不同精制方法对苦参水提取液中苦参总生物碱含量的影响

目的 :通过对常用新老精制方法进行比较研究 ,以优选出苦参水提取液的最佳精制方法。方法 :采用醇沉、高速离心 超滤、大孔树脂吸附和澄清剂澄清等 4种方法对苦参水提取液进行了精制 ,并以苦参总生物碱的含量为指标 ,对 4种精制方法进行了比较研究。结果 :4种方法精制后 ,苦参总生物碱含量的高低顺序为 :醇沉法(10 6 1mg·g-1) >澄清法 (4 40mg·g-1) >超滤法·(3 0 5mg·g-1) >大孔树脂法 (2 11mg·g-1)。结论 :醇沉法精制后苦参总生物碱的含量比其他方法高 2～ 5倍 ,似可作为苦参水提液的精制方法。

星点设计-效应面优化苦参总生物碱组分磷脂复合物研究

目的:优化苦参总生物碱组分磷脂复合物(TA-PC)的工艺,研究其理化性质。方法:采用溶剂挥发法制备TA-PC,单因素考察反应溶剂、反应温度、药物质量浓度、反应时间、药脂比等对磷脂复合率的影响;星点设计-效应面法优化处方及工艺。HPLC法测定苦参总生物碱中氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱、槐果碱的含量,并以4个生物碱含量为指标考察TA-PC的溶解性、油水分配系数,电镜分析水中分布的形态及大小,红外图谱研究药物与磷脂结合方式。结果:最优条件为:乙醇为反应溶剂,药物与大豆磷脂投料比2.5∶1,药物质量浓度3.0 mg/mL,反应温度为40℃,反应时间2 h。复合率达95.27%±0.65%,与预测值偏差<5.0%;IR验证了所形成的磷脂复合物为一种弱的相互作用,未发生化学变化;水中溶解度明显降低,油水分配系数明显增加。结论:星点设计-效应面法成功制备了TA-PC,工艺稳定可行,提高了TA的脂溶性,为其进一步开发制剂奠定基础。

酸性染料比色法测定蒙成药道古勒·额布斯—7汤中苦参总生物碱的含量

采用酸性染料比色法测定道古勒·额布斯— 7汤中苦参总生物碱的含量 ,结果平均回收率为 98 3% ,RSD =0 70 % ,线性范围为 3 33～ 16 6 7μg/ml.

苦参总生物碱对哮喘大鼠气道重建的防治作用

目的探讨苦参总生物碱对哮喘大鼠气道重建的防治作用及其潜在机制。方法随机将40只健康的雄性SD大鼠分为四组,每组10只,分别为:空白组、模型组、给药组(苦参总生物碱组)和阳性对照组(地塞米松组)。采用卵蛋白-氢氧化铝混悬液处理大鼠构建哮喘大鼠模型,空白组以生理盐水替代;给药组在激发后1 h灌胃10 mg/kg苦参总生物碱水溶液,1次/d,共灌胃28 d;地塞米松组在激发后1 h灌胃0.5 mg/kg地塞米松溶液,1次/d,共灌胃28 d;空白组和模型组灌胃等量生理盐水。药物干预结束后处死大鼠。通过HE染色观察大鼠肺组织的形态变化,采用免疫组化法检测大鼠肺组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9),酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠血清中MMP-9、组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的含量,用蛋白印记法检测大鼠肺组织中MMP-9、TIMP-1和TGF-β1蛋白的表达。结果与空白组相比,模型组大鼠气道周围炎症细胞浸润并伴有平滑肌增生,血清和肺组织中的MMP-9、TIMP-1和TGF-β1水平显著上升(P<0.05);与模型组相比,对大鼠灌胃苦参总生物碱后,支气管增生细胞和周围炎症细胞的浸润均减少,血清和肺组织中MMP-9、TIMP-1和TGF-β1的表达显著下调(P<0.05),与地塞米松组具相同变化趋势。结论苦参总生物碱可以有效地改善哮喘大鼠气道的重建,其分子机制可能是下调MMP-9、TIMP-1和TGF-β1的表达。

苦参总生物碱脂质体凝胶的制备及释药机制研究

目的优化苦参总生物碱脂质体的处方与工艺,制备苦参总生物碱脂质体凝胶并研究其释放机制。方法运用薄膜分散法制备苦参总生物碱脂质体,以包封率和载药量为考察指标,采用酸性染料比色法测定脂质体中苦参碱含量。采用正交试验设计对处方工艺进行优化,选出最优处方制备脂质体。以泊洛沙姆-407为基质,制备苦参总生物碱脂质体凝胶。考察药物凝胶与药物脂质体凝胶的透皮速率。结果通过优化处方与工艺所得的脂质体形态均匀,粒径范围为100~400 nm,包封率达74%,载药量达26%。所制备的脂质体凝胶呈透明状半固体。体外释放结果显示,苦参碱凝胶48 h内累积释药量为6.34 mg/cm^2,苦参总生物碱脂质体凝胶48 h内累积释药量为6.97 mg/cm^2,后者的累积透皮量、稳态透皮速率及48 h后在皮肤中的蓄积量均较前者显著提高。结论优化的制备工艺稳定可行,制得的苦参总生物碱脂质体凝胶质量较好,可有效延缓药物的释放速率,提高药物在体内的蓄积量。

不同精制方法对苦参水提取液中苦参总生物碱含量的影响

目的 :通过对常用新老精制方法进行比较研究 ,以优选出苦参水提取液的最佳精制方法。方法 :采用醇沉、高速离心 超滤、大孔树脂吸附和澄清剂澄清等 4种方法对苦参水提取液进行了精制 ,并以苦参总生物碱的含量为指标 ,对 4种精制方法进行了比较研究。结果 :4种方法精制后 ,苦参总生物碱含量的高低顺序为 :醇沉法 (1 0 61mg·g-1 ) >澄清法 (4 40mg·g-1 ) >超滤法·(3 0 5mg·g-1 ) >大孔树脂法(2 1 1mg·g-1 )。结论 :醇沉法精制后苦参总生物碱的含量比其他方法高 2～ 5倍 ,似可作为苦参水提液的精制方法。

苦参总生物碱及其单体在Caco-2细胞模型的吸收特征研究

目的建立同时测定Caco-2细胞模型中苦参碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱的HPLC方法,探讨苦参总生物碱在Caco-2细胞模型的吸收机制。方法利用人源结肠腺癌细胞系Caco-2细胞单层模型,研究苦参碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱由细胞绒毛膜面供给侧(AP)→基底外侧(BL)和BL→AP侧两个方向的转运过程;HPLC-UV法测定上述3个生物碱的量;计算转运参数和表观渗透系数(Papp)。结果苦参总碱给药后,苦参碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱由AP→BL侧的Papp分别为(1.098±0.092)×10 5、(1.434±0.098)×10 5、(3.87±0.64)×10 6cm/s,由BL→AP侧的Papp分别为(1.104±0.098)×10 5、(1.034±0.079)×10 5、(2.75±0.33)×10 6cm/s,与文献报道的单体化合物给药相比,氧化槐果碱和氧化苦参碱双向转运的Papp明显增大。苦参碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱的表观渗透率值分别为1.01、0.72、0.71。结论苦参总生物碱中苦参碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱仍主要以被动吸收方式进入体内,但比各单体给药吸收更好。

苦参药材中总生物碱含量的测定

[目的]用酸性染料比色法测定不同产地苦参药材中总生物碱的含量。[方法]苦参总生物碱的浓度50%乙醇溶液,加一定pH值的缓冲溶液溴麝香草酚蓝指示液振摇后,氯仿萃取,萃取液于一定波长处测定吸光度A。[结果]氧化苦参碱检测浓度在0.013-0.026mg/ml范围内与吸光度线性关系良好（r=0.997 1）。用氧化苦参碱作为对照品,在pH值7.0的条件下加入2.0 ml的溴麝香草酚蓝溶液,在417 nm处有最大吸光度,该条件下可准确地测定苦参药材中总生物碱的含量。试验测得不同产地苦参药材中总生物碱含量差异较大,其中所购得的陕西、甘肃苦参药材中总生物碱含量较高,分别为1.801、1.778 mg/kg。[结论]该试验所采用的方法操作简便、准确,可通过总生物碱的含量客观全面地评价苦参药材的质量。

酸性染料比色法测定鞣苦胶囊中苦参总生物碱的含量

目的 建立测定鞣苦胶囊中苦参总生物碱含量的方法。方法 采用溶剂萃取酸性染料比色法测定苦参总生物碱含量 ,以氧化苦参碱为对照品 ,溴麝香草酚蓝为酸性染料 ,在pH 7 6缓冲溶液条件下 ,用氯仿萃取 ,检测波长 4 17nm。结果 氧化苦参碱在 0 6 98～ 13 96mg L范围内与吸光度呈良好线性关系 ,回归方程为Y =2 0 2 4 3X - 1 5 136 ,r =0 9993(n =5 ) ,氧化苦参碱的平均回收率为 10 2 6 7% ,RSD =0 74 % (n =5 )。结论 所建立方法简便、准确、专属性强。可用于鞣苦胶囊中苦参总生物碱含量测定。

苦参总生物碱固体脂质纳米粒的制备工艺研究

目的探索苦参总生物碱(TA)磷脂复合物固体脂质纳米粒(TA-PC-SLN)的制备工艺及处方优化,并对其进行体外评价。方法建立高效液相色谱(HPLC)法同时测定TA中4个指标成分苦参碱(MT)、氧化苦参碱(OMT)、槐果碱(SC)、氧化槐果碱(OSC),并进行方法学验证。称取TA、卵磷脂共同溶于乙醇制备磷脂复合物;采用微乳法制备TA-PC-SLN。采用超速离心结合HPLC法考察包封率和载药量;比色法检测粒径分布及Zeta电位。以包封率和载药量作为TA-PC-SLN考察指标,用星点-效应面法优化处方,同时评价TA-PC-SLN的体外释放。结果 HPLC色谱条件为:DIKMA C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.05 mo L/L的KH_(2)PO_(4)(含2 mL/L三乙胺)溶液,梯度洗脱,洗脱条件为0 min(6%乙腈)→35 min(13%乙腈)→40 min(6%乙腈),检测波长为220 nm。TA-PC-SLN的平均粒径为(126.1±3.89) nm,粒径分布(PDI)为(0.409±0.022),Zeta电位为(-30.9±7.37)m V;TA-PC-SLN最佳的制备工艺处方为:药物磷脂复合物与水相(泊洛沙姆,大豆卵磷脂和聚乙二醇2 000组成)比例为1∶1.75,大豆卵磷脂和聚乙二醇2 000比例为1∶1.25,冰水分散相与微乳体积比例为9∶1。TA-PC-SLN体外释放速率低于TA。结论制备出的TA-PC-SLN包封率可达到74%以上,载药量可达到9%以上,并且实现了缓释的目的。

离子交换树脂法纯化苦参总生物碱的工艺优选

目的:考察阳离子交换树脂不同洗脱剂纯化苦参总生物碱的效果,优选最佳纯化工艺条件。方法:采用732型阳离子交换树脂对苦参总生物碱进行纯化,以苦参总生物碱和苦参碱含量为指标,考察以氨水、氨性乙醇作为洗脱剂纯化苦参总生物碱的效果。结果:经过优选,离子交换树脂的最佳洗脱条件为:先以浓氨水浸渍2 h,再以10%氨水洗脱至生物碱反应阴性为止。结论:优选得到的工艺纯化苦参总生物碱效率高,成本低,可操作性强,工艺简便,可用于苦参总生物碱的分离纯化。

响应面法优化黔产大宗药材苦参中总生物碱的提取工艺研究

苦参是中国的传统中药之一,临床主要用于治疗痢疾、便血、黄疸、湿疹及妇科炎症等病症,其中生物碱是其主要药效成分.主要是采用乙醇回流提取法来研究考察黔产苦参中总生物碱的最佳工艺.以苦参总生物碱的提取率作为考察指标,采用乙醇回流提取法,考察提取温度、提取次数、提取时间、料液比以及乙醇浓度对总生物碱的影响;接着在单因素试验结果基础上,采用计算机软件Box-Benhnken实验设计方法优化最佳提取工艺条件.结果显示,其总生物碱的最佳工艺条件为:乙醇浓度85%,提取温度80℃,提取时间2 h,提取次数3次,料液比1∶9;并且在最佳提取工艺条件的验证性试验中,黔产大宗药材苦参总生物碱的提取率达到45.3%,这说明了本试验的提取率优于其它提取工艺方法.该研究方法操作简易及实验设备简单,可为黔产苦参用于工业化提取总生物碱提供一定的理论依据.

苦参化学成分及其生物碱抑菌活性研究

目的 :研究苦参(Sophora flavescenes Ait)总生物碱及其主要生物碱的抑菌效果,探究苦参开发消洗剂的可行性。方法 :采用大孔吸附树脂柱色谱、硅胶柱色谱等技术手段对苦参干燥根进行分离纯化并通过波谱数据对化合物进行结构鉴定。采用药物二倍稀释法与菌落计数相结合法考察苦参总生物碱及其主要生物碱对金黄色葡萄球菌、大肠埃希杆菌、铜绿假单胞菌、乙型溶血型链球菌和白色念珠菌的抑菌作用,并测定各成分用药时的抑菌浓度范围。结果 :从苦参中分离了16个单体化合物,包括9个生物碱类成分和7个黄酮类成分。药敏结果显示,5个样品对所选菌株均具有一定抑菌活性;苦参总生物碱抑菌作用强于各单体生物碱;各单体对金葡球菌的抑菌效果强于其他4种菌;苦参碱和槐果碱对金黄色葡萄球菌的抑菌作用均强于自身氧化物。结论 :苦参中总生物碱及其主要生物碱成分存在明显的抑菌作用,各单体间抑菌活性各有不同,且对各菌种的抑菌作用也不甚相同,可为苦参开发消洗剂的可行性奠定基础。

苦参不同部位有效成分含量比较研究

目的:比较苦参不同采收部位中的苦参总生物碱含量,为苦参栽培资源的合理利用提供依据。方法:采用高效液相色谱法分析不同年限苦参不同部位中苦参碱和氧化苦参碱的含量。结果:苦参碱和氧化苦参碱的总量在不同年限苦参不同部位的分布具有类似的规律性,侧根下部>侧根上部>主根>横生根状茎(地中茎)>茎芽。主根上部和下部的含量差异不显著,但主根与侧根下部的有效成分含量差异较大;苦参生长的第1年、第2年生物碱含量均有较大增长,3年生苦参含量均能达到《中华人民共和国药典》标准。结论:3年采收苦参较为合理,且3年生材料中地中茎和茎芽的生物碱含量也比较高,可以多途径利用。

三物黄芩汤组分(群)配伍在大鼠肝微粒体孵育模型中的相互作用

目的研究三物黄芩汤组分(群)配伍在大鼠肝微粒体孵育模型中的相互作用。方法以高丽槐素和麻黄碱为内标,HPLC法分别同时测定7个时间点(0、15、30、45、60、90、120 min)全方组分(群)配伍及单味药材部位(群)中黄芩总黄酮(黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、千层纸素A)和苦参总生物碱(氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱)的含有量,并计算其体外代谢率。结果在全方组分(群)配伍中,黄芩苷、汉黄芩苷含有量先升高(0~0.5 h)后降低(0.5~2.0 h),黄芩素、汉黄芩素、千层纸素A含有量呈升高趋势(0.5 h内更明显);各生物碱代谢稳定平缓,在20 min内达到平衡。结论三物黄芩汤中黄芩总黄酮与苦参总生物碱、地黄总多糖配伍后,可改善其生物利用度,增强其药效。

苦参提取工艺优选

目的:优选苦参提取工艺参数。方法:以苦参总生物碱和干膏率为考察指标,单因素试验考察提取溶媒、溶媒pH;采用正交试验法,选取溶媒用量、提取时间、提取次数为考察因素,以苦参总碱总量和固含物总量的总权重为考察指标,优选苦参提取工艺。结果:优选的提取工艺为加0.2%盐酸溶液提取3次,每次加6倍量溶媒,每次提取2 h。结论:该优选工艺稳定可行,可用于苦参的工业化提取。