同位素稀释质谱法、酶法和碱性苦味酸法测定血清肌酐方法比较

目的对同位素稀释液相色谱串联质谱法(ID-LC-MS/MS)、肌氨酸氧化酶法(简称酶法)和碱性苦味酸法(简称Jaffe法)的血清肌酐检测结果进行方法比较,为临床实验室不同检测系统肌酐检测结果的一致性提供参考。方法采用ID-LC-MS/MS、酶法和Jaffe法同时测定200例临床血清标本、50例溶血标本、50例高脂标本(甘油三酯1.88～17.60 mmol/L)和6例标准添加标本的肌酐水平,观察3种方法的精密度、回收率、方法偏差以及溶血和高脂对检测方法的干扰程度。结果血清标准添加50和100μmol/L肌酐,酶法、Jaffe法和ID-LC-MS/MS的变异系数(CV)分别为<1.14%、<2.39%、<3.84%;回收率分别为84.9%、82.2%,74.4%、70.8%,96.1%、96.3%。ID-LC-MS/MS与酶法、Jaffe法的线性回归方程分别为Y酶法=0.964XID-LC-MS/MS+0.385,r=0.994;YJaffe法=0.955XID-LC-MS/MS+13.14,r=0.979。与ID-LC-MS/MS比较,酶法和Jaffe法的平均偏差分别为-2.93%、13.9%。溶血和高脂对酶法、Jaffe法测定血清肌酐均有不同程度的负干扰。结论酶法与ID-LC-MS/MS的血清肌酐测定结果可比性较好,Jaffe法的血清肌酐测定结果明显偏高。溶血和高脂可干扰酶法和Jaffe法的血清肌酐测定,使结果偏低。

苦味酸法和酶法测定血清肌酐室间质评现状分析

目的：探讨广东省计划生育机构实验室血清肌酐的检测质量现状。方法将肌酐室间质评（EQA）的质控品以邮寄的方式发放到各实验室，各实验室在规定时间内把检测数据、检测方法网告研究所。第一次室间质评有71家实验室使用苦味酸法，52家实验室使用酶法；第二次室间质评有37家实验室使用苦味酸法，64家实验室使用酶法，分析不同方法检测肌酐的数据结果。结果第一次室间质评苦味酸法组和酶法组能力比对检验（PT）合格率分别为57.46%和83.85%；第二次室间质评苦味酸法组和酶法组PT合格率分别为83.78%和97.19%。第二次室间质评使用苦味酸法检测肌酐的变异系数在6.67%～19.26%之间；酶法的变异系数在3.78%～11.43%之间,五个批号的质控品使用苦味酸法检测肌酐的结果与酶法均存在差异（P＜0.05），其中低值质控苦味酸法检测结果高于酶法，偏差在9.82%～66.31%之间；高值质控苦味酸法检测结果低于酶法，偏差在4.30%～10.66%之间。结论酶法检测肌酐的质量明显优于苦味酸法。广东省计划生育机构实验室血清肌酐的检测质量有待提高。

肌酐酶法与碱性苦味酸法测定尿中肌酐含量的对比分析

分别应用肌酐酶法和碱性苦味酸法测定人尿中肌酐含量。经统计分析表明,两方法测定结果无显著差异,相关系数有高度显著性。

碱性苦味酸法测定头发中肌酐含量

用碱性苦味酸法建立了头发肌酐含量的测定。结果表明：本法有较高的精密度和准确度，批内ＣＶ为４．５％，批间ＣＶ为６．７％，平均回收率为９４．２％，与高效液相色谱法测定结果相关性良好。测定４０例健康人，其范围为０．７４～１．５０μｍｏｌ／ｇ，以ｘ＋２ｓ为参考值上限，健康人头发肌酐含量小于１．４８μｍｏｌ／ｇ。初步应用于临床。

血清肌酐苦味酸法自主研发生化诊断试剂的临床研究

目的评价自主研发的血清肌酐(Cr)生化诊断试剂苦味酸法自身的性能评价及研发试剂与进口优质Cr生化诊断试剂对血清Cr实验检测的可比性及偏倚评估,确认研发试剂是否符合临床要求,能否应用于临床。方法依据美国临床实验室标准化协会EP9-A文件标准,科学设计试验方案。在设置好各种参数的前提下,首先作自主研发血清Cr生化诊断试剂苦味酸法做自身的性能评价:空白吸光度、重复性和线性检测;然后取样本,在奥林巴斯5421型全自动生化仪上进行两种试剂的比对和偏倚评估。结果自主研发血清Cr生化诊断试剂空白吸光度、重复性和线性检测符合要求,X组试剂和Y组试剂对临床标本Cr的检测结果经统计学处理显示:方法内重复性检查DXi′≤4DXi′、DYi′≤4DY′i,离群点检查Eij≤4E,Eij′≤4E′,线性回归r=0.999 8、系统误差的估计值及其置信区间|BClow,BChigh|<允许误差,系统误差符合国际标准要求。结论自主研发的Cr生化诊断试剂与公认的优质进口ROCHE生化诊断试剂间具有良好的相关性,自主研发Cr生化诊断试剂自身性能良好,安全性和有效性符合临床应用要求。

用苦味酸法测定烟叶中还原糖的探讨

用苦味酸法测定烟叶中还原糖的含量是一种既正确又快速的方法。样品的回收率为96%—104.7%,变异系数约2%。本文介绍了方法的测定步骤和注意点。因为用这方法测定的浸提剂是水,所以与经典的Ber-trand 法相比,其结果比真实含量要稍高一点。需将测得结果乘以0.87,即得真值。

维生素C对苦味酸法及肌氨酸氧化酶法测定肌酐结果的干扰分析

目的 研究维生素C对苦味酸法及肌氨酸氧化酶法测定肌酐(Cr)结果的干扰。方法 采集血清Cr正常水平和高浓度血清Cr患者血清标本,配制标准浓度血清(105μmol/L),然后配制浓度分别为3.0、6.0、9.0、12.0、15.0、18.0、21.0、24.0 g/L的维生素C溶液,分别采用苦味酸法和肌氨酸氧化酶法测量0.45 ml标准血清+0.05 ml不同浓度维生素C溶液中血清Cr浓度,并以0.45 ml标准血清+0.05 ml生理盐水测量结果为对照,分别计算干扰效应并进行回归分析。结果 两种检测方法95%CI下限均超过最大允许误差,按照EP7-A2判定,维生素C对苦味酸法测定血清Cr产生正干扰,对肌氨酸氧化酶法测定血清Cr产生负干扰;对两种检测方法所测血清Cr值进行回归分析,结果均符合二次曲线分布,并根据回归曲线计算出苦味酸法最小干扰剂量为0.87 g/L,肌氨酸氧化酶法最小干扰剂量为1.06 g/L。结论 维生素C对苦味酸法测量Cr产生正干扰,对酶法则产生负干扰,且最低干扰浓度均较低,因此临床检测血清Cr前1周时间内应避免应大剂量应用维生素C或采取措施去除血液标本中维生素C。

肌氨酸氧化酶法和苦味酸法测定血清肌酐的比较

目的:评测肌氨酸氧化酶法和苦味酸法测定血清样本肌酐(Cre)的偏倚。方法:依据美国国家临床实验室标准协会EP9-A文件,每天取临床样本8份,分别用两种方法测定血清样本Cre含量,共测定5d,记录结果,去除离群点,计算线性回归方程和相关系数,进行偏倚估计。结果:在测定患者新鲜非黄疸血清样本Cre时,肌氨酸氧化酶法和苦味酸法测定结果的预期相对偏倚在Cre浓度<100μmol/L时,两种方法的预期偏倚≤-1.8%,酶法的测定结果低于苦味酸法;当Cre浓度>200μmol/L时,两种方法的预期偏倚≥11.9%,酶法的测定结果高于苦味酸法,当Cre浓度>500μmol/L时,两种方法的预期偏倚≥20.1%。结论:随血清Cre浓度上升,酶法和苦味酸法的测定结果的预期偏倚增加,临床实验室在换用不同仪器或试剂时必须对肌酐测定的不同方法建立不同的参考值范围。

酶法和碱性苦味酸法测定肌酐的方法学分析

目的 :分析酶法测定肌酐的可靠性。方法 :通过对酶法和碱性苦味酸法测定肌酐的方法学比较 ,得出回归方程、相关系数。结果 :酶法具有线性范围宽 ,重复性好和抗干扰能力强的特性。结论 :酶法是当前实验室测定肌酐的可靠方法 。

升华法和苦味酸法测定工业三聚氰胺纯度对比

用尿素法生产三胺工艺中可能带入产品中的杂质作样品,对目前工业三聚氰胺国家标准中纯度测定的2种方法——升华法和苦味酸法进行了准确性验证对比试验,结果表明苦味酸法测定含尿素、三聚氰酸、缩二脲、OAT等杂质较多的三胺产品要准确些,建议将其作为仲裁法。

肌氨酸氧化酶法和碱性苦味酸法测定血清肌酐的比较

目的:比较碱性苦味酸法与肌氨酸氧化酶法测定血清肌酐的不同及黄疸标本对测定方法的影响.方法:用自动生化分析仪AU640检测正常标本和病人标本,将测得的结果进行统计分析.结果肌氨酸氧化酶法和碱性苦味酸测定血清肌酐相关性较好,其直线回归方程为:Y=29.78+0.490X(X为苦味酸法,Y为肌氨酸氧化酶法),相关系数:r=0.81.结论:在非黄疸标本中两种方法的测定结果有较好的相关性,但有恒定的偏差,建议对不同方法测定血清肌酐的值建立不同的参考值范围.两种方法受黄疸影响的程度并无明显差别.

确定碱性苦味酸法测定血清肌酐的时间

目的:寻找去蛋白碱性苦味酸法测定血清肌酐的时间以及实验最短反应时间。方法:在包头医学院第一附属医院肾内科住院患者中,随机采集11份完全血清。经去蛋白处理后,肌酐与碱性苦味酸发生Jaffe反应,生成橘红色的苦味酸肌酐复合物,然后使用721分光光度计在510 nm波长分别于5 min、10 min、15 min测定吸光度。结果:经配对t检验,5 min与10 min时苦味酸肌酐复合物吸光度差异有统计学意义;10 min与15 min苦味酸肌酐复合物吸光度差异无统计学意义,苦味酸肌酐复合物在10～15 min时较稳定。结论:碱性苦味酸法测定血清肌酐的时间为10～15 min。

胆红素对苦味酸法测定血清肌酐的影响

目的探讨总胆红素干扰苦味酸法测定血清肌酐的剂量响应曲线。方法根据美国临床实验室标准化委员会(CLSI)制定的评价方案EP7-A2文件,应用冻干粉型总胆红素标准品作为干扰物添加于混合血清,配制成不同浓度总胆红素混合血清,用苦味酸法测定血清肌酐。结果随着混合血清中总胆红素浓度的增加,血清肌酐测定值随之降低,其剂量响应曲线呈线性关系,回归方程为y(Scr)=-0.088x(TBil)+74.224,r=0.994,P<0.001,具有统计学意义。结论总胆红素对苦味酸法测定血清肌酐有负干扰。

苦味酸法肌酐试剂抗胆红素干扰的研制方法

血肌酐测定是肾功能检测的重要常规生化指标。近年来,多采用抗干扰能力较强的＂2点法＂进行血肌酐测定,但该法不能全部消除非肌酐色素的干扰[2],当测定高胆红素标本时肌酐的测定值偏低。

β-内酰胺类抗生素造成肌酐苦味酸法检测结果假阳性增高的初步探讨

目的:探讨头霉素类药物对肌酐苦味酸法测定的干扰。方法:将不同浓度的药物溶液加入低值和高值两种肌酐标准溶液中,采用苦味酸法对混合液进行肌酐浓度检测。结果:头霉素类药物都不同程度的可导致肌酐假性增高,干扰程度与药物浓度呈正相关。结论:头霉素类药物会造成肌酐检测结果的假性增高,并呈良效依赖关系;应避免在患者服用或注射头霉素类药物后立即检测肌酐,以减少对检测结果的干扰。

苦味酸法和酶法测定肌酐结果的比较

目的分析苦味酸法和酶法测定血清肌酐的结果是否一致,为实验室评估提供依据。方法按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP9-A文件进行评估,将测定结果进行相关回归分析,计算两种方法间的偏倚。结果酶法和苦味酸法相关系数r=0.999,回归方程为Y=0.916X+7.978。酶法和苦味酸法有明显恒定偏倚。结论必须对方法原理不同的肌酐测定方法建立不同参考范围,同一实验室采用不同方法,建议以酶法为基准。

碱性苦味酸法测定血清肌酐试剂的配制

目的 :配制直接测定血清肌酐的试剂碱性苦味酸 ,使得方法简单 ,结果可靠。方法 :改变氢氧化钠与苦味酸的浓度及配比 ,采用固定时间法测定。结果 :本法测定两种批号 RANDOX质控血清与其靶值比较 P>0 .0 5 ,精密度批内分别是 CV=3.4%和 2 .7% ,批间分别是 CV=3.96 %和 3.34%。本法与除蛋白滤液法 ,上海试剂 (速率法 )测定 10 0份血清结果分别是 113± 71μm ol/ L,110± 70 μmol/ L,115± 6 4μmol/ L.P>0 .0 5。结论 :本法准确度 ,精密度 ,回收率 ,线性均良好。

酶法与苦味酸法检测血清肌酐的差异

测定血清肌酐有两种方法,一种为苦味酸法特异性差,易受多种干扰物的干扰.另一种为酶法特异性高,结果稳定,为了进一步了解两种方法,在不同肌酐浓度和不同干扰物存在时差异,对其进行对比.