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苜蓿矮化病毒实时荧光定量PCR检测体系的建立
1
作者
党开祥
万超越
+2 位作者
王思越
李克梅
托伦巴特·毕亚洪
《新疆农业大学学报》
CAS
2023年第3期234-239,共6页
为灵敏、快速检测紫花苜蓿(Medicago sativa L.)中的苜蓿矮化病毒(ADV),根据该病毒L蛋白保守序列设计特异性引物,建立基于SYBR GreenⅠ染料的实时荧光定量PCR检测体系,并应用该方法对田间样品和种子进行快速检测。结果表明,建立的RT-qPC...
为灵敏、快速检测紫花苜蓿(Medicago sativa L.)中的苜蓿矮化病毒(ADV),根据该病毒L蛋白保守序列设计特异性引物,建立基于SYBR GreenⅠ染料的实时荧光定量PCR检测体系,并应用该方法对田间样品和种子进行快速检测。结果表明,建立的RT-qPCR检测技术可对苜蓿中的苜蓿矮化病毒含量进行精确检测,最低检测浓度为9.8×10^(2)copies/μL,灵敏度约是常规PCR的100倍。通过对101份苜蓿样品的检测验证,该方法阳性检出率为61%,较常规PCR高6%。挑选的10份苜蓿种子中有3份被检测出携带苜蓿矮化病毒,病毒含量范围为0~3.02×10^(6)copies/μL。表明建立的RT-qPCR检测体系特异性强、灵敏度高,可应用于苜蓿矮化病毒的定量检测。
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关键词
紫花
苜蓿
苜蓿矮化病毒
实时荧光定量PCR
检测体系
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职称材料
苜蓿矮化病毒(ADV)中国分离物的鉴定和检测
被引量:
3
2
作者
热甫卡提·雪合拉提
范钧星
+2 位作者
王丽丽
葛瑞云
李克梅
《新疆农业大学学报》
CAS
2020年第3期177-181,共5页
为明确新疆栽培紫花苜蓿(Medicago sativa)矮化、丛枝等疑似病毒病症状的病原,本研究应用小RNA测序结合RT-PCR技术开展了病原分子检测与鉴定。结果表明,在36份样品中扩增得到一条长约1000 bp的特异性片段,该片段序列与已报道的其他苜蓿...
为明确新疆栽培紫花苜蓿(Medicago sativa)矮化、丛枝等疑似病毒病症状的病原,本研究应用小RNA测序结合RT-PCR技术开展了病原分子检测与鉴定。结果表明,在36份样品中扩增得到一条长约1000 bp的特异性片段,该片段序列与已报道的其他苜蓿矮化病毒分离物聚合酶蛋白(L)基因的一致性为84.50%~88.24%。构建的系统发育树表明该病毒为苜蓿矮化病毒(Alfalfa dwarf virus),隶属于弹状病毒科(Rhabdoviridae)细胞质弹状病毒属(Cytorhabdovirus)。首次报道了苜蓿矮化病毒病在中国的发生。
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关键词
栽培
苜蓿
矮
化
丛枝
鉴定
苜蓿矮化病毒
下载PDF
职称材料
题名
苜蓿矮化病毒实时荧光定量PCR检测体系的建立
1
作者
党开祥
万超越
王思越
李克梅
托伦巴特·毕亚洪
机构
新疆农业大学农学院/农业农村部西北荒漠绿洲农林外来入侵生物防控重点实验室(部省共建)/农林有害生物监测与安全防控重点实验室
新疆塔城地区塔城市二工镇农业(畜牧业)发展中心
出处
《新疆农业大学学报》
CAS
2023年第3期234-239,共6页
基金
国家重点研发计划课题(2022YFD1401101)
国家自然科学基金项目(31760708)。
文摘
为灵敏、快速检测紫花苜蓿(Medicago sativa L.)中的苜蓿矮化病毒(ADV),根据该病毒L蛋白保守序列设计特异性引物,建立基于SYBR GreenⅠ染料的实时荧光定量PCR检测体系,并应用该方法对田间样品和种子进行快速检测。结果表明,建立的RT-qPCR检测技术可对苜蓿中的苜蓿矮化病毒含量进行精确检测,最低检测浓度为9.8×10^(2)copies/μL,灵敏度约是常规PCR的100倍。通过对101份苜蓿样品的检测验证,该方法阳性检出率为61%,较常规PCR高6%。挑选的10份苜蓿种子中有3份被检测出携带苜蓿矮化病毒,病毒含量范围为0~3.02×10^(6)copies/μL。表明建立的RT-qPCR检测体系特异性强、灵敏度高,可应用于苜蓿矮化病毒的定量检测。
关键词
紫花
苜蓿
苜蓿矮化病毒
实时荧光定量PCR
检测体系
Keywords
Medicago sativa L.
alfalfa dwarf virus
real-time fluorescence quantitative PCR
detection system
分类号
S435.4 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
苜蓿矮化病毒(ADV)中国分离物的鉴定和检测
被引量:
3
2
作者
热甫卡提·雪合拉提
范钧星
王丽丽
葛瑞云
李克梅
机构
新疆农业大学农学院
出处
《新疆农业大学学报》
CAS
2020年第3期177-181,共5页
基金
国家自然科学基金项目(31760708)。
文摘
为明确新疆栽培紫花苜蓿(Medicago sativa)矮化、丛枝等疑似病毒病症状的病原,本研究应用小RNA测序结合RT-PCR技术开展了病原分子检测与鉴定。结果表明,在36份样品中扩增得到一条长约1000 bp的特异性片段,该片段序列与已报道的其他苜蓿矮化病毒分离物聚合酶蛋白(L)基因的一致性为84.50%~88.24%。构建的系统发育树表明该病毒为苜蓿矮化病毒(Alfalfa dwarf virus),隶属于弹状病毒科(Rhabdoviridae)细胞质弹状病毒属(Cytorhabdovirus)。首次报道了苜蓿矮化病毒病在中国的发生。
关键词
栽培
苜蓿
矮
化
丛枝
鉴定
苜蓿矮化病毒
Keywords
cultivated alfalfa
dwarf
witches’broom
detection
Alfalfa dwarf virus
分类号
S432.41 [农业科学—植物病理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
苜蓿矮化病毒实时荧光定量PCR检测体系的建立
党开祥
万超越
王思越
李克梅
托伦巴特·毕亚洪
《新疆农业大学学报》
CAS
2023
0
下载PDF
职称材料
2
苜蓿矮化病毒(ADV)中国分离物的鉴定和检测
热甫卡提·雪合拉提
范钧星
王丽丽
葛瑞云
李克梅
《新疆农业大学学报》
CAS
2020
3
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职称材料
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参考文献
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