苏云金芽孢杆菌杀蚊菌株的筛选及其生物学功能鉴定

研究筛选对骚扰阿蚊具有杀虫活性的苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)菌株,并鉴定这些菌株的生物学功能,丰富杀蚊菌株资源库.以145株Bt菌株为实验材料,采用生物活性测定、扫描电镜观察、产淀粉酶和产蛋白酶功能测定等方法,筛选对骚扰阿蚊3龄幼虫有毒杀活性的Bt菌株.初筛和复筛后,筛选出25株校正死亡率>60%的Bt杀蚊菌株,其中7株校正死亡率达100%.Gx0002898菌株的杀蚊活性最高,LC_(50)为4.729μg/mL.扫描电子显微镜观察发现大部分杀蚊菌株芽孢期产生大量圆形和菱形晶体.研究共筛选出24株产淀粉酶和35株产蛋白酶的菌株,其中6株既对骚扰阿蚊幼虫具高毒杀活性,又具产蛋白酶和产淀粉酶能力.研究筛选获得一些同时具有杀蚊活性及产蛋白酶和产淀粉酶可能对植物病害具有防治作用的Bt菌株,为开发新型微生物杀虫药肥提供优秀实验材料.

有机溶剂对苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)几丁质酶的影响

以苏云金芽孢杆菌(Bt)的发酵液为材料,经硫酸铵分级分离、DEAE-32离子交换柱层析分离,获得部分纯化的Bt几丁质酶(EC3. 2. 1. 14)制剂.研究了几种有机溶剂对Bt几丁质酶的影响.结果表明,甲醇、丙三醇、甲醛和戊二醛对几丁质酶有抑制作用;乙醇、丙醇、乙二醇和二甲亚砜在低浓度时对酶有激活作用,随着浓度的升高表现出抑制作用;二氧六环的浓度低于 5%时,对酶的影响不明显,而高于 5%时,对酶则有激活作用;丙酮对酶有激活作用. 图 1参

一株苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)的分离与鉴定

利用醋酸盐对苏云金芽孢杆菌芽孢萌发的选择性抑制特性 ,采用选择性培养基从土壤中分离苏云金芽孢杆菌 .对分离菌株的个体形态、生理生化特点进行了分类研究 ,确定该菌株即为苏云金杆菌 .采用改进的培养基培养伴胞晶体 ,证明该培养基可在

U(Ⅵ)在芽孢杆菌Bacillus sp.dwc-2上的矿化动力学研究

微生物诱导的U(Ⅵ)生物矿化会影响铀在环境中的化学形态和迁移行为,但目前对于生长和繁殖阶段的微生物诱导U(Ⅵ)矿化的动力学行为研究不多,相关的机制也不明确。本文从某拟用作极低放射性废物处置场场所的土壤中分离出1株芽孢杆菌Bacillus sp.dwc-2,考察了pH值、甘油磷酸钠(SGP)、U(Ⅵ)初始浓度等因素对Bacillus sp.dwc-2在生长繁殖过程中诱导U(Ⅵ)矿化动力学行为的影响,并对其矿化机制进行了探讨。结果表明,Bacillus sp.dwc-2可诱导U(Ⅵ)形成钠铀云母(NaUO_(2)PO_(4)·3H_(2)O)的晶体矿物,该过程作为一种酶促反应,受pH值、SGP浓度、U(Ⅵ)初始浓度等因素的显著影响;当U(Ⅵ)初始浓度从50 mg/L增加至150 mg/L时,刺激了处于生长迟滞期至对数期(培养0~12 h)菌体磷酸酶活性的表达和磷酸盐的代谢,使其诱导U(Ⅵ)的矿化行为发生在生长对数期(培养12 h);SGP浓度的增加促进了磷酸酶的催化反应速率,进而促进了U(Ⅵ)的矿化,当SGP的浓度从25 mmol/L增加到125 mmol/L时,Bacillus sp.dwc-2诱导U(Ⅵ)的矿化时间从其生长稳定期(培养24 h)提前至生长对数期(培养12 h);中性和碱性条件下,磷酸酶活性在生长迟滞期至对数期(培养0~12 h)快速增加,从而促进了磷酸盐的消耗和U(Ⅵ)的矿化,特别是在碱性条件下,沉积物在生长对数期(培养8 h)时即转化为明显的晶体矿物。

苏云金芽孢杆菌Bacillus thuringiensis LSZ9408菌株发酵特性的研究

本文研究了苏云金芽孢杆菌 LSZ94 0 8菌株的发酵特性 ,2 4 h菌体浓度达最大 ,2 8- 40 h菌体浓度稳定 ,4 0 h后菌体浓度下降 ,发酵液 p H值先降后升 ,最高达 p H7.8,2 0 h达到碳氮源利用高峰 ,2 8h后氮含量回升 ,糖含量基本不变。

苏云金芽孢杆菌对二化螟致病力及与助剂协同作用研究

二化螟[Chilo suppressalis(Walker)]作为水稻害虫,严重威胁我国水稻生产安全,为提高苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)对二化螟杀虫效果,采用生物测定法研究Bt对二化螟致病力及与助剂协同作用。结果表明,8株Bt菌株对二化螟致病力不同,菌株Bt64致病力最高,对1~4龄幼虫致死中浓度LC50分别为4.81×10^(5)、2.09×10^(5)、2.89×10^(6)、3.73×10^(7)芽孢·mL^(-1),对1~2龄幼虫杀虫活性显著高于3~4龄。室外条件下,菌株Bt645×10^(8)芽孢·mL^(-1)浓度对二化螟3龄初幼虫第7天防治效果达67.35%,显著高于对照商品Bt制剂防治效果;激健、八神、有机硅3种助剂与菌株Bt64混用对二化螟幼虫杀虫效果均高于菌株Bt64单用,协同增效作用表现为激健>八神>有机硅,助剂激健对菌株Bt64协同增效作用最好。室外条件下,提高菌株Bt64对二化螟防治效果达12%以上。研究结果对Bt生物农药开发和利用、提高田间Bt防治二化螟杀虫效果和减少化学农药使用量具有重要意义。

传统发酵食品臭鳜鱼中分离的苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis 29.118)的毒理学评价（英文）

参与臭鳜鱼特色风味物质形成的微生物菌群源自环境,该微生物菌群的安全性正引起消费者和社会的关注。苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis 29.118)是从臭鳜鱼发酵菌群中分离的一种主要微生物,但其毒性仍不清楚。通过急性经口毒性、遗传毒性实验、30 d喂养以及结肠显微观察评估其毒性。结果表明:小鼠口服半数致死量大于4 000 mg/kg mb,剂量2 000 mg/kg mb未引起急性毒性症状,苏云金芽孢杆菌29.118对小鼠没有明显的遗传毒性症状;30日粮后小鼠生长良好;7项血清指标和3项肝指标均无显著差异(P>0.05);结肠和肝脏组织没有表现出明显的病理症状。实验采用的苏云金芽孢杆菌29.118的剂量远高于现实存在的剂量,因此,菌株苏云金芽孢杆菌29.118在毒理学上是安全的。

地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)对Cr^(6+)的吸附动力学研究

从污染土壤中分离出地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis),利用其死菌体对Cr6+溶液进行吸附动力学研究.在Ci=300mg/L、pH=2.5和θ=50℃条件下,吸附120min获得最大吸附量60.5mg/g.应用Langmuir和Freundlich吸附等温线研究,结果表明,Langmuir吸附等温线更为适合.动力学研究显示,地衣芽孢杆菌对Cr6+的吸附动力学可以用拟二级速度方程进行描叙.

贝莱斯芽孢杆菌TMQ-KSL-1分离鉴定及其发酵液对番茄根结线虫的生防作用

镰刀菌(Fusarium spp.)和根结线虫(Meloidogyne spp.)都是植物的重要病原物,这两种病原物在寄主植物中存在着非常复杂的互作关系,可导致严重的植物土传病害。为探寻对番茄根结线虫病害具有高效防治作用的优良菌株,本研究以禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)为靶标病菌,采用平板稀释涂布法从多年种植番茄的设施大棚土壤中分离和筛选到一株抑菌效果较好的生防细菌菌株TMQ-KSL-1,根据形态特征、生理生化特性和16S rRNA基因测序对该菌株进行鉴定;测定不同浓度的发酵液及发酵上清液对根结线虫卵孵化率以及根结线虫二龄幼虫死亡率的影响,通过盆栽实验分析其发酵液对根结线虫病害的防治效果。结果表明,菌株TMQ-KSL-1具有较强的杀线虫活性,其发酵液和发酵上清液处理48 h线虫卵孵化抑制率分别为94.76%和90.72%;处理24 h番茄根结线虫二龄幼虫的校正死亡率分别为100%和97.37%;菌株TMQ-KSL-1发酵液100倍稀释液、200倍稀释液对番茄根结线虫病害防治效果分别为59.54%和12.14%,且100倍液处理防效与阿维菌素500倍液处理防效(61.56%)相当;地下鲜重分别提高了90.95%、19.65%。因此,菌株TMQ-KSL-1具有防控番茄根结线虫病害的能力,具有市场开发应用前景。

蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)污染及其对食品安全的影响

蜡状芽孢杆菌是常见的食品污染菌,在工业化社会中正成为日益重要的食物病原菌。它能产生一种呕吐毒素和多种肠毒素,主要引发呕吐和腹泻型食物中毒。与蜡状芽孢杆菌同属的苏云金杆菌也能产生类似的肠毒素,近来发现它可能与食品中毒有关。我国应当加强对蜡状芽孢杆菌的监测和研究。

转枯草芽孢杆菌纤溶酶(Bacillus subtilis fibrinolytic enzyme,BSFE)基因对烟草生长发育的影响

将枯草芽孢杆菌纤溶酶(Bacillussubtilisfibrinolyticenzyme,BSFE)基因及其信号肽序列转入烟草,转基因烟草表现出不同于野生型烟草的生长特性,如营养器官生长速率下降、叶片数目减少、叶片狭长、叶片宽度/叶片长度值降低以及植株矮小、节间缩短等。推测其与外源BSFE的蛋白水解活性有关。

苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和中华甲虫蒲螨对冷杉梢斑螟的杀虫作用

为阐明苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种(Bacillus thuringiensis subsp.Aizawai Bonnefoi et de Barjac)和中华甲虫蒲螨(Pyemotes zhonghuajia Yu,Zhang and He)分别对冷杉梢斑螟(Dioryctria abietella)老熟幼虫的杀虫效果及对酶活性的影响,以冷杉梢斑螟老熟幼虫为研究对象,分别采用不同菌浓度苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种浸泡的饲料饲喂冷杉梢斑螟老熟幼虫,和接入不同数量中华甲虫蒲螨到冷杉梢斑螟老熟幼虫上,测定两者分别对梢斑螟死亡率以及相应酶活性影响。结果表明:苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种作用于冷杉梢斑螟致死率高达100%,致死中浓度为6584.065菌落/mL。冷杉梢斑螟老熟幼虫在取食不同菌浓度苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种后,对解毒酶乙酰胆碱酯酶、谷胱甘肽-S-转移酶均有激活作用;对羧酸酯酶有抑制作用;过氧化氢酶和过氧化物酶随苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种菌浓度的升高以及作用时间的延长,表现出逐渐抑制的作用。中华甲虫蒲螨寄生冷杉梢斑螟,致死率高达90%,半数致死数量为27.454头。中华甲虫蒲螨处理对乙酰胆碱酯酶、谷胱甘肽-S-转移酶均有激活作用;虫螨数量比为1∶20、1∶30、1∶40、1∶50时,冷杉梢斑螟幼虫过氧化氢酶表现出抑制-激活-抑制的作用,虫螨数量比为1∶60时,表现为全部抑制作用;对羧酸酯酶和过氧化物酶多表现出抑制作用,虫螨数量比为1∶20、1∶30时,表现出抑制-激活的作用,虫螨数量比为1∶40、1∶50、1∶60时,表现出抑制的作用。苏云金芽孢杆菌鲇泽亚种和中华甲虫蒲螨主要通过释放毒素来扰乱冷杉梢斑螟老熟幼虫保护解毒酶系动态平衡,干扰幼虫的正常生理代谢,从而起到毒杀冷杉梢斑螟老熟幼虫的作用。

苏云金芽孢杆菌在害虫防治领域的应用进展

农业害虫传统防治方法是采用化学杀虫剂,具有成本低、杀虫效果好等优点,但也存在环境污染、农药残留及害虫抗性增加等缺点,因此采用新型、有效的害虫防治手段来替代化学杀虫剂很有必要。苏云金芽孢杆菌是近年来研究最多、应用最广的生物杀虫剂,其安全性高、低毒,防虫效果好,在农作物抗虫特性改良、害虫防治领域表现出非常大的潜力。阐述了苏云金芽孢杆菌的特点、杀虫机制和应用方式,以期为未来新型害虫防治策略的构建与发展提供线索。

一种荧光碳点R-CDs对炭疽芽孢杆菌标志物的响应检测

采用简单的水解法制备荧光探针R-CDs,高灵敏、可视化地现场检测炭疽芽孢杆菌(Bacillus anthracis)孢子标志物,探索一种荧光碳点R-CDs对炭疽芽孢杆菌标志物的响应检测方法。结果显示,该方法可以保持较好的线性关系,线性相关系数r为0.995 4和0.994 9;利用3σ/k计算方法的检出限(LOD)为48.40 nmol/L。建立了一套操作简便、切实可行的炭疽快速检测技术,能够及时发现问题,有效提高国家进出口制品安全质量,保障人民身体健康,同时具有功能多样化、高效化、应用广泛化等优点,该技术成果转化性强,应用价值和利润值较高,市场推广前景广阔。

饲料中添加地衣芽孢杆菌对鲤鱼生长性能的影响

该试验旨在研究鲤(Cyprinus carpio)的饲料中添加不同水平的地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)对其生长性能的影响,确定鲤养殖中最适地衣芽孢杆菌添加水平。试验选择480尾体重相近的鲤随机分成4个处理组,每组4个重复,每个重复30尾。各组鲤依次投喂含有0%、0.1%、0.2%和0.4%地衣芽孢杆菌的饲料。驯养2周,进行60 d的正式试验。试验结束测定各组鲤的生长性能。结果显示,与对照组比较,试验组投喂含0.2%和0.4%地衣芽孢杆菌的饲料,可以显著提高其试验末重、增重率,显著降低了饲料系数(P<0.05);投喂含有0.1%、0.2%和0.4%地衣芽孢杆菌的饲料,可以显著提高特定生长率(P<0.05);投喂含有0.2%地衣芽孢杆菌的饲料可以显著提高蛋白质效率(P<0.05)。研究结果表明,在鲤的养殖中添加适量的地衣芽孢杆菌可以明显改善其生长性能,且地衣芽孢杆菌的最适添加量为0.2%。

不同水平枯草芽孢杆菌对南美白对虾免疫力的影响

为探讨不同水平的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)对南美白对虾(Litopenaeus vannamei)机体非特异性免疫力的影响,该试验选择600尾体重约为0.45g健康的南美白对虾,按照单因素试验设计,分成4个组,每组3个重复,每个重复50尾南美白对虾。各组分别投喂含有0%(对照组)、0.5%、1.0%和1.5%的枯草芽孢杆菌的基础饲料。投喂8周后,采集血液,检测血清非特异性免疫指标。结果显示,与对照组比较,试验2组的南美白对虾血清中溶菌酶、碱性磷酸酶、酸性磷酸酶、酚氧化物酶活性显著提高(P<0.05),试验2组和试验3组南美白对虾血清中过氧化氢酶和超氧化物歧化酶活性显著提高(P<0.05)。研究表明,在南美白对虾养殖生产中添加一定剂量的枯草芽孢杆菌可以提高机体的非特异性免疫力,且适宜添加量为1.0%。

枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)降解萘的动力学研究

枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)HBS-4是从油田中分离出来的一株能高效降解有机物萘的菌株。当萘的初始浓度为100mg时,该菌株在pH为8.0,温度为40℃下具有较好的降解效果,作用69h能降解50%以上的萘。通过HBS-4菌株降解萘的动力学研究,在Williams结构模型的基础上建立了HBS-4作用萘的四组分动力学模型,并用此模型解释菌株HBS-4在降解萘的过程中,葡萄糖含量、菌液浓度、pH、Eh随时间的变化特征。

巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)产聚乳酸降解酶条件的研究

巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)具有降解聚乳酸的能力。对该菌的产PLA降解酶的发酵条件进行优化,发酵产聚乳酸降解酶的最佳条件为:产酶诱导物为酵母粉,培养时间为36h,培养基初始p H为8.0,发酵温度为40℃,摇床转速为175r·min-1,接种量为5%(V/V)。

苏云金芽孢杆菌BT蛋白动物安全性试验

目的:明确高剂量条件下苏云金芽孢杆菌发酵液中BT蛋白对哺乳动物的生物安全性。方法:健康小鼠随机分为4组,每组10只;实验组分别按0.2 mL/kg、0.6 mL/kg、1.0 mL/kg灌服Bt发酵上清液,每天一次,连续给药7天;空白对照组正常饲养,不灌胃。结果:实验组与对照组血常规、血液生化分析等检测数据差异不显著;灌胃后解剖小鼠,无明显可见的病理变化;取心、肝、脾、肺、肾做组织切片,通过显微镜观测仍未见病理变化。结论:小鼠能够耐受高剂量苏云金芽孢杆菌发酵液中的BT蛋白。

与苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白类似的源自蕨类植物的新杀虫蛋白

鳞翅目昆虫危害全球农作物生产。在农作物中引入编码苏云金芽孢杆菌(Bt)杀虫蛋白的转基因技术可以增强对作物的保护,使其免受鳞翅目昆虫幼虫为害。对Bt蛋白广泛的田间进化抗性的担忧凸显了对具有不同作用机制或作用位点的新的杀虫蛋白的迫切需要。澳大利亚乐卓博大学的研究人员从蕨类植物中发现了一个新的杀虫蛋白家族。