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苏云金芽孢杆菌“94001”菌株发酵工艺的优化 被引量:3
1
作者 陈在佴 吴继星 《湖北农业科学》 北大核心 2006年第3期325-326,共2页
苏云金芽孢杆菌“94001”菌株最佳发酵工艺条件是通气量10∶.5~1.2V.V-1.min-1,培养温度34℃,搅拌速度250r.min-1。经40m3发酵罐发酵试验,平均发酵效价为6484IU.μL-1,平均晶体蛋白含量为0.61%。
关键词 苏云金芽孢杆菌“94001” 正交设计 发酵水平
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1例早产儿苏云金芽孢杆菌所致颅内感染的药学服务实践与文献回顾
2
作者 崔桂琴 王颖 邓后亮 《儿科药学杂志》 CAS 2024年第10期31-34,共4页
目的:分析临床药师参与早产儿苏云金芽孢杆菌所致颅内感染治疗的药学实践过程,为临床抗感染治疗提供参考。方法:临床药师参与1例早产儿颅内苏云金芽孢杆菌感染的抗感染治疗,并对苏云金芽孢杆菌的流行病学、药物治疗进行文献回顾分析。结... 目的:分析临床药师参与早产儿苏云金芽孢杆菌所致颅内感染治疗的药学实践过程,为临床抗感染治疗提供参考。方法:临床药师参与1例早产儿颅内苏云金芽孢杆菌感染的抗感染治疗,并对苏云金芽孢杆菌的流行病学、药物治疗进行文献回顾分析。结果:临床药师协助医师制定了万古霉素+阿米卡星的抗感染方案,患儿感染情况得到有效控制。结论:临床药师在整个治疗过程中充分运用药学知识,协助临床医师制定了有效治疗方案,并对患儿实施药学监护,有利于合理、安全地使用药物,体现了药学服务的价值。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 早产儿 颅内感染 药学实践
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苏云金芽孢杆菌杀蚊菌株的筛选及其生物学功能鉴定
3
作者 杨天宝 覃思忆 +3 位作者 王昊 周玉荧 姜明国 周燕 《云南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期569-576,共8页
研究筛选对骚扰阿蚊具有杀虫活性的苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)菌株,并鉴定这些菌株的生物学功能,丰富杀蚊菌株资源库.以145株Bt菌株为实验材料,采用生物活性测定、扫描电镜观察、产淀粉酶和产蛋白酶功能测定等方法,筛... 研究筛选对骚扰阿蚊具有杀虫活性的苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)菌株,并鉴定这些菌株的生物学功能,丰富杀蚊菌株资源库.以145株Bt菌株为实验材料,采用生物活性测定、扫描电镜观察、产淀粉酶和产蛋白酶功能测定等方法,筛选对骚扰阿蚊3龄幼虫有毒杀活性的Bt菌株.初筛和复筛后,筛选出25株校正死亡率>60%的Bt杀蚊菌株,其中7株校正死亡率达100%.Gx0002898菌株的杀蚊活性最高,LC_(50)为4.729μg/mL.扫描电子显微镜观察发现大部分杀蚊菌株芽孢期产生大量圆形和菱形晶体.研究共筛选出24株产淀粉酶和35株产蛋白酶的菌株,其中6株既对骚扰阿蚊幼虫具高毒杀活性,又具产蛋白酶和产淀粉酶能力.研究筛选获得一些同时具有杀蚊活性及产蛋白酶和产淀粉酶可能对植物病害具有防治作用的Bt菌株,为开发新型微生物杀虫药肥提供优秀实验材料. 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 杀蚊菌株 骚扰阿蚊 生物学功能
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苏云金芽孢杆菌(Bt)晶体毒蛋白基因在烟草叶绿体中的表达 被引量:27
4
作者 张中林 任延国 +5 位作者 沈燕新 山松 范国昌 吴祥甫 钱凯先 沈桂芳 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2000年第3期270-277,共8页
将全长3.5kb的Bt基因3'端缺失,得到长为2.1kb、1.8kb的基因。分别将这3个长度 (1.8kb2.1kb、3.5kb)的基因置于水稻叶绿体psbA基因的启动于和终止子调控之下,并与选择 标记基因aadA... 将全长3.5kb的Bt基因3'端缺失,得到长为2.1kb、1.8kb的基因。分别将这3个长度 (1.8kb2.1kb、3.5kb)的基因置于水稻叶绿体psbA基因的启动于和终止子调控之下,并与选择 标记基因aadA(编码氨基糖苷-3'-腺苷酸转移酶,具壮观霉素抗性)表达盒相连5以烟草叶绿 体基因trnH-psbA-trnK为同源片段,构建成叶绿体转化载体pBT3、pBT8和pBT22。用基因枪 把Bt基因导入烟草叶绿体中,以壮观霉素筛选,获得转化再生植株。经Southern、Western检测 分析证明Bt基因已整合进入烟草叶绿体基因组中并得到表达。且子代呈现壮观霉素抗性,即 外源基因得到稳定的遗传。利用转基因植株叶片对棉铃虫进行杀虫实验,有些转化植株表现 出较强的抗虫性。总体上来说,转Bt全长基因的烟草植株,其杀虫效果最好,其余两种差异不 大。首次报道将Bt基因成功转入高等植物叶绿体并获得表达。 展开更多
关键词 BT基因 叶绿体 烟草 表达 苏云金芽孢杆菌
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我国森林土壤中苏云金芽孢杆菌生态分布的研究 被引量:16
5
作者 戴莲韵 王学聘 +1 位作者 杨光滢 张万儒 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第6期449-456,共8页
从我国8个森林立地带(寒温带、中温带、暖温带、北亚热带、中亚热带、南亚热带、高原亚热带、热带)所属的13个自然保护区,采集了0—5cm土层林下土壤样品384个.测定了土壤pH、水分和养分.从中分离观察芽孢杆菌菌落1873个,分离出苏云金芽... 从我国8个森林立地带(寒温带、中温带、暖温带、北亚热带、中亚热带、南亚热带、高原亚热带、热带)所属的13个自然保护区,采集了0—5cm土层林下土壤样品384个.测定了土壤pH、水分和养分.从中分离观察芽孢杆菌菌落1873个,分离出苏云金芽孢杆菌79株,并对其所属亚种进行了初步鉴定.其平均出土率和分离率分别为14.32%和4.21%.研究了芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌在森林土壤中生态分布的规律及苏云金芽孢杆菌对6种昆虫的室内毒力测定,从中筛选出不少的高效菌株.为研究苏云金芽孢杆菌在我国森林生态系中资源的保护、开发和利用,具有重要意义. 展开更多
关键词 芽孢杆菌 苏云金芽孢杆菌 生态分布 森林土壤
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不同来源的苏云金芽孢杆菌aiiA基因表达及其抗病性分析 被引量:17
6
作者 杨梅 姚帆 +5 位作者 黄勤清 黄天培 周志宏 关夏玉 黄志鹏 关雄 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期373-381,共9页
苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)aiiA基因所编码的AiiA蛋白是一种内酯酶,可以降解N-乙酰高丝氨酸内酯(N-acyl-homoserine lactones,AHLs),从而减弱致病菌产生的危害.本研究克隆了6株不同来源的苏云金芽孢杆菌aiiA基因,并对... 苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)aiiA基因所编码的AiiA蛋白是一种内酯酶,可以降解N-乙酰高丝氨酸内酯(N-acyl-homoserine lactones,AHLs),从而减弱致病菌产生的危害.本研究克隆了6株不同来源的苏云金芽孢杆菌aiiA基因,并对来自于苔藓(LLB15)和土壤(LLS9)的BtaiiA基因进行了生物信息学分析.结果表明,AiiA-B15分子量为27.97×103,等电点为4.59;AiiA-S9分子量为28.14×103,等电点为4.32,两者都是亲水性蛋白.AiiA蛋白具有很高的保守性,AiiA-B15和AiiA-S9同源性为90%.进化树结果表明,AiiA-B15与Bacillus thuringiensis subsp.kyushuensis进化距离最近,AiiA-S9与Bacillus cereus进化距离最近.将aiiA-B15基因克隆到pGEX-4T-3表达载体中,构建重组质粒pGEXaiiA-B15,IPTG诱导后可大量表达融合蛋白.对表达的条件进行优化.结果表明,0.6mmol/LIPTG,30℃下诱导3h为最佳诱导条件.致病性检测表明,该融合蛋白对胡萝卜欧文氏软腐病菌具有较强的抗病作用. 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 AIIA基因 空间结构 融合表达
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对小地老虎具有杀虫毒力的苏云金芽孢杆菌菌株的分离及鉴定 被引量:20
7
作者 束长龙 谷少华 +5 位作者 窦黎明 陆琼 张杰 张永军 赵虎基 宋福平 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期41-44,共4页
从我国3种典型植被覆盖的6个地区的土壤样品分离得到了348株苏云金芽孢杆菌菌株,采用杀虫活性测定方法从中获得了32株对小地老虎具有高毒力的菌株。利用PCR-RFLP鉴定体系和SDS-PAGE蛋白分析法,研究了这32株苏云金芽孢杆菌的杀虫晶体蛋... 从我国3种典型植被覆盖的6个地区的土壤样品分离得到了348株苏云金芽孢杆菌菌株,采用杀虫活性测定方法从中获得了32株对小地老虎具有高毒力的菌株。利用PCR-RFLP鉴定体系和SDS-PAGE蛋白分析法,研究了这32株苏云金芽孢杆菌的杀虫晶体蛋白基因类型和晶体蛋白表达情况,对小菜蛾、二化螟、棉铃虫的杀虫活性测定也证明了苏云金芽孢杆菌cry基因类型、表达蛋白及杀虫活性间的相关性。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 PCR-RFLP 小地老虎 棉铃虫
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电脉冲穿孔法将苏云金杆菌δ-内毒素基因导入野生型芽孢杆菌 被引量:15
8
作者 孙良武 梁平彦 +4 位作者 田颖川 莽克强 巴峰 计平生 梅汝鸿 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第1期1-6,共6页
利用电脉冲穿孔法将带有苏云金杆菌毒蛋白基因的穿梭质粒导入几株野生型芽孢杆菌中,它们是野生型的蜡状芽孢杆菌、短芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌。通过观察在新霉素和氨苄青霉素平板上长出的抗性菌落数,计算出转化效率为10^1-10^... 利用电脉冲穿孔法将带有苏云金杆菌毒蛋白基因的穿梭质粒导入几株野生型芽孢杆菌中,它们是野生型的蜡状芽孢杆菌、短芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌。通过观察在新霉素和氨苄青霉素平板上长出的抗性菌落数,计算出转化效率为10^1-10^4转化子/μgDNA.从转化子中分离到的质粒DNA大小及其用HindⅢ酶切的片段与原始质粒DNA相同,毒性测试表明重组转化子对烟青虫六天的致死率达90-100%。 展开更多
关键词 电穿孔转化 芽孢杆菌 苏云金杆菌
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杀鞘翅目苏云金芽孢杆菌新菌株及其杀虫剂的研究 被引量:19
9
作者 高梅影 李荣森 +2 位作者 戴顺英 李小刚 傅建红 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期515-520,共6页
从中国土壤中分离出2 株杀鞘翅目昆虫的苏云金芽孢杆菌( Bacillus thuringiensis)YM03 及SHQ1110 。YM03 的血清型为H8a8b ,SHQ1110 的H 血清型未知。二菌株皆产近菱形... 从中国土壤中分离出2 株杀鞘翅目昆虫的苏云金芽孢杆菌( Bacillus thuringiensis)YM03 及SHQ1110 。YM03 的血清型为H8a8b ,SHQ1110 的H 血清型未知。二菌株皆产近菱形的薄扁伴孢晶体,分别含68 ~70kD 和65kD 的晶体蛋白质。毒力生物测定证明对柳蓝叶甲( Plagiodera versicolora) 及马铃薯甲虫( Leptinotarsa decemlineata) 有高毒效。发酵性能良好。YM03 粉剂田间防治马铃薯甲虫有高效。稀释400 倍喷雾,防治效果达946 % 。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 鞘翅目 伴孢晶体 杀虫剂 分离
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产细菌素苏云金芽孢杆菌的鉴定及其所产抗菌物质性质 被引量:13
10
作者 李云 杨胜远 +3 位作者 林晓东 钟瑜红 苏婷 刘湘嘉 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第11期147-152,共6页
从腌制蔬菜表面分离到一株产细菌素的菌株K2,其中和后的无细胞发酵液主要抑制革兰氏阳性细菌,特别是对芽孢杆菌有强烈的抑制作用。发酵上清液经硫酸铵盐析和透析后,仍然有很强的抗菌活性,并对多种蛋白酶敏感,表明抗菌活性物质为蛋白类... 从腌制蔬菜表面分离到一株产细菌素的菌株K2,其中和后的无细胞发酵液主要抑制革兰氏阳性细菌,特别是对芽孢杆菌有强烈的抑制作用。发酵上清液经硫酸铵盐析和透析后,仍然有很强的抗菌活性,并对多种蛋白酶敏感,表明抗菌活性物质为蛋白类物质。通过形态培养特征、生理生化特征、16S rDNA序列比对及系统发育分析,鉴定菌株K2是苏云金芽孢杆菌(Bacillus thurin giensis)。菌株K2产生的抗菌物质在pH6~9条件下80℃处理30min仍保持稳定的抗菌活性,其对敏感菌的作用主要是杀菌,而且对芽孢萌发有很好的抑制作用。该抗菌物质在菌体生长对数中期产生,在稳定期中期抗菌活性达到最大。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 细菌素 鉴定 抗菌物质
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苏云金芽孢杆菌B-Pr-88菌株中cry2Ab4基因的表达和杀虫活性研究 被引量:18
11
作者 李长友 张杰 +3 位作者 宋福平 韩岚岚 李国勋 黄大昉 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期634-638,共5页
以我室自行分离的对鳞翅目夜蛾科害虫具有高毒力的Bt菌株B-Pr-88为材料,用PCR-RFLP方法从其质粒DNA文库中筛选到含cry2Ab基因的一个阳性克隆pZF858,序列测定发现,该片段含有cry2Ab全长基因,开放读码框为1902bps,编码由633个氨基酸组成的... 以我室自行分离的对鳞翅目夜蛾科害虫具有高毒力的Bt菌株B-Pr-88为材料,用PCR-RFLP方法从其质粒DNA文库中筛选到含cry2Ab基因的一个阳性克隆pZF858,序列测定发现,该片段含有cry2Ab全长基因,开放读码框为1902bps,编码由633个氨基酸组成的70.7kD蛋白,氨基酸同源性与已公布的cry2Ab基因同源性均为99.8%,经Bt基因国际命名委员会正式命名为cry2Ab4。根据cry2Ab4基因开放阅读框架(ORF)两端序列,设计合成一对特异引物L2ab5和L2ab3,PCR扩增获得cry2Ab4完整ORF,与大肠杆菌表达载体pET-21b连接,构建了重组表达质粒pET-2Ab4,质粒导入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳证实该基因表达了60kD的蛋白,生物测定表明,Cry2Ab4对棉铃虫和大豆食心虫具有高毒力,同时对小菜蛾和二化螟有一定的杀虫活性,而对亚洲玉米螟和甜菜夜蛾没有杀虫活性。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 cry2Ab4基因 基因克隆 蛋白表达 杀虫活性
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苏云金芽孢杆菌无晶体突变株的逐级升温筛选及其转化性能 被引量:24
12
作者 李林 杨超 +2 位作者 刘子铎 李阜棣 喻子牛 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期85-90,共6页
逐级从42 ℃到44 ℃和46 ℃升温培养、并用0-05 % SDS 处理苏云金芽孢杆菌YBT1463 ,获得了一系列内生质粒被部分或完全消除的无晶体(Cry -) 突变株,对4 种Cry - 突变株的转化性能及导入的外源质粒... 逐级从42 ℃到44 ℃和46 ℃升温培养、并用0-05 % SDS 处理苏云金芽孢杆菌YBT1463 ,获得了一系列内生质粒被部分或完全消除的无晶体(Cry -) 突变株,对4 种Cry - 突变株的转化性能及导入的外源质粒的稳定性进行了研究。用限量培养基和42 ℃培养筛选到Cry - 突变株后,升温至44 ℃,从Cry - 突变株得到内生质粒被进一步消除的突变株;然后升温至46 ℃来培养其中突变株BMB170 ,并用0-05 % 的SDS进行处理,最终筛选到1 株无质粒突变株BMB171 。用pHT3101 、pBMB1736 、pBTL1 和pHV1249 等4 种外源质粒进行的转化及稳定性研究表明,转化频率的大小及导入质粒的稳定性与用作受体菌的Cry - 突变株携有的内生质粒数之间呈现一定的相关性,Cry- 突变株的转化频率显著高于出发菌株,其中BMB171 的转化频率最高达107 转化子/μg DNA,且所导入的外源质粒的稳定性也高于其它Cry - 突变株及出发菌株YBT1463 。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 无晶体突变株 转化性能 受体菌
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有机溶剂对苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)几丁质酶的影响 被引量:13
13
作者 黄小红 陈清西 +3 位作者 王君 沙莉 黄志鹏 关雄 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期71-73,共3页
 以苏云金芽孢杆菌(Bt)的发酵液为材料,经硫酸铵分级分离、DEAE-32离子交换柱层析分离,获得部分纯化的Bt几丁质酶(EC3. 2. 1. 14)制剂.研究了几种有机溶剂对Bt几丁质酶的影响.结果表明,甲醇、丙三醇、甲醛和戊二醛对几丁质酶有抑制作用...  以苏云金芽孢杆菌(Bt)的发酵液为材料,经硫酸铵分级分离、DEAE-32离子交换柱层析分离,获得部分纯化的Bt几丁质酶(EC3. 2. 1. 14)制剂.研究了几种有机溶剂对Bt几丁质酶的影响.结果表明,甲醇、丙三醇、甲醛和戊二醛对几丁质酶有抑制作用;乙醇、丙醇、乙二醇和二甲亚砜在低浓度时对酶有激活作用,随着浓度的升高表现出抑制作用;二氧六环的浓度低于 5%时,对酶的影响不明显,而高于 5%时,对酶则有激活作用;丙酮对酶有激活作用. 图 1参 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 几丁质酶 有机溶剂 酶活力
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苏云金芽孢杆菌培养基优化及间歇发酵 被引量:13
14
作者 关雄 陈锦权 +2 位作者 黄志鹏 汤玉波 高日霞 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期75-80,共6页
对苏云金芽孢杆菌的培养基配方进行室内摇瓶优化筛选,首先用摇瓶培养筛选到Ⅱ号培养基,在此配方的基础上,将培养基组分划分为氮源、碳源及无机盐三因素,采用三因素二水平正交旋转组合设计的方法进行培养基优化组合研究,建立其芽孢... 对苏云金芽孢杆菌的培养基配方进行室内摇瓶优化筛选,首先用摇瓶培养筛选到Ⅱ号培养基,在此配方的基础上,将培养基组分划分为氮源、碳源及无机盐三因素,采用三因素二水平正交旋转组合设计的方法进行培养基优化组合研究,建立其芽孢产量依氮源、碳源、无机盐的响应面方程。借助此方程获得响应面最佳点即培养基各组分的最佳配比。实验结果表明,该方法是苏云金芽孢杆菌培养基优化中十分简便、实用、快速的途径。此外,对其间歇发酵过程也进行了初步考察。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 培养基 优化 间歇发酵 农药
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苏云金芽孢杆菌杀虫机理及害虫对其抗性机制的研究进展 被引量:22
15
作者 李怡萍 梁革梅 +4 位作者 仵均祥 陈豪 马康生 吴孔明 郭予元 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2010年第9期118-128,共11页
苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)杀虫晶体蛋白具有高度专一性,其只对靶标害虫有效,对天敌等其他昆虫无害,转Bt基因植物和Bt杀虫剂是目前世界上产量最大、应用最广泛的生物防治技术。通过对Bt的发现和分类、Bt的结构与功能、B... 苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)杀虫晶体蛋白具有高度专一性,其只对靶标害虫有效,对天敌等其他昆虫无害,转Bt基因植物和Bt杀虫剂是目前世界上产量最大、应用最广泛的生物防治技术。通过对Bt的发现和分类、Bt的结构与功能、Bt毒蛋白的杀虫机理、昆虫对Bt的抗性机制及昆虫体内Bt受体蛋白与抗性的关系等研究现状的论述与分析,对Bt作物害虫抗性治理策略和前景进行了展望。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 结构与功能 杀虫机理 受体蛋白 抗性机制
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苏云金芽孢杆菌对大曲害虫大谷盗的毒杀效果研究 被引量:10
16
作者 李新社 曾建德 +2 位作者 陆步诗 丁凯 李小芳 《中国酿造》 CAS 北大核心 2008年第8期47-49,共3页
采用苏云金杆菌防治大曲害虫,研究结果表明:在30℃条件下,苏云金芽孢杆菌液体制剂达到0.004mL/g的剂量,可使大谷盗毒的校正死亡率达91.8%,且杀虫后大曲的糖化力、发酵力、微生物的数量变化极小。
关键词 苏云金芽孢杆菌 大谷盗 大曲 有效剂量 死亡率
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苏云金芽孢杆菌杀蚊机制研究概况 被引量:10
17
作者 张灵玲 关怡 +3 位作者 张群林 关春宇 汤宝珍 张琪 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期377-378,共2页
从1976年起,人们就将目光转向苏云金芽孢杆菌(Bt)对蚊虫的研究和应用上。笔者简要描述了Bt主要的杀蚊晶体蛋白和杀蚊机制,并针对当前研究概况提出展望。随着杀虫晶体蛋白(ICPs)结构与功能研究的不断深入,必将不断丰富和完善ICPs分子作... 从1976年起,人们就将目光转向苏云金芽孢杆菌(Bt)对蚊虫的研究和应用上。笔者简要描述了Bt主要的杀蚊晶体蛋白和杀蚊机制,并针对当前研究概况提出展望。随着杀虫晶体蛋白(ICPs)结构与功能研究的不断深入,必将不断丰富和完善ICPs分子作用机制,为进一步在分子水平上利用基因操作及蛋白质工程技术开发这一潜在有广阔应用前景的微生物杀蚊剂奠定基础。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 蚊虫 作用机制 生物防治
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14株苏云金芽孢杆菌伴胞晶体蛋白对猪蛔虫第3期幼虫的毒性比较 被引量:11
18
作者 邓干臻 姚宝安 +5 位作者 冯汉莉 袁林茂 周艳琴 李继州 郭玉红 喻子牛 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期338-340,共3页
14株苏云金芽孢杆菌经培养提取伴胞晶体蛋白并测定其蛋白含量。感染性蛔虫卵经胃感染小鼠 ,3d后宰杀并从小鼠肝脏内分离蛔虫第 3期幼虫 (L 3)。设置空白对照 ,将不同剂量的 Bt伴胞晶体蛋白与 L 3置于培养孔在 37℃的二氧化碳培养箱中 (... 14株苏云金芽孢杆菌经培养提取伴胞晶体蛋白并测定其蛋白含量。感染性蛔虫卵经胃感染小鼠 ,3d后宰杀并从小鼠肝脏内分离蛔虫第 3期幼虫 (L 3)。设置空白对照 ,将不同剂量的 Bt伴胞晶体蛋白与 L 3置于培养孔在 37℃的二氧化碳培养箱中 (含 5 % CO2 )培养 ,间隔 12 h检查幼虫活性 ,计算死亡率、校正死亡率及半数致死量。L D50 随着作用时间的延长而逐渐减小。14株细菌伴胞晶体蛋白对 L 3的毒力差异很大。 0 17株对 L 3的杀虫作用快速而持久、毒力最强 ,其 L D50 是所有 14个菌株中最小的 ,作用 12、2 4和 36 h时分别为 1.135 7、0 .2 32 2和 0 .15 32 g/ L。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 幼虫 毒力 伴胞晶体蛋白 蛔虫 毒性
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土壤来源的五个苏云金芽孢杆菌新亚种的鉴定 被引量:12
19
作者 李荣森 高梅影 +1 位作者 戴顺英 李小刚 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期154-159,共6页
从中国土壤中分离的大量苏云金芽孢杆菌菌株中鉴定出H42、H43、H56、H60及H62等5种新H血清型,并进行了形态、培养特征、生化反应、晶体蛋白质成分及毒力特性等项检测鉴定,鉴定了5个苏云金芽孢杆菌新亚种:Baci... 从中国土壤中分离的大量苏云金芽孢杆菌菌株中鉴定出H42、H43、H56、H60及H62等5种新H血清型,并进行了形态、培养特征、生化反应、晶体蛋白质成分及毒力特性等项检测鉴定,鉴定了5个苏云金芽孢杆菌新亚种:Bacilusthuringiensissubsp.jinghongiensis(H42),B.thuringiensissubsp.guiyangiensis(H43),B.thuringiensissubsp.rongseni(H56),B.thuringiensissubsp.pingluonsis(H60)及B.thuringiensissubsp.zhaodongensis(H62)。毒力生物测定证明5个新亚种的代表菌株对棉铃虫(Heliothisarmigera)、小菜蛾(Plutelaxylostela)、柳蓝叶甲(Plagioderaversicolora)幼虫均无毒力。H42、H43、H56、H60对埃及伊蚊(Aedesaegypti)、斑须按蚊(Anophelesstephensi)及尖音库蚊(Culexpipiens)亦均无毒;H62对埃及伊蚊无毒,但对尖音库蚊与斑须按蚊有低毒。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 新亚种 鉴定
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苏云金芽孢杆菌沉默基因cry2Ab3在大肠杆菌中表达及杀虫活性研究 被引量:10
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作者 陈中义 李长友 +2 位作者 刘加宝 张杰 黄大昉 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期561-566,共6页
对苏云金芽孢杆菌C0 0 2菌株cry2Ab基因阳性克隆pHT3 1 5 2Ab进行亚克隆和序列测定 ,在CenBank注册后经国际Bt杀虫蛋白基因委员会正式命名为cry2Ab3。序列分析表明该基因含有芽孢杆菌特异的RBS序列 ,但没有功能性启动子 ,为沉默基因。... 对苏云金芽孢杆菌C0 0 2菌株cry2Ab基因阳性克隆pHT3 1 5 2Ab进行亚克隆和序列测定 ,在CenBank注册后经国际Bt杀虫蛋白基因委员会正式命名为cry2Ab3。序列分析表明该基因含有芽孢杆菌特异的RBS序列 ,但没有功能性启动子 ,为沉默基因。根据大肠杆菌T7表达载体pET 2 1b克隆位点和cry2Ab3开放阅读框架 (ORF)两端序列 ,设计合成一对特异引物L2ab5和L2ab3 ,高保真PCR扩增获得cry2Ab3完整ORF ,经酶切、连接构建了重组表达质粒pET 2Ab3。表达质粒导入大肠杆菌BL2 1 (DE3 ) ,IPTG诱导后 ,SDS PAGE电泳证实了cry2Ab3的表达。生物测定显示诱导培养物对棉铃虫初孵幼虫和小菜蛾二龄幼虫具有杀虫活性 ,能明显抑制二化螟二龄幼虫生长 ,但对甜菜夜蛾和玉米螟没有明显活性。进一步提取Cry2Ab3蛋白 ,生测结果表明其对棉铃虫LC50 为 3 2 5 5 μg g。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 沉默基因 Cry2Ab3 大肠杆菌 表达 杀虫活性
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