响应面试验优化苦杏仁粕中苦杏仁苷提取工艺及其高效离心分配色谱纯化

为实现苦杏仁资源的高效利用,以带皮生杏仁为原料,首先研究热烫去皮对苦杏仁苷含量的影响,然后采用响应面试验优化了超声辅助提取压榨脱脂苦杏仁粕中苦杏仁苷的工艺条件,应用高效离心分配色谱分离制备高纯度苦杏仁苷。结果表明:按料液比1∶5(g/mL)加入沸水,煮沸10 min,能够较好地达到灭酶保苷的目的,苦杏仁苷含量为(4.72±0.14)%;压榨脱脂苦杏仁粕中苦杏仁苷最佳提取工艺条件为73%乙醇溶液、液料比8∶1、超声温度70℃、提取时间20 min、提取2次,苦杏仁苷的提取率达8.03%;高效离心分配色谱纯化苦杏仁苷的最佳条件为以正丁醇-乙酸乙酯-甲醇-水(2.5∶0.625∶0.5∶4,V/V)为溶剂体系,上相为固定相,下相为流动相,转速900 r/min,流速2.0 mL/min,分离纯化得纯度为96.14%的苦杏仁苷。

葡萄糖修饰苦杏仁粕谷蛋白糖基化反应条件的优化

为提高苦杏仁粕谷蛋白溶解性,采用糖基化方法改性修饰。该试验选用葡萄糖进行接枝改性,考察反应温度、反应时间、pH值、蛋白与糖质量比对葡萄糖改性蛋白溶解度的影响。在单因素试验的基础上,通过Box-Behnken响应面法确定葡萄糖改性蛋白的制备工艺。结果表明,优化后工艺条件为反应温度63℃、反应时间0.6 h、pH 9.4、蛋白与糖质量比1∶2。在此条件下,葡萄糖改性蛋白溶解度为96.24%。