苦参黄酮的提取及其抗氧化能力研究

用3种不同极性的溶剂二氯甲烷、乙酸乙酯和乙醇依次对苦参根原料进行提取,并用Folin-Ciocalteu法检测各提取物总酚含量,然后对提取物清除DPPH.能力、Fe3+至Fe2+还原能力和Fe2+螯合能力进行了考察。结果发现乙醇对苦参的提取率达到16.72%,总酚含量为28.55 mg/g。乙醇提取物在清除DPPH.能力和Fe2+螯合能力方面优势明显,乙酸乙酯提取物在还原Fe3+能力方面表现良好。

苦参黄酮联合卡托普利对糖尿病大鼠心肌病变的改善作用

目的:探讨苦参黄酮与卡托普利联合应用对2型糖尿病心肌病模型大鼠心肌病变的改善作用,初步阐明其改善大鼠心肌纤维化的作用机制。方法:在100只清洁级雄性Wistar大鼠中随机选取15只为正常组,其余大鼠以高脂、高糖饲料饲养配合一次性腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ,30mg·kg-1)的方法,建立实验性2型糖尿病心肌病大鼠模型,共72只成模。按血糖水平选取60只大鼠,随机分为模型组、卡托普利组、苦参黄酮组和苦参黄酮联合卡托普利组,每组15只,灌胃给药8周后,观察各组大鼠的体质量、心脏指数和血清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶-MB(CK-MB)活性及心肌组织中一氧化氮合酶(iNOS)、一氧化氮(NO)、Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原的水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠体质量下降(P<0.01),心脏指数增加(P<0.01),血清中LDH和CK-MB活性增加(P<0.01),心肌组织中iNOS和NO水平降低(P<0.05),ColⅠ和ColⅢ水平增加(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,各给药组大鼠体质量增加(P<0.05),心脏指数下降(P<0.05),血清中LDH和CK-MB活性降低(P<0.05),心肌组织中iNOS和NO水平增加(P<0.05或P<0.01),ColⅠ和ColⅢ水平降低(P<0.05或P<0.01),且苦参黄酮联合卡托普利组改善效果好于单独用药组(P<0.05)。结论:苦参黄酮与卡托普利联合应用对2型糖尿病模型大鼠心肌病变有一定的改善作用,其可能的机制是通过减少心肌损伤改善糖尿病心肌病。

苦参黄酮类化合物中GLUT4转运蛋白激动剂的虚拟筛选

目的采用分子对接技术虚拟筛选苦参黄酮类化合物中葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)转运蛋白激动剂。方法搜集现已分离鉴定的128个苦参黄酮类化合物组成配体数据库,检索RCSB PDB数据库中葡萄糖转运蛋白4蛋白晶体结构并确定本研究用优势构象,以蛋白优势结构对应DrugBank中已上市的小分子药物平均打分为阈值,应用Discovery Studio 2.5(DS2.5)软件的CDOCKER模块进行分子对接。结果虚拟筛选出打分高于阈值且排名前10%的化合物共12个并归纳了苦参黄酮作用靶点的主要活性位点,初步揭示了苦参黄酮抗糖尿病的作用机制。结论基于分子对接的虚拟筛选可推断苦参黄酮化合物中促进葡萄糖转运蛋白4转运蛋白激动的有效成分,为进一步构效关系研究及研发基于新靶点的抗糖尿病类药物提供了一定的参考。

6种苦参黄酮的抗氧化活性的DFT研究

文章使用DFT法,利用GaussView画图,用Gaussian软件包在b3lyp/6-31G机组下对6种苦参黄酮进行优化计算。从计算结果可推断:8位香叶基或异戊烯基取代,及C2,C3双键、C3羟基是增强黄酮类化合物抗氧化活性的有效部位。

苦参总黄酮对D-半乳糖致神经细胞衰老的改善作用及相关机制

目的探讨苦参总黄酮对D-半乳糖致神经细胞衰老的改善作用及相关机制。方法D-半乳糖处理PC12神经元细胞建立细胞衰老模型,分为模型组,10、20、40μg/ml苦参总黄酮组,同时设置空白对照组。检测各组细胞存活率、衰老细胞情况、凋亡率、细胞周期分布情况;测定细胞中抗氧化指标:超氧化物歧化酶、丙二醛、乳酸脱氢酶浓度;Western印迹检测细胞中B淋巴细胞瘤(Bcl)-2相关X蛋白(Bax)、细胞色素(Cyt)-C、Bcl-2、人核因子E2相关因子(Nrf)2、血红素氧合酶1蛋白表达水平。结论模型组细胞存活率明显低于空白对照组,β-半乳糖苷酶阳性染色率、细胞凋亡率明显高于空白对照组(P<0.01);苦参总黄酮组细胞存活率明显高于模型组,β-半乳糖苷酶阳性染色率、细胞凋亡率明显低于模型组,且随着苦参总黄酮给药浓度的增加变化逐渐明显(P<0.05)。各组G0/G1期、S期细胞比例差异有统计学意义(P<0.01);模型组G0/G1期细胞比例明显高于空白对照组,S期细胞比例明显低于空白对照组(P<0.01);苦参总黄酮组G0/G1期细胞比例明显低于模型组,S期细胞比例明显高于模型组(P<0.05)。模型组超氧化物歧化酶浓度明显低于空白对照组,丙二醛、乳酸脱氢酶浓度明显高于空白对照组(P<0.01);苦参总黄酮组超氧化物歧化酶浓度明显高于模型组,丙二醛、乳酸脱氢酶浓度明显低于模型组,且随着苦参总黄酮给药浓度的增加变化逐渐明显,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组相比,模型组Bax蛋白表达明显升高(P<0.01),Cyt-C、Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.01);苦参总黄酮组Bax蛋白表达水平明显低于模型组,Cyt-C、Bcl-2蛋白表达水平明显高于模型组,且随着苦参总黄酮给药浓度的增加变化逐渐明显,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组相比,模型组Nrf2、血红素氧合酶1蛋白表达明显升高(P<0.01);苦参总黄酮组Nrf2、血红素氧合酶1蛋白表达水平明显低于模型组,且随着苦参总黄酮给药浓度的增加变化逐渐明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论苦参总黄酮可改善D半乳糖诱导的神经细胞衰老,且呈剂量依赖性,可能与激活Nrf2抗氧化信号途径、抑制氧化应激反应、降低细胞凋亡有关。

苦参总黄酮对醋酸铅诱导小鼠睾丸间质细胞氧化应激的改善作用及对Keap1/Nrf2信号通路的影响

目的:观察苦参总黄酮(SF)对醋酸铅(LA)诱导的小鼠睾丸间质细胞TM3氧化应激的改善作用及其对KELCH状ECH相关蛋白1(Keap1)/细胞中核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的影响,探讨SF改善由LA诱导的TM3细胞氧化应激的相关作用机制。方法:利用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度(0、10、20、50和80µmol·L^(-1))LA和不同浓度(0、12.5、25.0、50.0和80.0 mg·L^(-1))SF分别干预24 h后的TM3细胞存活率;将TM3细胞随机分为空白对照组、LA组、LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组。除空白对照组外,其他各组均采用50µmol·L^(-1)LA诱导TM3细胞24 h建立TM3细胞氧化应激模型,其中LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组TM3细胞再分别给予12.5、25.0和50.0 mg·L^(-1)SF。利用MTT法检测TM3细胞存活率;WST-1法和硫代巴比妥酸(TBA)法检测TM3细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平;Western blotting法检测Nrf2、Keap1和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Caspase-9)蛋白表达水平。结果:MTT法检测,与0µmol·L^(-1)LA组比较,10、20、50和80µmol·L^(-1)LA组TM3细胞存活率明显降低(P<0.01);与0 mg·L^(-1)SF组比较,12.5、25.0、50.0和80.0 mg·L^(-1)SF组TM3细胞存活率明显降低(P<0.05或P<0.01);与LA组比较,LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组TM3细胞存活率明显升高(P<0.01);WST-1法和TBA法检测,与LA组比较,LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组TM3细胞中SOD活性明显升高(P<0.01),MDA水平明显降低(P<0.01);Western blotting法检测,与LA组比较,LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组TM3细胞中Nrf2蛋白表达水平明显升高(P<0.01),Keap1和Caspase-9蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论:SF对LA诱导TM3细胞氧化应激具有一定改善作用,并可降低TM3细胞中Keap1蛋白表达水平,升高TM3细胞中Nrf2蛋白表达水平。

叶酸修饰的苦参总黄酮固体自微乳的制备

目的 制备叶酸修饰的苦参总黄酮固体自微乳,评价其理化性质及细胞毒性。方法 以苦参酮、槐属二氢黄酮G、异黄腐醇的吸收率为指标,采用大鼠在体结肠循环试验筛选叶酸修饰的苦参总黄酮自微乳的处方;以粒径和Zeta电位为指标,单因素考察确定叶酸修饰的苦参总黄酮固体自微乳处方的吸附材料种类和用量。考察优选后的自微乳对人结肠癌细胞(HT-29细胞)的细胞毒性。结果 当叶酸-聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺与乳化剂的比值为3∶100时,能显著提高结肠组织对苦参酮、槐属二氢黄酮G、异黄腐醇的吸收(P<0.05);叶酸修饰的苦参总黄酮自微乳∶α-乳糖质量最佳比例为1∶2;制备的叶酸修饰的苦参总黄酮固体自微乳透射电镜下呈现类球的实体粒子,粒径为(38.5±1.0) nm,Zeta电位为-(32.1±1.1) mV;细胞毒性实验表明叶酸修饰的苦参总黄酮固体自微乳对HT-29细胞具有显著的抑制作用(P<0.05)。结论 该研究成功制备了叶酸修饰的苦参总黄酮固体自微乳,其对HT-29具有较好的抑制作用。

苦参总黄酮对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及相关机制

目的 探讨苦参总黄酮对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及相关机制.方法 应用大脑中动脉栓塞法构建大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,将造模成功的40只大鼠随机分为模型组、50 mg/kg苦参总黄酮组、100 mg/kg苦参总黄酮组、200 mg/kg苦参总黄酮组;另取10只大鼠作为对照组(手术步骤同模型组,但不插入尼龙线阻断血流).对照组和模型组分别给予生理盐水灌胃,苦参总黄酮组造模后给予相对应剂量的苦参总黄酮灌胃,7 d后取材.分别于缺血再灌注1、3、7 d使用改良的Longa评分系统进行神经功能评分.应用酶联免疫吸附法测定血清白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度.应用RT-PCR和Western blot检测大鼠脑组织中无翅型MMTV整合位点家族成员3a(Wnt3a)、丝氨酸/苏氨酸激酶(GSK-3β)、β-连环蛋白肽(β-catenin)、G1/S-特异性周期蛋白-D1(CyclinD1)mRNA和蛋白表达.结果 缺血再灌注时间1、3、7 d时苦参总黄酮不同剂量组大鼠神经功能缺损评分均明显低于模型组,随着苦参总黄酮剂量的增加大鼠神经功能缺损评分明显降低(P<0.05);随着缺血再灌注时间的增加大鼠神经功能缺损评分逐渐升高,苦参总黄酮组大鼠神经功能缺损评分逐渐降低(P<0.05).模型组大鼠血清IL-1、IL-6、TNF-α含量明显高于对照组(P<0.01);苦参总黄酮各剂量组大鼠血清IL-1、IL-6、TNF-α含量均明显低于模型组,随着苦参总黄酮剂量的增加大鼠血清IL-1、IL-6、TNF-α含量逐渐降低(P<0.05).模型组大鼠Wnt3a、β-catenin、CyclinD1 mRNA和蛋白相对表达量明显高于对照组,GSK-3β mRNA和蛋白相对表达量明显低于对照组(P<0.01);不同剂量的苦参总黄酮组大鼠Wnt3a、β-catenin、CyclinD1 mRNA和蛋白相对表达量均明显低于模型组,GSK-3β mRNA和蛋白相对表达量明显高于模型组(P<0.05);随着苦参总黄酮剂量的增加,大鼠Wnt3a、β-catenin、CyclinD1 mRNA和蛋白相对表达量逐渐降低,GSK-3β mRNA和蛋白相对表达量逐渐升高(P<0.05).结论 苦参总黄酮可通过激活Wnt/β-catenin信号通路,促进缺血性脑卒中大鼠脑组织细胞存活,减轻缺血再灌注所致的脑损伤;苦参总黄酮还能够通过抑制炎症介质对抗脑缺血再灌注损伤.

苦参黄酮抑制血管新生活性成分的虚拟筛选

血管新生是一个动态的、多步骤的过程,现在已知大约70种疾病与血管新生紊乱相关。作者前期研究及文献报道均表明苦参黄酮类成分有明显抑制血管新生的作用,但其药效物质基础和作用机制尚未明确。该研究应用分子对接技术虚拟筛选苦参黄酮抑制血管新生的药效物质,搜集现已分离鉴定的126个苦参黄酮类化合物组成配体数据库,选择VEGF-a,TEK,KDR等6个与血管新生密切相关的靶点组成受体数据库,以DrugBank中对各靶点有抑制作用并已上市的小分子药物为参照,设定各靶点对应的已上市小分子药物最低打分为阈值,应用Discovery Studio 2.5(DS2.5)软件的LibDock模块进行分子对接,虚拟筛选出打分高于阈值且排名前10%的化合物共37个。对比分析了原配体、已上市药物和苦参黄酮作用于各靶点的主要活性位点,初步揭示了苦参黄酮抑制血管新生的作用机制,为研发血管新生抑制剂类药物提供了一定的参考。

苦参总黄酮对肝纤维化模型大鼠ALT、TBiL、PIIINP、LN、HA水平的影响

目的探究苦参总黄酮对肝纤维化模型大鼠丙氨酸转氨酶(ALT)、总胆红素(TBiL)、Ⅲ型前胶原氨基端原肽(PIIINP)、层粘连蛋白(LN)、透明质酸(HA)水平的影响。方法经CCl4灌胃法制备大鼠肝纤维化模型,将36只成模大鼠分为肝纤维化组、苦参总黄酮组、阳性药组,每组12只,另12只未造模大鼠为正常组。分别在干预1周、4周后,采用试剂盒检测ALT、TBiL、PIIINP、LN、HA水平。结果干预1周、4周后,肝纤维化组、苦参总黄酮组和阳性药组血清5项水平较同期正常组高(P<0.05)。干预4周后,苦参总黄酮组和阳性药组血清5项水平较同期肝纤维化组低(P<0.05)。干预4周后,肝纤维化组血清5项水平较同组干预1周后高(P<0.05),苦参总黄酮组和阳性药组血清5项水平较同组干预1周后低(P<0.05)。结论苦参总黄酮可延缓并逆转CCl4诱导的肝纤维化,改善肝功能。

苦参总黄酮的研究进展

苦参为历代本草收载的传统常用中药,所含的黄酮类化合物近年来被不断关注,在化学成分、提取、质量控制、药理活性等方面已积累了大量成果,尤其是构效关系的研究对设计新的活性物质结构有重要意义。本文以"Sophora flavescens""lavandulyl flavanone""Sophoraflavanone G""Kuarinone""HPLC"等中、英文词汇为主题词进行扩展检索,查询Elsevier数据库中历年相关文献,同时结合其他资料,重点从苦参总黄酮的提取纯化、质量控制及构效关系等方面来梳理、归纳,以期为其深入开发与应用奠定基础。

苦参总黄酮对醋酸铅诱导雄性小鼠睾丸损伤的影响

目的:研究苦参总黄酮(flavonoids from Sophora flavescens)对醋酸铅诱导雄性小鼠睾丸损伤的影响及其机制。方法:昆明小鼠分为4组:正常对照组、模型组、苦参总黄酮组及HCG组,采用醋酸铅(40 mg/kg)连续灌胃7d建立雄性小鼠睾丸损伤模型,造模第2天始,苦参总黄酮组灌胃苦参总黄酮600 mg/kg,HCG组腹腔注射HCG 500IU/kg,连续30 d。观察雄性小鼠的精子活力、精子畸形率;睾丸组织匀浆检测超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)、一氧化氮(NO)等指标;并观察睾丸组织的病理改变。结果:与正常对照组比较,模型组精子活力显著降低,精子畸形率增高,睾丸组织中SOD和NOS的活性降低、NO含量减少(P<0.05或P<0.01),模型组睾丸组织病理表现生精上皮显著变薄,生精细胞层次和数量均减少,生精小管腔可见少量精子形成。与模型组比较,苦参总黄酮组的精子活力相应增高,精子畸形率降低,睾丸组织中SOD、NOS的活性增高、NO含量增加(P<0.05或P<0.01),因醋酸铅所致的睾丸组织损伤明显改善。结论:苦参总黄酮对醋酸铅所致雄性小鼠睾丸损伤有一定保护作用,作用机制可能与抗氧化及影响NOS-NO系统有关。

苦参总黄酮自微乳处方优化

目的:优化苦参总黄酮(TF)自微乳(SMEDDS)的制备工艺,并研究其理化性质。方法:采用紫外分光光度法测定TF的含量,考察TF在不同辅料中的溶解度;以粒径、自乳化时间及载药量为评价指标,考察不同油相、乳化剂和助乳化剂的配伍情况,采用三元相图确定TF-SMEDDS处方中辅料的种类,进一步采用星点设计效应面法优化最佳用量。电镜及Zeta电位、体外释放等考察其理化性质。结果:TF-SMEDDS的最优处方为Triacetin 19.0%,Kolliphor RH40 34.7%,Transcutol HP 46.3%,载药量25 mg/g。电镜下自微乳呈类球形实体粒子,粒径(27.97±0.67) nm,PDI为0.111±0.08,电位(-30.9±1.51) mV;10 min内累积释放度达75%。结论:TF-SMEDDS工艺简单,有效改善TF释放速度,有望提高其口服生物利用度。

苦参总黄酮抗实验性心律失常作用的研究

目的 :观察苦参总黄酮的抗心律失常作用。方法 :用氯仿诱导小鼠室颤 ,乌头碱、哇巴因分别诱发大鼠、豚鼠的室性心律失常。结果 :苦参总黄酮能明显对抗乌头碱、哇巴因及氯仿诱发的动物室性心律失常。结论 :苦参总黄酮有抗心律失常的作用。

苦参总黄酮磷脂复合物的制备及优化

目的制备苦参总黄酮组分磷脂复合物,并研究复合物的理化性质。方法采用溶剂挥发法制备苦参总黄酮磷脂复合物,采用单因素考察和正交试验,以复合率为指标,优化工艺条件;采用差示扫描量热分析(DSC)和傅里叶变换红外光谱法(FTIR)、紫外吸收光谱(UV)等对复合物的形成进行验证。结果最佳工艺条件是二氯甲烷︰甲醇(1∶1)为反应溶剂,反应物浓度为2 g·L^(-1),药物与磷脂投料质量比为1∶1.5,在40℃下反应1.5 h;在此条件下复合率为95.57%。与原提取物比较,磷脂复合物中总黄酮的水溶性得到提高;苦参总黄酮与磷脂形成了一种新的物相,但其自身的化学性质并未改变。结论所建立的苦参总黄酮磷脂复合物的制备工艺简单、稳定可靠、可操作性强,易于工业生产。

微滤-大孔树脂法精制苦参中氧化苦参碱和苦参总黄酮

目的 考察微滤 -大孔树脂法精制苦参中氧化苦参碱、苦参总黄酮的效果。方法 采用 HPLC法测定氧化苦参碱的含量 ,紫外分光光度法测定苦参总黄酮的含量。结果 苦参提取液经微滤 -大孔树脂法处理后 ,其氧化苦参碱、苦参总黄酮的保留率分别为 78.88%和 73.4% ,固形物去除率为 38.95 %。结论 微滤 -大孔树脂法较醇沉法可更有效地保留有效成分、去除杂质。

微滤-大孔树脂法与醇沉法精制苦参中氧化苦参碱和苦参总黄酮的比较研究

目的 :考察微滤 -大孔树脂法精制苦参中氧化苦参碱、苦参总黄酮的效果 ,并与水提醇沉法进行了比较。方法 :采用HPLC法测定氧化苦参碱的含量 ,紫外分光光度法测定苦参总黄酮的含量。结果 :苦参提取液经微滤 -大孔树脂法处理后 ,其氧化苦参碱、苦参总黄酮的保留率为 78.88%和 73 .4%,固形物去除率为 3 8.95 %;经醇沉法处理后 ,氧化苦参碱、苦参总黄酮的保留率为 60 .7%和 5 2 .1%,固形物去除率为 3 4.88%。结论 :微滤 -大孔树脂法较醇沉法可更有效地保留有效成分。

苦参总黄酮对良性前列腺增生模型大鼠生殖内分泌的影响

目的:观察苦参总黄酮对良性前列腺增生(BPH)模型大鼠生殖内分泌的影响。方法:将SD大鼠切除睾丸,注射丙酸睾酮建立良性前列腺增生模型,同时各组分别给予苦参总黄酮高、中、低剂量及阳性对照药爱普列特。观察血清LH、T、DHT的变化,并处死大鼠观察大鼠前列腺重和精囊腺重。结果:苦参总黄酮可明显改善前列腺增生大鼠血清LH、T及DHT水平,明显减轻大鼠前列腺重量和大鼠精囊腺重量。结论:苦参总黄酮对良性前列腺增生有明显改善作用。

苦参药材中氧化苦参碱和苦参总黄酮含量的比较研究

目的测定不同产地和来源的苦参药材中氧化苦参碱和苦参总黄酮的含量。方法采用高效液相色谱法检测苦参中氧化苦参碱的含量,紫外分光光度法检测苦参中苦参总黄酮的含量。结果比较了10批不同产地和来源的苦参药材中氧化苦参碱和苦参总黄酮的含量,其中河南产苦参(批号:110613)氧化苦参碱含量最高,广西产苦参(批号:110930)中苦参总黄酮含量明显高于其他产地的苦参。结论不同产地和来源的苦参药材中有效成分的含量差异较大,在临床用药时应引起重视,在含苦参的复方制剂生产中应建立药材的检测标准。

微滤-大孔树脂法与醇沉法精制苦参中氧化苦参碱和苦参总黄酮的比较研究

[目的 ]考察微滤 -大孔树脂法精制苦参中氧化苦参碱、苦参总黄酮的效果 ,并与水提醇沉法进行了比较。[方法 ]采用 HPL C法测定氧化苦参碱的含量 ,紫外分光光度法测定苦参总黄酮的含量。 [结果 ]苦参提取液经微滤 -大孔树脂法处理后 ,其氧化苦参碱、苦参总黄酮的保留率为 78.88%和 73.4 % ,固形物去除率为 38.95 % ;经醇沉法处理后 ,氧化苦参碱、苦参总黄酮的保留率为 6 0 .7%和 5 2 .1% ,固形物去除率为 34.88%。 [结论 ]微滤 -大孔树脂法较醇沉法可更有效地保留有效成分、去除杂质。