微生物转化污泥制备苏云金杆菌生物杀虫剂

以城市污水处理厂的污泥为原料,探索了微生物转化污泥制备苏云金杆菌生物杀虫剂的可行性,并与常规培养基的发酵进程进行了对比.主要考察了苏云金杆菌的代谢特征、菌体形态与杀虫晶体蛋白产量.研究表明:无需任何预处理工序,污泥所含营养成分即可基本满足苏云金杆菌生长需求,且增殖较快,24h即可达活菌数与活芽孢数的最大值:9.48×108CFU.mL-1和8.51×108CFU.mL-1,比常规培养基提前12h,数量分别提高17%和21%;36h SEM表征显示,污泥中晶体与芽孢大部分游离,且晶体较大,呈规则的菱形,而常规培养基中苏云金杆菌的代谢进程相对滞后,且晶体较小;至发酵终点污泥中杀虫晶体蛋白含量为2.80 mg.mL-1,亦略高于常规培养基.采用污泥发酵制备苏云金杆菌生物杀虫剂大大降低了生产成本,且发酵性能优良,为污泥处置开辟了崭新途径.

利用玉米浸泡液制备苏云金杆菌生物杀虫剂

以玉米淀粉生产过程中的浸泡液作为原料培养基,在5L发酵罐中培养苏云金杆菌生物杀虫剂,并以常规黄豆粉培养基为对照,考察了苏云金杆菌在玉米浸泡液中的生长代谢状况(包括菌体形态、菌数增长与芽孢形成)以及48h发酵液的生物毒效.研究表明,无需添加其它成分及前处理,玉米浸泡液所含营养成分即可满足苏云金杆菌生长需求,其培养的总活菌数及芽孢数在27h可达最大值1.51×109CFU.mL-1和1.41×109CFU.mL-1,分别比常规培养基高出59%和85%,芽孢形成与晶体释放提前约9～12h;36h扫描电镜(SEM)观察表明,发酵36h浸泡液中大部分芽孢囊已经自溶,游离出卵圆形芽孢与菱形的晶体;而此时常规培养基正处于芽孢形成后期,只有极少数的游离晶体与芽孢;48h发酵终点的生物毒效结果显示,以浸泡液为培养基的苏云金杆菌发酵液毒效(891.51IU.μL-1)比常规培养基高89%.本试验为浸泡液的再利用提供了一条崭新的途径,同时降低了杀虫剂的生产成本.

玉米浸泡液制备苏云金杆菌生物杀虫剂的影响因素研究

以玉米淀粉生产过程中的浸泡液为培养基,摇瓶发酵培养苏云金杆菌生物杀虫剂,通过一系列单因子试验,考察了不同培养条件(种子液的种龄、接种量、浸泡液的含固率、初始pH值、摇床转速、发酵温度及发酵时间)对苏云金杆菌在玉米浸泡液中的生长(菌数增长与芽孢形成)以及发酵液的生物毒效的影响。研究表明,在最佳摇瓶培养条件(种子液种龄10 h,接种量2%,浸泡液含固量3%,初始pH值7.0～7.5,摇床转速200 r/min,发酵温度30℃)下发酵48 h,活菌数和活芽孢数分别可达到7.9×108CFU/mL和5.5×108CFU/mL,毒力效价为698.0 IU/μL。本试验可为生物农药的工业化生产提供实用参数。

双菌株发酵生产苏云金杆菌生物杀虫剂的研究

本文研究了苏云金杆菌双菌发酵生产生物杀虫剂的菌种和配方．大田实验表明，双菌株生物杀虫剂对棉铃虫的杀虫率高达９２％．

苏云金芽孢杆菌生物杀虫剂发酵生产的影响因素及其工艺选择

化学杀虫剂的长期使用给生态环境造成了严重破坏,也使害虫种群的抗药性日益提高,生物杀虫剂以其"绿色环保"的特点引起人们的广泛关注。其中,苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)制剂是目前世界上产量最大、应用最广的生物杀虫剂。它对鳞翅目、双翅目、鞘翅目、螨类等许多有害昆虫有毒杀作用,而对人类、动物和农作物无害。长期以来,人们一直致力于苏云金芽孢杆菌发酵过程的研究,以期获得高毒效的生物杀虫剂产品。本文首先对苏云金芽孢杆菌发酵生产的各种影响因素进行了综合分析,将影响因素分为培养条件和培养基组分两类,得出最佳培养条件为温度:(30±1)℃,pH:7.0±0.1,搅拌速度:400～600r·min-1,通气量:1∶0.6～1.2(发酵培养基体积与每分钟通入空气的体积之比),接种时间:对数期初;最佳培养基配比为碳氮比:8～10∶1,无机盐含量:KH2PO4或K2HPO4为0.075%～0.2%;MgSO4·7H2O为0.075%～0.3%;CaCO3为0.075%～0.15%;MnSO4·H2O、FeSO4·7H2O各为0.002%。其次,对当前研究与工业化生产中的各种发酵工艺进行了评述,总结了现有发酵工艺的优缺点。在现有研究基础上,降低培养基原料成本、改进发酵工艺和采用基因学手段构建高效工程菌株将成为未来研究热点。

微生物杀虫剂苏云金杆菌液体发酵技术的研究

采用不同固形物含量的发酵液，确定出苏云金杆菌发酵液的最佳碳氮比为１：２．５。不同固形物含量发酵液的试验证明，采用高固形物含量（９％）的发酵液在生产上可有效降低生产费用。应用造价低、便于维修、抵御感染能力强、节能省电的气升式发酵罐对Ｂ．ｔ进行发酵，发酵液不用浓缩其效价就达到国家行业标准（Ｈａ２２７５ＩＵ／μＬ），很适宜在实际生产上采用。

微生物杀虫剂——苏云金杆菌(Bt)

苏云金杆菌（B．t）是一种细菌杀虫剂，是由昆虫病原细菌苏云金杆菌（Bacillus thurgiensis）的发酵产物加工的制剂。此菌1911年因贝利纳（E．Berliner）发现于德国苏云金地区而得名，属芽孢杆菌，革兰氏染色阳性，横裂繁殖。

苏云金杆菌生物杀虫剂

该苏云金杆菌生物杀虫剂是苏云金杆菌与生物源杀虫剂的复配生物杀虫剂。其复配增效明显，杀虫谱扩大，成本降低，对多种鳞翅目害虫有极佳的防治效果；可用于防治菜蛾、菜青虫等多种蔬菜害虫。

苏云金芽孢杆菌杀蚊菌株的筛选及其生物学功能鉴定

研究筛选对骚扰阿蚊具有杀虫活性的苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)菌株,并鉴定这些菌株的生物学功能,丰富杀蚊菌株资源库.以145株Bt菌株为实验材料,采用生物活性测定、扫描电镜观察、产淀粉酶和产蛋白酶功能测定等方法,筛选对骚扰阿蚊3龄幼虫有毒杀活性的Bt菌株.初筛和复筛后,筛选出25株校正死亡率>60%的Bt杀蚊菌株,其中7株校正死亡率达100%.Gx0002898菌株的杀蚊活性最高,LC_(50)为4.729μg/mL.扫描电子显微镜观察发现大部分杀蚊菌株芽孢期产生大量圆形和菱形晶体.研究共筛选出24株产淀粉酶和35株产蛋白酶的菌株,其中6株既对骚扰阿蚊幼虫具高毒杀活性,又具产蛋白酶和产淀粉酶能力.研究筛选获得一些同时具有杀蚊活性及产蛋白酶和产淀粉酶可能对植物病害具有防治作用的Bt菌株,为开发新型微生物杀虫药肥提供优秀实验材料.

微生物杀虫剂苏云金芽孢杆菌(Bt)的研究现状及应用

苏云金杆菌又称苏云金芽胞杆菌,简称Bt。苏云金杆菌的发现,为人们利用微生物消灭植物病虫害提供了美好的前景。化学杀虫剂的长期使用对生态环境产生了严重的破坏,而害虫种群的抗药性也日益提高,因此生物杀虫剂因为其＂绿色环保＂的特点日益引起人们的广泛关注。现在,人们已经用发酵罐大规模地生产苏云金杆菌并制成粉剂或可湿剂、液剂,应用于农业,对100多种害虫有不同的致病和毒杀作用。

生物农药的发展与苏云金杆菌杀虫剂研究现状

在全球范围内,由于农业病虫害所造成的农产品损失每年达到15%～25%.大规模地使用化学农药是当前控制害虫的主要策略。

新型微生物杀虫剂——苏云金杆菌以色列变种

从流行病学观点看,消灭蚊媒疾病的主要环节是防蚊,灭蚊。自40年代起,有机氯,有机磷类等化学药物,已成为国内外灭蚊常用的杀虫剂,它具备效果好,速效,用量少等优点,但由于用量逐年增加,随之而来的抗药性的产生,环境污染,人畜中毒等问题也日渐严重。

苏云金杆菌预处理小菜蛾对有机磷和氨基甲酸酯杀虫剂的增效作用

研究了小菜蛾Plutellaxylostella幼虫经苏云金杆菌Bacillusthuringiensis预处理后 ,对有机磷和氨基甲酸酯杀虫剂敏感性的变化以及预处理对小菜蛾幼虫体内乙酰胆碱酯酶、羧酸酯酶、谷胱甘肽S 转移酶和谷胱甘肽的含量的影响。结果表明 :苏云金杆菌预处理抗性小菜蛾幼虫后 ,其对甲胺磷、水胺硫磷和克百威的敏感性分别为未处理组的 6 74、 8 83和 8 5 0倍 ;处理敏感小菜蛾幼虫后则分别为未处理组的 2 96、 1 6 9和 3 88倍。苏云金杆菌预处理抗性小菜蛾 ,未处理组乙酰胆碱酯酶的Km 和Vmax值分别为预处理组的 1 86和 1 5 6倍 ,所使用的 6种杀虫剂对乙酰胆碱酯酶的Ki值 ,处理组为未处理组的 1 80～ 2 6 6倍 ,苏云金杆菌预处理抗性小菜蛾对羧酸酯酶的Km、Ki 影响不大 ,但能显著地抑制羧酸酯酶和谷胱甘肽S 转移酶的活性并导致谷胱甘肽含量下降 (对照分别为处理的 2 0 2、 1 76和 1 6 6倍 )。苏云金杆菌预处理敏感小菜蛾 ,对乙酰胆碱酯酶的Km 、Vmax、Ki 值和羧酸酯酶的Km 、Ki 值以及谷胱甘肽含量影响不大 ,但能显著地抑制羧酸酯酶和谷胱甘肽S 转移酶的活性 (对照分别为处理的 1 5 4和 1 6 4倍 )。

杀鞘翅目苏云金芽孢杆菌新菌株及其杀虫剂的研究

从中国土壤中分离出２ 株杀鞘翅目昆虫的苏云金芽孢杆菌（ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）ＹＭ０３ 及ＳＨＱ１１１０ 。ＹＭ０３ 的血清型为Ｈ８ａ８ｂ ，ＳＨＱ１１１０ 的Ｈ 血清型未知。二菌株皆产近菱形的薄扁伴孢晶体，分别含６８ ～７０ｋＤ 和６５ｋＤ 的晶体蛋白质。毒力生物测定证明对柳蓝叶甲（ Ｐｌａｇｉｏｄｅｒａ ｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒａ） 及马铃薯甲虫（ Ｌｅｐｔｉｎｏｔａｒｓａ ｄｅｃｅｍｌｉｎｅａｔａ） 有高毒效。发酵性能良好。ＹＭ０３ 粉剂田间防治马铃薯甲虫有高效。稀释４００ 倍喷雾，防治效果达９４６ ％ 。

苏云金杆菌与化学杀虫剂的联合作用测定

采用生物测定方法 ,测定苏云金杆菌与沙蚕毒素、苯甲酰脲等 5类化学杀虫剂混用对小菜蛾的毒力。结果表明 ,Bt与抑太保、杀虫单复配具有明显增效作用 ,共毒系数为 2 4 9.5和 2 37.2 ;与氯氰菊酯和阿维菌素间表现为增效和相加作用 ;与敌百虫混配则表现为拮抗作用。与杀虫单不同比例混配联合作用效果不同 ,共毒系数为 155.6～ 186 .5。

生物农药苏云金芽孢杆菌的研究进展

苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis)制剂是目前应用广泛而有效的一种微生物杀虫剂.本文介绍了苏云金芽孢杆菌的菌种优选、发酵过程及剂型研究进展,具体阐述了发酵过程中培养基和发酵条件的优化、各种发酵方式和发酵设备等.指出了目前发酵生产苏云金芽孢杆菌中存在的问题,提出了解决问题的建议并展望了其发展前景.

化学杀虫剂对苏云金杆菌芽孢及伴胞晶体的影响

研究了 7种常用化学杀虫剂对苏云金杆菌芽孢及伴胞晶体的影响及作用 ,结果表明 ,常用浓度下 ,2 .5 %溴氰菊酯乳油、4 8%毒死蜱乳油对苏云金杆菌芽孢及伴胞晶体无影响 ,可与苏云金杆菌制剂事先做成混剂 ;4 .5 %高效氯氰菊酯乳油、2 .5 %高效氯氟氰菊酯乳油、2 0 %灭多威和 4 0 %辛硫磷在短时期内对芽孢及伴胞晶体无明显影响 ,可与苏云金杆菌制剂现混现用 ;80 %敌敌畏乳油(5 0 0倍稀释 )对苏云金杆菌伴胞晶体有明显损伤作用 。

NaCS-PDADMAC生物微胶囊对苏云金杆菌的生物相容性

介绍了一种由NaCS和PDADMAC通过界面反应而构成的新型生物微胶囊——NaCS-PDADMAC生物微胶囊.考察了NaCS、PDADMAC和NaCS-PDADMAC生物微胶囊对苏云金杆菌生长和耗糖的影响,进行了用NaCS-PDADMAC生物微胶囊固定化培养苏云金杆菌的研究,结果表明NaCS-PDADMAC生物微胶囊对微生物具有良好的生物相容性,可用于微生物的固定化培养.

苏云金芽孢杆菌的分类及生物活性蛋白基因

本文综合叙述了苏云金芽孢杆菌鞭毛抗原血清亚种的分类、生理生化鉴定,伴孢晶体对无脊椎动物4个门中的生物以及节肢动物门中9个目昆虫的生物活性,生物活性蛋白及其编码这些蛋白基因原定位和分类等方面的新动态。

苏云金芽孢杆菌cry基因在大肠杆菌中表达产物和生物活性

研究了几种Btcry基因于大肠杆菌 (Escherichiacoli)中表达产物在pH 10 0的 5 0mmol/L碳酸钠和 2 0mmol/L乙醇胺溶解液中的溶解性 ,发现同样的Cry蛋白在碳酸钠中的溶解度大于乙醇胺。通过胰蛋白酶消化 ,明确Cry1Ca7、Cry1Ia8酶解产物为 38kD多肽 ;Cry1Ie1、Cry1Cb2、Cry2Ab4酶解产物为 4 1kD多肽 ;Cry1Ac酶解产物为 6 0kD多肽。采用FPLC层析方法对 6种原毒素及其酶解后得到的毒素多肽进行了分离纯化 ,比较了原毒素和毒素的杀虫活性的差异。其结果表明 ,Cry1Ac的原毒素和毒素对棉铃虫初孵幼虫的校正死亡率均为 10 0 % ,Cry2Ab4的原毒素的毒力高于其酶解毒素。