紫花苜蓿中苜蓿总皂苷的含量测定方法学研究

目的:进行紫花苜蓿中苜蓿总皂苷的含量测定方法学研究。方法:采用紫外分光光度法结合香草醛-高氯酸显色法测定紫花苜蓿中苜蓿总皂苷的含量,选择测定波长,进行线性关系考察、精密度试验、稳定性试验,并用该方法检测紫花苜蓿样品中苜蓿总皂苷的含量。结果:最佳检测波长确定为552 nm;用吸光度作为纵坐标,用大豆皂苷Bb的量作为横坐标,进行标准曲线的拟合,拟合得到的回归方程为Y=0.008X-0.0651,相关系数r=0.9995,表明线性关系良好;精密度试验RSD(%)为0.85,表明仪器精密度良好;稳定性试验结果表明,大豆皂苷Bb在显色后1h内吸光度比较稳定,稳定性良好;通过测定和计算,得到紫花苜蓿干膏中苜蓿总皂苷的含量为58.93%。结论:线性关系考察、精密度试验和稳定性试验结果都符合要求,说明该方法稳定、可靠,可以用于紫花苜蓿中苜蓿总皂苷的含量测定。

苜蓿总皂苷提取物抗动脉粥样硬化和降血脂的实验研究

目的观察苜蓿总皂苷提取物抗大鼠动脉粥样硬化和降血脂作用。方法该实验采用高脂饲料、血管壁钙超载、内皮损伤三者结合引发大鼠大血管动脉粥样硬化斑块模型。检测指标:用紫外分光光度计测定血清总胆固醇TCH,甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白(HDL-C)的含量;并计算低密度脂蛋白(LDL-C)的含量和动脉粥样硬化指数(AI);检测主动脉的病理变化。结果苜蓿总皂苷提取物可明显降低高脂血症大鼠的血清TCH,TG,LDL-C水平,明显升高HDL-C水平,明显降低AI,与模型组比较有显著性差异(P<0.05);主动脉斑块的病变分级,苜蓿总皂苷提取物明显降低粥样硬化面积,与模型组比较有显著性差异(P<0.05)。冠状动脉病变分级,苜蓿总皂苷提取物能明显降低AS病变发生率,减轻斑块对管腔的阻塞程度。结论苜蓿总皂苷提取物具有降血脂和抗动脉粥样硬化的作用。

南苜蓿总皂苷对2型糖尿病大鼠血液流变学及胰岛素抵抗作用的研究

目的:观察南苜蓿总皂苷对实验性2型糖尿病大鼠血液流变学及胰岛素抵抗的影响。方法:采用高糖高脂饲料喂养1个月加小剂量的链脲菌素(30 mg/kg)的方法建立实验性2型糖尿病大鼠模型,分为正常组、模型组、二甲双胍组、南苜蓿总皂苷高、低剂量组,连续静脉滴注4周,末次给药后测定血液流变学指标、空腹血糖、空腹胰岛素、糖化血红蛋白、肝糖原、计算胰岛素抵抗指数和敏感指数,并采用葡萄糖耐量和胰岛素耐量评价模型动物的胰岛素敏感性,采用蛋白免疫印迹法检测胰岛素信号传导通路的相关蛋白的表达。结果:与模型组比较,南苜蓿总皂苷1.4 g/kg能显著全血黏度、血浆黏度、全血还原黏度,RBC压积(P<0.05或P<0.01);降低空腹血糖、胰岛素和糖化血红蛋白水平(P<0.01或P<0.05);降低胰岛素抵抗指数(P<0.01);升高胰岛素敏感指数和肝糖原含量(P<0.01);改善胰岛素耐量及糖耐量异常;增加肝脏组织中IRS1、PI3K、PAKT的表达。结论:南苜蓿总皂苷对改善2型糖尿病大鼠血液流变性,降低血液的高黏状态,合成肝糖原,改善胰岛素抵抗,达到调节血糖的作用。

苜蓿总皂苷的急性毒性和遗传毒性

背景与目的:观察苜蓿总皂苷的急性毒性和遗传毒性。材料与方法:选择昆明种小鼠为受试对象,采用急性经口毒性试验测定苜蓿总皂苷的LD50;采用小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验对其遗传毒性进行评价。结果:苜蓿总皂苷的小鼠急性经口LD50为13.01g/kg;95%可信限为12.46～13.58g/kg。小鼠骨髓细胞微核和小鼠精子畸形试验结果均为阴性。结论:在本实验条件下,苜蓿总皂苷为实际无毒级;未发现遗传毒性。

苜蓿总皂苷提取物对大鼠长期毒性的实验研究

目的研究苜蓿总皂苷提取物对大鼠的长期毒性。方法苜蓿总皂苷提取物7.2,5.0,2.8g.kg-1,相当药效学有效剂量(0.35g.kg-1为中剂量)的20,16,8倍,连续对大鼠灌胃给药27周。给药14,27周及停药4周后,经检查动物的一般状态、血液学、血液生化学指标及主要脏器组织。结果苜蓿总皂苷提取物对大鼠的一般状况、血常规、血液生化指标、主要脏器系数、重要脏器组织结构等无明显影响。停药4周后检测上述各指标均未见明显异常。与空白对照组比较各给药组大鼠未见与药物相关的明显异常。结论大鼠长期毒性实验表明,苜蓿总皂苷提取物在2.8～7.2g.kg-1属于安全剂量范围。

苜蓿总皂苷提取物抗大鼠动脉粥样硬化和降血脂的作用

目的研究苜蓿总皂苷提取物抗大鼠动脉粥样硬化和降血脂的作用。方法苜蓿总皂苷提取物组高、中、低剂量分别为0.7,0.35,0.18g.kg-1,阳性组:绞股蓝总苷片56mg.kg-1,模型组:等体积蒸馏水,灌胃同时给予高脂饲料;对已造模的大鼠,按体重1.0ml/100g灌胃,空白组:等体积蒸馏水,灌胃同时给予普通饲料;1次/d,连续给药90d。检查血脂相关指标、主动脉病变情况、主要脏器组织的情况。结果苜蓿总皂苷提取物使大鼠的血脂相关指标、主动脉病变情况、重要脏器组织病变情况有不同程度的改善。结论苜蓿总皂苷提取物有抗大鼠动脉粥样硬化和降血脂的作用。

苜蓿总皂苷对Beagle犬的长期毒性实验研究

目的观察苜蓿总皂苷长期给药对Beagle犬的毒性反应。方法 Beagle犬分为苜蓿总皂苷高、中、低剂量组(分别为3.2、1.6、0.8 g·kg^(-1))和空白对照组,每组8只。连续灌胃给药180d,观察Beagle犬的一般状态,于末次给药后和停药30 d后分别取部分动物,检测血液学指标、血液生化学指标及病理组织学改变。结果与空白对照组比较,各给药组对Beagle犬的生长、行为等无显著影响;血液学和血液生化学分析中,苜蓿总皂苷高剂量组白细胞计数增多、丙氨酸氨基转移酶含量降低,中剂量组总蛋白水平升高,低剂量组肌酐水平升高,原因可能与个别动物的应激反应或个体差异有关;血生化其他各项指标均在正常值范围内,给药组与空白对照组比较差异均无统计学意义;病理学检查未见与受试药物相关的变化。恢复期未发生药物引起的迟发性毒性反应。结论苜蓿总皂苷(0.8~3.2 g·kg^(-1))对Beagle犬经口长期给药,未见明显毒性反应。

南苜蓿总皂苷对HepG2细胞及糖尿病大鼠外周组织胰岛素抵抗的作用及机制研究

目的考察南苜蓿总皂苷提取物对体内外降糖作用的特点。方法采用胰岛素持续作用于HepG2细胞复制细胞胰岛素抵抗模型。测定单位细胞葡萄糖的消耗量,检测细胞内丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)含量,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。将10只SD大鼠设为对照组、其余60只大鼠采用高糖高脂饮食和链脲佐菌素复制糖尿病大鼠模型,成模后进行分组,随机分为模型组、二甲双胍组、南苜蓿总皂苷高、低剂量组(以提取物计分别为1.4、0.7 g/kg),每组10只。各给药组灌胃相应药物,连续给药30 d。末次给药后,取肝脏和骨骼肌组织检测MDA、SOD、GSH-Px、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平;采用Western blot法检测骨骼肌组织磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、蛋白激酶B(AKT)、葡萄糖转运体4(GLUT4)蛋白的表达。结果与模型组比较,200、100μg/mL浓度组能增加胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗量和SOD、GSH-Px含量,降低MDA含量(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,高剂量组能使模型大鼠的肝脏和骨骼肌中IL-1β、TNF-α、MDA水平降低;升高SOD、GSH-Px水平(P<0.05);骨骼肌组织中p-PI3K、PI3K、p-AKT、AKT、GLUT4的蛋白表达量升高(P<0.05)。结论南苜蓿总皂苷体外促进胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗;体内通过减少对肝脏和骨骼肌细胞的氧化损伤和炎症反应,增强骨骼肌中胰岛素介导的信号传导,达到减轻胰岛素抵抗的作用,可能是其体内降糖机制。

苜蓿总皂苷对Beagle犬呼吸系统和心血管系统的影响

目的:观察苜蓿总皂苷对Beagle犬心血管系统和呼吸系统的影响,为临床用药提供参考。方法:将Beagle犬分为苜蓿总皂苷高、中、低剂量组(1.0、0.5、0.25g/kg)和空白对照组,灌胃给药1、2、3h后,观察用药前后Beagle犬呼吸频率、呼吸深度、血压、心率变化情况。结果:用药后Beagle犬呼吸频率、呼吸深度、血压、心率均无明显变化,用药前后比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:苜蓿总皂苷在药效剂量下对Beagle犬呼吸系统及心血管系统无明显影响。

苜蓿总皂苷对高脂血症小鼠血清血脂水平的影响

目的:观察苜蓿总皂苷对高脂血症小鼠血清血脂水平的影响。方法:采用高脂乳剂灌胃的方法建立高脂血症小鼠模型,分为苜蓿总皂苷高﹑中﹑低剂量组(1g/kg、0.5g/kg、0.25g/kg),阳性组(绞股蓝总苷片80 mg/kg),模型组,另设正常组,每组10只。灌胃给药,连续40天,各组取血清测定TCH、TG、HDL-C和LDL-C的含量。结果:苜蓿总皂苷高、中剂量组高脂血症小鼠的血清TCH、TG、LDL-C水平均明显下降,HDL-C水平明显上升,与模型组比较有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:苜蓿总皂苷有良好的降血脂作用。

苜蓿总皂苷对小鼠精神神经系统的影响

目的:观察苜蓿总皂苷对小鼠精神神经系统的影响,为临床用药提供参考。方法:小鼠分为苜蓿总皂苷高﹑中﹑低剂量组(5.0、2.5、1.25g/kg)和空白对照组,利用爬杆试验、翻正反射试验、睡眠试验,观察用药前后小鼠的行为变化。结果:用药后小鼠的爬杆、翻正反射、睡眠等自主活动行为能力均无明显变化,与空白对照组比较差异无显著性(P>0.05)。结论:苜蓿总皂苷的药效学剂量对小鼠的神经系统无明显影响。

南苜蓿总皂苷对2型糖尿病大鼠糖脂代谢及胰岛细胞的作用

目的:观察南苜蓿总皂苷(TSMP)对2型糖尿病(T2DM)大鼠血糖、血脂、氧化应激的影响。方法:采用高糖高脂饲料喂养4周加小剂量的链脲佐菌素(30 mg·kg-1)的方法建立2型糖尿病大鼠模型,将50只模型大鼠随机分为模型组,二甲双胍组(0.2 g·kg-1),南苜蓿总皂苷高剂量组(2.8 g·kg-1)、中剂量组(1.4 g·kg-1)、低剂量组(0.7 g·kg-1),连续灌胃4周,末次给药后测定空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TCH)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、空腹胰岛素(FINS)、糖化血红蛋白(HbA1c)、丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD),免疫组化法观察胰岛素和胰高血糖素的表达。结果:与模型组比较,南苜蓿总皂苷2.8,1.4 g·kg-1能显著降低实验性2型糖尿病大鼠给药后7,8周的FBG水平(P<0.01或P<0.05);降低TCH、TG、LDL-C的水平(P<0.01或P<0.05),升高HDL-C的水平含量(P<0.05);降低FINS和HbA1c水平(P<0.01或P<0.05);降低MDA含量(P<0.01);升高SOD含量(P<0.01);增加胰岛素阳性表达,减少胰高血糖素阳性表达。结论:南苜蓿总皂苷对2型糖尿病模型大鼠具有降低血糖,调节血脂,抗氧化,保护胰腺功能的作用。

南苜蓿总皂苷改善2型糖尿病大鼠糖代谢的作用机制

目的探讨南苜蓿总皂苷(TSMP)对2型糖尿病(T2DM)大鼠糖代谢的作用及其可能的机制。方法采用高脂加小剂量链脲佐菌素诱导T2DM大鼠模型,将大鼠分为对照组、模型组、二甲双胍组(0.2g/kg)、TSMP高剂量组(1.4g/kg)、TSMP低剂量组(0.7g/kg),连续给药4周,末次给药后测定胰岛素抵抗指数(IRI)、空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、肝糖原、白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、游离脂肪酸(FFA)、瘦素(Leptin)水平,以及丙酮酸激酶(PK)、己糖激酶(HK)、葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)、果糖-1,6-二磷酸酶、葡萄糖激酶(GK)的活性;检测肝脏组织中G-6-Pase、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)蛋白的表达。结果与模型组比较,给予高剂量(1.4g/kg)TSMP能降低T2DM大鼠IRI、FBG、HbA1c、IL-1β、TNF-α、FFA、Leptin水平,升高肝糖原水平,提高PK、HK、GK的活性,降低G-6-Pase、果糖-1,6-二磷酸酶的活性,并下调肝脏组织中G-6-Pase、PEPCK蛋白表达水平,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 TSMP可以改善T2DM大鼠的糖代谢紊乱,可能与其促进葡萄糖的利用,减轻炎性反应和改善胰岛素抵抗有关。

南苜蓿总皂苷对2型糖尿病大鼠胰腺功能保护作用的研究

目的:观察南苜蓿总皂苷对2型糖尿病大鼠胰腺的保护作用。方法:建立2型糖尿病大鼠模型,除对照组外,将成模大鼠分为模型组、二甲双胍组(0.2 g/kg)、南苜蓿总皂苷组(2.8 g/kg、1.4 g/kg),分别治疗4周。末次给药后测定空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、糖化血红蛋白(Hb A1c)、肝糖原,取全血测定血液流变性。取胰腺组织匀浆测定SOD、MDA、GSH-Px、IL-1β、TNF-α。提取胰腺组织总蛋白,采用蛋白免疫印迹法检测胰岛内质网应激蛋白(CHOP、JNK)和VEGF蛋白的表达。结果:与模型组比较,南苜蓿总皂苷2.8 g/kg、1.4 g/kg能降低大鼠的FBG、FINS、Hb A1c水平;降低糖尿病大鼠胰腺组织MDA、IL-1β、TNF-α的水平,升高SOD、GSH-Px和肝糖原含量。2.8 g/kg组能改善糖尿病大鼠的血液流变性,减少CHOP、JNK蛋白的表达;增加VEGF蛋白的表达。结论:南苜蓿总皂苷保护T2DM大鼠胰腺的保护作用,其机制可能与抑制胰腺的氧化应激和炎症反应,减轻胰岛细胞凋亡发生,改善微循环有关。

苜蓿降血脂胶囊对实验性金黄地鼠动脉粥样硬化的作用

目的:研究苜蓿降血脂胶囊对实验性金黄地鼠动脉粥样硬化的作用。方法:采用高脂饲料喂养诱导金黄地鼠动脉粥样硬化模型,继续造模同时灌胃给药,8周后观察苜蓿降血脂胶囊对血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、动脉粥样硬化指数(AI)、心脏及肝脏形态学变化及冠状动脉粥样硬化病变程度的影响。结果:苜蓿降血脂胶囊在降低血清TC、TG、LDL-C、AI、冠状动脉粥样硬化病变发生率及管腔狭窄、肝脏脏器系数,升高HDL-C方面与模型组比较均有显著性差异(P<0.05或P<0.001)。用药组心脏、肝脏病变程度减轻。结论:苜蓿降血脂胶囊对动脉粥样硬化金黄地鼠有较好的治疗作用。