苦丁茶皂苷D对ox-LDL 诱导的脂质积累和LPS诱导炎症的影响

目的研究苦丁茶皂苷D对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的RAW264.7细胞内脂质积累和脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞炎症的影响。方法ox-LDL诱导RAW264.7细胞形成泡沫细胞,油红染色观察细胞内脂滴聚集情况,酶法测定细胞内总胆固醇(TC)水平;RT-qPCR和Western blot分别检测清道夫受体CD36和SR-A1,ATP结合转运蛋白A1和G1(ABCA1和ABCG1)的基因和蛋白表达。LPS诱导RAW 264.7细胞炎症,ELISA和RT-qPCR检测白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达;Western blot检测mTOR和p-mTOR的蛋白表达。结果细胞经苦丁茶皂苷D处理后,与模型组相比,高剂量降低了细胞内TC含量,下调了SR-A1的基因和蛋白表达;同时,苦丁茶皂苷D降低了LPS诱导的IL-6、IL-1β、MCP-1表达,下调了p-mTOR的蛋白表达。结论苦丁茶皂苷D可能通过下调SR-A1的基因和蛋白表达降低细胞内TC含量,可能通过mTOR通路发挥抗炎作用。

大鼠肠道菌群对苦丁茶冬青皂苷D体外代谢的影响

目的观察大鼠离体肠道菌群对苦丁茶冬青叶中苦丁茶冬青皂苷D厌氧代谢的影响。方法健康SD大鼠新鲜粪便制备的肠道菌群混悬液与苦丁茶冬青皂苷D体外厌氧培养后,收集代谢产物,采用ACQUITY UPLC BEH C_(18)(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱;流动相水(含0.1%甲酸)-甲醇(含0.1%甲酸),梯度洗脱。应用LTQ-Orbitrap质谱正离子模式分析苦丁茶冬青皂苷D的代谢产物。结果根据精确相对分子质量数据和特征离子碎片,从肠道菌群培养液中检测出4个代谢产物,主要代谢途径是脱糖反应。结论离体培养的大鼠肠道菌群可对苦丁茶冬青皂苷D进行代谢,为进一步研究其体内代谢过程提供了科学依据。