-SIM），测定了调味品辣椒粉和腌料中的苏丹红Ⅰ、Ⅱ色素。分别在0．58-18．9mg·L^-1及0．31-19．8mg·L^-1浓度范围内，方法具有良好的线性关系。样品的平均回收率为85．5％～95．4％（直接萃取法）及80．7％～88．1％（氧化铝柱净化法），RSD（n=5）为3．64％～7．14％。样品称量为5．0g时，苏丹红Ⅰ、Ⅱ的检出限分别为0．0058，0．0076mg·kg^-1。

同步荧光法同时测定苏丹红Ⅱ和苏丹红Ⅲ

A new method of constant-wavelength synchronous fluorescence spectrometry for simultaneous determination of Sudan Ⅱand Sudan Ⅲ was developed with using their fluorescence phenomenon.Only one single scan is needed for effective identification and quantitative determination of the two compounds simultaneously when Δλ=60 nm is chosen.The linear ranges for Sudan Ⅱ and Sudan Ⅲ were 0—3.3 and 0—2.8 μg/mL,respectively.The detection limits for Sudan Ⅱ and Sudan Ⅲ were 14 and 11 ng/mL,respectively.By using this method,Sudan Ⅱand Ⅲ in sausage samples were determined directly with the recoveries of 83.8%—109.5%.

高效毛细管电泳法同时分离测定苏丹红Ⅰ、Ⅱ号

目的采用高效毛细管电泳法(HPCE)同时分离及测定苏丹红Ⅰ和苏丹红Ⅱ。方法利用非涂层弹性融硅石英毛细管75μm(I.D.)×60cm为分离通道,优化选择检测波长、缓冲溶液种类、浓度及pH值、运行电压、进样浓度、进样时间等试验参数后进行分离测定。结果在最佳实验条件下:紫外检测波长297nm,30mmol/LTris(pH=9.5)缓冲溶液,分离电压15kV,进样时间20s,较好地实现了苏丹红Ⅰ和苏丹红Ⅱ的基线分离及检测。结论该法简便、快速、灵敏度高。

苏丹红Ⅱ与肌红蛋白相互作用的分子模拟与实验

用荧光光谱法研究了苏丹红Ⅱ与肌红蛋白(Mb)之间的相互作用。实验结果表明,二者结合位点数近似为1,结合常数K=3.84×107L/mol,有很强的相互作用。用分子柔性对接技术模拟确定了它们之间的作用位点、作用力类型及相互作用能。理论计算的结果表明,苏丹红Ⅱ和Mb相互作用的势能为-9 419.9 kJ/mol,静电能为-7 468.8 kJ/mol,范德华能为-1 951.0 kJ/mol。苏丹红Ⅱ与Mb中H is64残基形成氢键,苏丹红Ⅱ也能与疏水氨基酸残基,如能产生内源荧光的Phe33、Phe43、Phe106和Phe138等发生作用,这与苏丹红Ⅱ能使Mb荧光猝灭的实验结果一致。

铋膜电极测定辣椒制品中苏丹红Ⅱ的研究

用循环伏安法（CV）、线性扫描伏安法（LSV）研究了苏丹红Ⅱ在铋膜电极上的电化学行为。结果表明,在最佳条件下,BR缓冲溶液（pH=2）,无水乙醇作助溶剂（体积分数27.5%）,苏丹红Ⅱ在-0.50附近有一灵敏还原吸收峰。用线性扫描伏安法测定标准品,扫描速度为100 mV/s,浓度在7.49×10^-6-1.87×10^-5范围内和峰高呈线性关系。回归线方程：íp=1.722 2＋0.751 7c（×10^-3mmol/L）,r=0.994 8。检出限为3.74×10^-4mmol/L。据此建立了一种快速、简便测定苏丹红Ⅱ的方法。

液相色谱-质谱法测定辣椒制品中苏丹红(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)染料

目的：苏丹红是一种非生物合成着色剂，致癌性很强，它是应用于油彩、腊、地板腊和香皂等化工产品中的一种着色剂，它一般不溶于水易溶于有机溶剂。所以不允许掺入食品中调色。目前，一些生产厂家为达到盈利目的，违法掺入辣椒制品中。测定苏丹红的方法目前有国标法和欧盟法。国标法提取样品麻烦，欧盟法出峰时间太慢。本文在欧盟法的基础上做了进一步改进，建立用高效液相色谱电喷雾质谱（ESI—MSn）测定。方法：通过多级质谱和保留时间对样品进行确证。并用此方法对部分产品进行了调查。结果：以峰面积定量，苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ检出限均为0．10μg/ml。不同水平的加标回收率范围为苏丹红Ⅰ：92．3％～106．1％；苏丹红Ⅱ：91．2％～111．6％；苏丹红Ⅲ：96．1％-107．5％：苏丹红Ⅳ：91.7％～108．1％。结论：本方法具有提取样品简单、灵敏度高、选择性好、可重复性好等特点。

线性扫描极谱法测定辣椒粉中的苏丹红Ⅱ

以乙醇为辅助溶剂,在BR缓冲溶液(pH8.0)体系中,采用线性扫描极谱法研究苏丹红Ⅱ的极谱波,实验发现,苏丹红Ⅱ在Ep=-0.85V处产生了一个灵敏的还原峰。峰电流与苏丹红Ⅱ浓度在1×10-8～1.6×10-7mol/L范围内呈线性关系,相关系数r=0.9978,检出限为1.6×10-9mol/L。此法可用于辣椒粉中苏丹红Ⅱ的检测,结果满意。回收率在88.8%～103.2%。

苏丹红Ⅱ纯物质中有机杂质的定性和定量分析

本实验对苏丹红Ⅱ标准物质候选物中的主要有机杂质进行定性、定量分析,采用高效液相色谱-离子阱-飞行时间串联质谱法(HPLC-IT-TOF MS)和液相色谱-三重四极杆串联质谱法(HPLC-MS/MS)对有机杂质进行定性分析,鉴别出杂质1和杂质2分别为苏丹红Ⅰ和溶剂橙2,推导出杂质3和4的可能分子结构为苏丹红Ⅱ的同分异构体。利用液相色谱外标法测定苏丹红Ⅰ和溶剂橙2的含量分别为0.017%、0.258%,相对标准偏差分别为1.6%、2.5%;采用与主成分苏丹红Ⅱ响应因子一致的方法定量分析杂质3和4,其含量分别为0.012%、0.028%,相对标准偏差分别为7.0%、4.9%。本研究可为苏丹红Ⅱ一级标准物质的研制奠定基础,对苏丹红Ⅱ的准确测定具有重要意义。

苏丹红Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ的拉曼光谱研究

介绍了拉曼光谱法的基本原理和苏丹红的检测现状,利用拉曼光谱法对偶氮类染料苏丹红Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ进行了检测,分别得到了能表征三种物质毒性的特征拉曼频移,最长扫描时间仅为15s。实验表明,利用拉曼光谱法检测苏丹红Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ,迅速方便,有望成为苏丹红类物质的有效检测方法。

恒波长同步荧光淬灭法测定食品中苏丹红Ⅱ的研究

本文建立了恒波长同步荧光淬灭测定苏丹红Ⅱ的新方法。研究表明,苏丹红Ⅱ对硫酸奎宁的荧光有淬灭作用,通过Stern-Volmer方程的计算和紫外吸收光谱研究,得到苏丹红Ⅱ对硫酸奎宁荧光的淬灭机制主要为动态淬灭,且淬灭程度与苏丹红Ⅱ的含量呈线性关系。当Δλ=30 nm时,该方法的线性范围为1.0×10-6～5.0×10-4 mol/L,检出限为2.393×10-11mol/L。

高效液相色谱-离子阱质谱检测火锅底料中的苏丹染料Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ

目的：用高效液相色谱/离子阱质谱仪（HPLC/ION-TRAP-MS/MS）鉴定和检测火锅底料中苏丹染料Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ。方法：样品经正己烷提取,中性氧化铝柱净化,用正己烷洗去脂肪后,再用二氯甲烷洗下苏丹染料,经浓缩至干,用甲醇溶解并定容,用ZORBAX Eclipse ODS C18柱（150 mm×2.1 mm;5μm）分离,LC-ION-TRAP-MS检测。此方法能同时鉴定和检测苏丹Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ。将已用HPLC法测定过的20件可疑样品;8件已检出苏丹Ⅰ和苏丹Ⅳ的阳性样品;1件加有苏丹Ⅰ和苏丹Ⅳ的加标样用该方法检测。结果：可疑样中有5件检测出苏丹Ⅰ和Ⅳ;阳性样中有2件仅检出苏丹Ⅳ而无苏丹Ⅰ,其余6件同HPLC法的检测结果;加标样中检测出的苏丹染料品种和量与加入品种和量相符。该方法的最低检出限分别为8.8×10^-10g、4.3×10^-9g、1.03×10^-9g、3.35×10^-10g,方法回收率为85%～95%,相对标准偏差RSD为4.56%～5.62%。结论：该方法灵敏、准确。

苏丹红Ⅱ对小鼠血液的影响

为了探讨苏丹红Ⅱ对小鼠血液的影响,研究了不同剂量苏丹红II对小鼠的红细胞、白细胞、血红蛋白的毒性作用以及对凝血时间的影响。采用了腹腔注射(i.p)的方法染毒,每天注射1次,每次注射0.2ml,对照组注射溶剂0.2ml,连续注射15天,于染毒20d取小鼠血液,对小鼠红细胞、白细胞及血红蛋白进行计数,并测定凝血时间。对实验结果进行了t检验和相关性分析。结果表明:1)苏丹红Ⅱ可引起小鼠红细胞、血红蛋白数量的减少,且呈剂量-效应关系。2)苏丹红Ⅱ可使小鼠白细胞数、凝血时间随染毒剂量的增加而增加。由此推论,1)苏丹红Ⅱ对血小板可能有破坏作用,进而表现为凝血时间延长。2)苏丹红Ⅱ对小鼠红细胞、白细胞及血红蛋白有毒性作用。

HPLC法测定辣椒精油中苏丹红Ⅰ和苏丹红Ⅱ

采用1%冰醋酸水溶液、1%冰醋酸溶液、20%丙酮乙腈溶液分别进行梯度洗脱,测定苏丹红Ⅰ和苏丹红Ⅱ的含量。结果表明,苏丹红Ⅰ测定的线性范围为0～1.6μg/mL,线性相关系数为0.998 9,苏丹红Ⅱ测定的线性范围为0～1.6μg/mL,线性相关系数为0.994 7。苏丹红Ⅰ的加标回收率为89.38%,苏丹红Ⅱ的加标回收率为90.27%。该方法灵敏度高,结果准确且稳定。

高效液相色谱法测定食品中苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ含量

采用高效液相色谱条件在波长500nm下,以乙腈:水(95:5)为流动相,1.0mL/min流速,快速测定辣椒酱中的苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ含量,样品处理简便快捷,方法添加标准回收率分别是96.7%、95.4%、93.2%、95.1%。

固相萃取-气质联用测定辣椒油中苏丹红Ⅰ和苏丹红Ⅱ

研究了固相萃取-气质联用测定辣椒油中苏丹红Ⅰ和苏丹红Ⅱ的分析方法。用Strata-X小柱进行辣椒油样品的前处理,用气质联用法对苏丹红Ⅰ和苏丹红Ⅱ进行定性和定量分析。对苏丹红Ⅰ和苏丹红Ⅱ方法的检出限分别为0.5μg/L和0.7μg/L,平均回收率分别为93.8%和95.9%,RSD分别为2.7-6.9%和1.1-4.4%。

HPLC法测定指甲油中苏丹红Ⅱ·苏丹红Ⅳ的含量

[目的]建立高效液相色谱法测定指甲油中苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅳ含量的方法。[方法]采用HPLC法对指甲油中苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅳ进行含量测定。色谱条件为:C18柱(3.5μm,4.6 mm×150 mm),柱温30℃,流动相为乙腈-缓冲溶液梯度洗脱,流速1.0 ml/min,检测波长484 nm及514 nm切换。[结果]苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅳ色谱分离良好,浓度与峰面积呈良好线性关系,线性范围分别为苏丹红Ⅱ0～50.26μg/ml,r=0.999 8(n=6);苏丹红Ⅳ0～49.78μg/ml,r=0.999 9(n=6)。平均加样回收率分别为95.9%(n=9,RSD=2.87%)、87.7%(n=9,RSD=0.4%)。[结论]该方法测定了5批指甲油中苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅳ的含量,分离度好、快速、简便、重现性好。

薄层色谱定性示波极谱定量测定苏丹红(Ⅰ、Ⅱ)的方法研究

目的：建立食品和药品中苏丹红的示波极谱测定方法。方法：样品经过前处理除去干扰杂质后，用三氯甲烷溶解定容；在聚酰胺薄层板上点样，于甲醇-丙酮-乙酸（60：20：20，V／V）展开剂中层析分离，与标准物Rf值比较定性；分离物于7．38％乙酸钠和24．8％乙酸底液中极谱扫描定量测定苏丹红Ⅰ和苏丹红Ⅱ。结果：苏丹红Ⅰ和苏丹红Ⅱ均在0～90μg／10ml呈线性关系（r〉0．999），最低检出限0．2μg/ml；对辣椒粉、香辣酱和药品进行加标回收测定，苏丹红Ⅰ收回率95．2％～109．9％，苏丹红Ⅱ收回率92．5％～109．3％，相对标准差（n=6）小于5％，用该法和国家标准方法同时测定9件样品，测定结果经统计学分析，两法结果无显著性差异（苏丹红Ⅰ：t=0．704，P〉0．05；苏丹红Ⅱ：t=0．0318，P〉0．05）。结论：建立的方法操作简单，重现性好，灵敏度高，结果准确，适于基层单位应用。