苦木不同部位生物碱含量的比较研究

试验旨在比较苦木不同部位的苦木碱丁、苦木碱己和总生物碱含量差异。试验采用高效液相色谱法检测苦木14个不同部位中的苦木碱己、苦木碱丁含量,利用紫外分光光度法测定总生物碱含量。结果显示,苦木茎心材、主根心材中总生物碱和2种生物碱单体含量均较高,叶中总生物碱含量高,但2种生物碱单体含量均较低;茎皮部、茎边材、主根皮部和主根边材中苦木碱丁含量较高,而苦木碱己含量低,枝皮部、枝木材中苦木碱己含量较高,而苦木碱丁含量较低。研究表明,苦木不同部位的苦木碱丁、苦木碱己和总生物碱含量差异较大,结果可为苦木不同部位资源在禽畜健康养殖中的合理利用提供参考。

HPLC法测定苦木中3种活性成分的含量

[目的]建立苦木药材中3种活性成分苦木碱乙（1-甲氧甲酰-β-咔巴啉），苦木碱己（4-甲氧基-5-羟基-铁屎米酮）和苦木碱丁（4，5-二甲氧基-铁屎米酮）的高效液相色谱（HPLC）含量测定方法。[方法]采用HPLC，色谱柱为Agilent Eclipse Plus C18（250 mm×4.6 mm，5μm），以乙腈-0.2%磷酸为流动相梯度洗脱，流速1 mL/min，检测波长为210 nm。[结果]苦木药材中苦木碱乙，苦木碱己和苦木碱丁线性范围分别为0.012~0.365μg（r=0.9999），0.031~0.936μg （r=0.9999），0.021~0.629μg（r=0.9999）；平均加样回收率（n=6）分别为99.30%，99.07%，100.17%。[结论]该方法简单快捷，稳定可靠，可作为苦木药材的质量控制方法。

苦木组织培养与快速繁殖技术研究

针对苦木扦插生根困难,嫁接成本高且受季节的限制,播种繁殖发芽率不高,在短期内无法提供大量苗木等问题,提出了以苦木优良单株的带芽茎段为外植体,进行不同浓度6-苄氨基腺嘌呤(6-benzylaminopurine,6-BA)、萘乙酸(naphthalene acetic acid,NAA)和3-吲哚丁酸(indole-3-butyric acid,IBA)的激素组合实验,通过筛选最佳外植体消毒方法、初代培养基、增殖培养基和生根培养基等,建立苦木组织培养与快速繁殖的技术体系。结果表明,外植体用0.1%氯化汞处理6.5 min,消毒效果最佳,褐化率和污染率分别为16.67%和21.67%。最适宜的初代培养基为DKW(Driver-Kuniyuki-Walnut)+2.50%蔗糖+0.80%琼脂+1.00 mg/L 6-BA+0.10 mg/L NAA,30 d后腋芽萌发率达76.67%。最适宜的增殖培养基为DKW+2.50%蔗糖+0.60%琼脂+3.00 mg/L 6-BA+0.10 mg/L NAA,35 d后增殖系数达5.67。最适宜的生根培养基为DKW+2.50%蔗糖+0.80%琼脂+1.00 mg/L IBA+1.00 mg/L NAA,35 d后生根率可达100.00%。选取健壮组培苗进行移栽,成活率可达95.00%以上。该研究能用于苦木的种质资源保护和工厂化生产。

苦木生物碱提取及其复方注射液的安全性研究

【目的】筛选出苦木中生物碱的最佳提取方法及研究复方苦木注射液的安全性,为优化苦木生物碱有效成分的提取工艺及开发出能有效治疗畜禽大肠杆菌病的复方中药注射液奠定基础。【方法】采用高效液相色谱法对乙醇回流提取法、乙醇渗漉提取法和酶解—乙醇渗漉提取法提取的苦木生物碱进行含量测定并比较,同时对昆明小鼠进行口服和腹腔注射复方苦木注射液的急性毒性试验,测定半数致死量(LD5)0。【结果】酶解—乙醇渗漉提取法提取的苦木总生物碱、苦木碱己和苦木碱丁含量分别为3.10±0.22、0.30±0.06和0.05±0.01mg/mL,均极显著高于乙醇回流提取法和乙醇渗漉提取法(P<0.01)。昆明小鼠口服复方苦木注射液的给药剂量为10000mg/kg时,小鼠仍健康存活;腹腔注射给药的LD50=2336mg/kg,安全性评价为基本无毒物质。【结论】酶解—乙醇渗漉可作为复方苦木注射液中苦木生物碱的规模化提取方法,复方苦木注射液具有毒性小、无传染、无残留、无耐药性等优点,可在畜禽业中代替抗生素对大肠杆菌等细菌性传染病进行防治。

苦木主要生物碱成分的分离及肠道微生物的转化研究

用乙醇室温浸泡提取苦木,浓缩乙醇后得到提取物,提取物经酸溶碱沉后,用乙酸乙酯萃取碱水液,浓缩乙酸乙酯得到总生物碱。总碱通过硅胶柱层析分离纯化,得到一化合物,经核磁鉴定为苦木酮。对苦木中苦木酮的含量进行了测定,并对苦木酮进行了人源肠内菌转化研究,结果显示苦木酮在人源肠道微生物及微生物分泌的酶作用下发生结构变化,转化成活性增强的苦木碱丁。

数据挖掘联合网络药理学探讨苦木抗肿瘤活性研究及验证

采用数据挖掘、网络药理学和体外验证对苦木抗肿瘤作用机制的初步探讨.通过文献检索和中药系统药理学数据库建立了苦木化学成分库,并根据口服利用度和药物相似性筛选出有效成分.使用Swiss Target Prediction数据库确定了苦木的潜在作用靶点,并通过Metascape进行GO和KEGG通路富集分析.利用STRING数据库构建了蛋白互作网络,并使用Cytoscape软件进行可视化.在CTD数据库中聚焦疾病相关性,并在KEGG和CBPortal数据库中预测了抗肿瘤机制.MTT比色法实验验证了苦木对多种癌细胞系的抑制作用.苦木中共检索得到53种化学成分,筛选出5种主要活性成分,并确定了309个潜在作用靶点.KEGG通路分析揭示这些靶点主要涉及癌症相关的信号途径.网络分析表明苦木可能对子宫癌、非小细胞肺癌和食道癌有影响.体外实验验证了苦木对几种癌细胞系显示出浓度依赖性的抑制作用.

苦木提取物对肉鸡生长性能、屠宰性能、免疫功能及抗氧化性能的影响

为研究苦木提取物(PQE)替代抗生素对肉鸡生长性能、免疫功能、屠宰性能以及抗氧化性能的影响,试验选取300只体重相近的1日龄肉仔鸡为研究对象。对照组饲喂基础日粮,PQE1、PQE2和PQE3组分别在基础日粮中添加100、200、400 mg/kg的苦木提取物,抗生素组在基础日粮中添加250 mg/kg的金霉素(含量20%),试验期为42 d。结果表明:与对照组相比,PQE2组的平均日增重提高了6.3%(P <0.05),平均日采食量提高了2.2%(P <0.05),料重比降低了3.9%(P <0.05)。肉鸡的屠宰率与对照组相比均有提高,其中PQE2组差异显著(P <0.05)。PQE1和PQE2组的半净膛率分别较对照组提高3.05%和2.69%(P <0.05)。各试验组的全净膛率较对照组均有提高,其中PQE2组提高了4.32%(P <0.05)。各试验组的脾脏指数与对照组相比均有所增加,但差异不显著(P> 0.05)。法氏囊指数增加显著(P <0.05),PQE2组较对照组增加了19.05%。胸腺指数与对照组相比增加不明显(P> 0.05)。肉鸡血清抗氧化性能中,丙二醛(MDA)水平呈现下降趋势(P <0.05),其中PQE3组下降了19.15%,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)和超氧化物歧化酶(SOD)水平也高于对照组。综上所述,在日粮中添加200 mg/kg苦木提取物对肉鸡的生长性能、免疫功能、屠宰性能和血清抗氧化性能效果最佳。

臭椿中新苦木苦素的结构鉴定

采用现代色谱和波谱技术 ,对采自甘肃省甘谷县的臭椿 (Ailanthusaltissima)根皮进行化学成分研究。从其乙醇提取物中分离得到 2个化合物 ,确定了它们的化学结构。二者均为未见报道的新臭椿苦内酯 ,命名为1α ,11α_epoxy_2 β ,11β ,12 β ,2 0_tetrahydroxypicrasa_3,13_ (2 1)_dien_16_one和 1α ,11α_epoxy_2 β ,11β ,12α ,2 0_tetrahydroxypicrasa_3,13_ (2 1)_dien_16_one。并对其抗癌活性进行了初步测试。

自苦木中得到一种新的苦味素——苦树内酯

自苦木科(Simaroubaceae)植物苦木(Picrasma quassioides)的茎心的乙醇提取物中得到二个苦味素类成分,经理化常数和光谱(UV, IR, NMR和MS)分析,确定其中之一为新的化合物,命名为苦树内酯(kusulactone),其结构为式(Ⅰ)所示;另外还分得已知物苦木内酯F(nigakilactone F)(Ⅰ)和β-谷甾醇(β-sitosterol)。

酸性染料比色法测定苦木注射液总生物碱含量

本研究旨在建立一种适用于测定苦木注射液中总生物碱舍量的酸性染料比色法,以替代现行部颁标准的重量法.以苦木注射液中含量最高的铁屎米酮型生物碱苦木酮碱(4-甲氧基-5羟基铁屎米酮,C_(15)H_(10)N_2O_3)为对照,以溴甲酚绿为酸性染料,在pH值为5.0的缓冲液中与生物碱生成有色离子对,以氯仿萃取,在420 nm处测定吸光度,根据供试与对照的吸光度比值计算供试品的总生物碱含量.苦木酮碱在10.0~49.8μg/mL浓度范围内与吸光度呈良好线性关系,回归方程为A=0.011 7C+0.169 2(r=0.993 3),平均回收率99.1%,相对标准偏差(RSD)1.4%(n=9);该方法对10批苦木注射液总生物碱含量测定的结果与重量法无显著性差异(P=0.82).该方法具有灵敏度高、选择性好、易于重现的优点,适于替代现行重量法应用于苦木注射液的总生物碱含量测定.

苦木茎的化学成分

采用硅胶、ODS和凝胶等柱色谱方法对苦木(Picrasma quassioides Bennet)干燥茎的化学成分进行分离纯化,通过NMR、MS等波谱技术鉴定了17个化合物,包括6个β-咔巴啉类生物碱:1-methoxycarbonyl-β-carboline(1),1-carbamoyl-β-carbolin(2),4-methoxy-β-carboline-1-carboxylic acid methyl ester(3),1-ethoxycarbonyl-β-carboline(4),1-ethyl-β-carboline(5),cordysinin C(6),5个铁屎米-6-酮类生物碱:4,5-dimethoxycanthin-6-one(7),11-hydroxycanthin-6-one(8),5-hydroxycanthin-6-one(9),5-hydroxy-4-methoxycanthin-6-one(10),canthin-6-one(11);2个铁屎米-5,6-二酮类生物碱:3-methyl-4-methyoxycanthin-5,6-dione(12),3-methylcanthin-5,6-dione(13);3个倍半萜类化合物:10α-hydroxycadin-4-en-al(14),canangaterpenes III(15),15-oxo-T-cadinol(16),1个甾体类化合物androsta-1,4-diene-3,17-dione(17)。其中化合物16为新的天然产物,化合物5、6和14~17为首次从苦木中分离鉴定。

苦木注射液总生物碱及苦木酮含量测定研究

建立苦木注射液总生物碱及单体有效成分苦木酮的含量测定方法,为该品种质量控制提供可靠的技术手段.根据苦木生物碱类成分的紫外-可见吸收光谱特征,选择以苦木酮为对照,300 nm为测定波长,直接光度法测定苦木注射液中总生物碱含量,线性范围为5~25μg/mL;反相高效液相色谱法测定苦木酮含量,在30℃柱温下,以乙腈-水(含0.1%乙酸)26∶74为流动相进行等度洗脱,检测波长为254 nm,苦木酮在5~30μg/mL浓度范围内与色谱峰面积呈良好线性关系(y=51.83x-60.11,r=0.999 8).系统的方法验证结果表明,所建立的2个含量测定方法专属性、精密度、准确度和耐用性良好,均符合药品质量标准的要求,适用于本品的质量控制;测得有效期内苦木注射液的总生物碱含量以苦木酮计平均为280μg/mL(RSD 7.0%,n=12),苦木酮含量平均为13.8μg/mL(RSD16.3%,n=20).

苦木化学成分和药理作用研究进展

苦木为苦木科苦木属植物,具有较高的临床应用价值。本文综述了近年来苦木的化学成分及药理作用研究进展,为苦木的进一步研究和开发利用提供参考。

苦木生物碱的化学研究

目的研究苦木生物碱的化学成分。方法用硅胶和Sephadex LH-20进行色谱柱分离,通过理化性质、光谱数据鉴定结构。结果鉴定了16个生物碱,分别是:5-甲氧基-铁屎米酮(Ⅰ)、11-羟基-铁屎米酮(Ⅱ)、铁屎米酮(Ⅲ)、4,5-二甲氧基-铁屎米酮(Ⅳ)、4-甲氧基-5-羟基-铁屎米酮(Ⅴ)、3-甲基-铁屎米-2,6-二酮(Ⅵ)、1-甲酰-4-甲氧基-β-咔巴啉(Ⅶ)、1-甲氧基-β-咔巴啉(Ⅷ)、1-乙基-4,8-二甲氧基-β-咔巴啉(Ⅸ)、1-甲氧甲酰-4-羟基-β-咔巴啉(Ⅹ)、1-甲基-4-甲氧基-β-咔巴啉(Ⅺ)、1-乙氧甲酰-β-咔巴啉(ⅩⅡ)、1-甲酰-β-咔巴啉(ⅩⅢ)、1-甲氧甲酰-β-咔巴啉(ⅩⅣ)、1-乙基-4-甲氧基-β-咔巴啉(ⅩⅤ)和1,2,3,4-tetrahydro-1,3,4-trioxo-β-carboline(ⅩⅥ)。结论化合物Ⅺ是首次从自然界植物中分离得到,化合物Ⅱ、Ⅷ、ⅩⅤ是首次从该属植物中分离得到。

鸦胆子苦木内酯类成分及其药理活性研究进展

鸦胆子(Fructus Bruceae)为苦木科植物鸦胆子(Brucea javanica L.Merr.)的干燥成熟果实,常用于痢疾、肿瘤、疟疾以及疔毒等的治疗,外用可治赘疣、鸡眼。苦木内酯类化学成分是鸦胆子主要活性成分,具有抗肿瘤、抗炎、抗寄生虫、抗病毒、抗菌和降血糖等多种药理活性。鉴于鸦胆子的广泛药理活性,为更好地开发利用其药用价值,该文就鸦胆子的有效成分——苦木内酯类成分及其相关药理活性的研究进展作一简要综述。

苦木对HepG-2细胞增殖抑制作用及机制的研究

目的:探讨苦木提取物对人肝癌细胞HepG-2的生长抑制作用。方法:MTT比色法检测苦木提取物在不同浓度(6.25、12.5、25、50、100μg/mL)及不同时间(24、48、72h)对人肝癌细胞HepG-2的生长抑制作用。利用TUNEL法测定探讨苦木提取物诱导人肝癌细胞HepG-2的效果。结果:苦木提取物对人肝癌细胞HepG-2的生长抑制作用随着药物浓度的升高和作用时间的延长而增强,且提取物对肿瘤细胞有显著的凋亡效应,而在对照组未见有显著的凋亡现象。结论:苦木的醇提物能有效抑制人肝癌细胞HepG-2细胞的生长,其具体作用机制尚需进一步的研究。

鸦胆子属植物苦木内酯类化合物的研究进展

苦木内酯类化合物是鸦胆子属植物中主体特征化学成分。近年来对此类化合物的广泛研究发现其具有多种生物活性,如杀虫止痢、抗疟、抗肿瘤、抗白血病、抗病毒、抗食素、抗炎以及降低血糖等作用。系统查阅SpringerLINK、Elsevier SD、EBSCO、Wiley-Blackwell等英文数据库以及CNKI学术文献总库,1967年至2011年共有80篇与鸦胆子属植物苦木内酯研究相关的参考文献,其中国外文献57篇,国内文献23篇。本文从结构类型、构效关系、生物活性等方面综述其研究进展,为系统地研究苦木内酯类化合物结构、及基于苦木内酯类化合物的新药发现和药物设计提供参考。

苦木生物碱体外抑制大肠杆菌效果的研究

[目的]测定苦木生物碱对大肠杆菌C249、WM和YL株的体外抑菌效果。[方法]采用平板培养法制备菌液,用微量稀释法测定最小抑菌浓度,用杯碟法进行体外抑菌试验。[结果]脂溶性苦木生物碱在体外对大肠杆菌有较强的抑制作用,对大肠杆菌C249、WM、YL株的抑菌圈直径分别为19.07±0.232、0.77±0.59、23.00±0.21 mm,属高度敏感,最小抑菌浓度分别为3.2、1.6和1.6 mg/ml。水溶性苦木生物碱对上述菌株几乎无抑菌作用,其抑菌圈直径均小于13 mm,属低度敏感。[结论]脂溶性苦木生物碱对大肠杆菌标准强毒株的体外抑菌效果优于硫酸黄连素,与痢菌净和氧氟沙星相当,比氟苯尼考略差,但对在广西分离到的强毒株WM和YL株的体外抑菌效果也明显优于硫酸黄连素、痢菌净和氧氟沙星,与氟苯尼考相当。

RP-HPLC测定苦木生物碱体外对磷酸二酯酶4的抑制活性

目的:建立使用高效液相色谱法体外测定磷酸二酯酶活性的方法,测定分离自中药苦木的单体生物碱体外对磷酸二酯4(PDE4)的抑制活性。方法:从猪血中性粒细胞中制备PDE4,以环腺苷酸(cAMP)为反应底物,使用高效液相色谱法,测定反应底物减少的量,从而测定受试药物对PDE4的抑制活性。阳性药物为Rolipram。色谱条件:Discovery C_(18)反相色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相为甲醇-pH 6.6磷酸缓冲液(10:90);流速为1.0mL·min^(-1);柱温30℃;检测波长254nm。结果:底物cAMP分离良好,无干扰,cAMP浓度在0.5～8.0μmol·L^(-1)时,与相应峰面积呈良好线性关系。PDE4酶样在10～60μL与活性呈良好的线性关系。方法的平均回收率95.7%。4-甲氧基-5-羟基铁屎米酮、4,5-二甲氧基铁屎米酮、3-甲基铁屎米-2,6-二酮的IC_(50)分别为35.4,30.2,27.2μmol·L^(-1)。结论:苦木中分得的单体生物碱对自猪血中性粒细胞中分离的PDE4有明显的抑制作用。

苦木化学成分研究

运用各种柱色谱和重结晶等方法对苦木Picrasma quassioides(D.Don)Benn.进行分离纯化,得到五个化合物。通过NMR等现代波谱学方法和技术鉴定化合物的结构分别为:高丽槐素-3-O-β-D-葡萄糖苷(trifolirhizin,1),高丽槐素(maackiain,2),3',7-二羟基-4'-甲氧基异黄酮(3',7-dihydroxy-4'-methoxyisoflavone,3),7-羟基香豆素(umbelliferone,4)和大黄素(emodin,5)。五个化合物均为首次从该属植物中分离得到。