响应面法优化苦水玫瑰精油提取后废弃物中总黄酮分离纯化工艺及抗氧化活性研究

目的:探讨响应面法优化苦水玫瑰精油提取后废弃物中总黄酮的分离纯化工艺及抗氧化活性,为回收利用苦水玫瑰精油提取后废弃物中的总黄酮提供依据。方法:通过静态实验研究D101型树脂对苦水玫瑰精油提取后废弃物中黄酮类化合物的吸附和解析能力,之后在单因素动态实验的基础上,采用响应面法优化苦水玫瑰精油提取后废弃物中总黄酮分离纯化工艺参数。在此基础上,以维生素C(VC)为对照,研究纯化后总黄酮对ABTS+·、DPPH·、·OH的清除能力。结果:静态实验吸附量1.83 mg/g,吸附率86.10%,洗脱率88.07%,说明D101型树脂对苦水玫瑰精油提取后废弃物中黄酮类化合物有较好的吸附和解析能力;响应面法优化的动态吸附工艺参数为上样液p H2.12、上样液质量浓度10.4 mg/L、上样液流速1.72 m L/min,吸附率为95.06%;用60 m L无水乙醇溶液洗脱,解析率达到98.30%;分离纯化后的总黄酮纯度可达5.651%;纯化后的总黄酮对ABTS+·、DPPH·、·OH清除作用的IC50分别为:0.03、0.1、8μg/m L,最大清除率分别为:98.96%、89.76%、65.45%,可以看出废弃物中总黄酮具有较好的抗氧化活性。

苦水玫瑰精油对B16细胞中黑色素合成的影响及机制研究

本文研究苦水玫瑰精油对小鼠B16黑素瘤细胞中黑色素合成的影响,并探讨其作用机制,为苦水玫瑰精油作为天然活性物质的开发应用提供实验依据。采用气相色谱与质谱联用技术(GC-MS)分析苦水玫瑰精油中的挥发性物质成分,研究对象为体外培养的小鼠B16细胞,构建α-黑素细胞刺激素(α-MSH)诱导的黑色素高表达细胞模型;经不同质量浓度的苦水玫瑰精油干预后,对B16细胞进行台盼蓝染色观察,采用CCK8法测定苦水玫瑰精油对黑色素细胞活力的影响;分别采用酶联免疫吸附法(ELISA)和多巴氧化法分析B16细胞中的黑色素含量和酪氨酸酶(Tyr)活性的变化;利用质量浓度为2 g/L的苦水玫瑰精油分别处理B16细胞12,24和48 h,通过实时荧光定量PCR(quantitative Real-timePCR,qRT-PCR)以及蛋白免疫印迹检测(Westernblot)实验测定B16细胞内环磷酸腺苷(cyclicadenosine monophosphate,cAMP)的反应元件结合蛋白(CRE-bindingprotein,CREB)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAP kinase,p38MAPK)、细胞外调节蛋白激酶(extracellularsignal-regulatedkinases,ERK)与小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)的表达情况,探究苦水玫瑰精油对黑色素合成途径的影响。qRTPCR实验结果显示,苦水玫瑰精油处理B16细胞48 h后细胞内MITF基因的表达被显著抑制,MITF基因的表达下调了76%,CREB,p38 MAPK的表达也被显著抑制,其中抑制率分别达到54%,41%,而ERK1与ERK2的表达随时间延长而逐渐升高;Western-blot实验也得到相似结果,CREB,p38 MAPK蛋白与磷酸化表达水平的变化趋势与MITF相一致,随着时间增加表达量随之减少,而ERK蛋白表达水平随着处理时间的增加而逐渐升高。表明苦水玫瑰精油可以通过抑制上述三条信号途径下调MITF的表达,从而减少细胞内黑色素含量。

两个产地的苦水玫瑰精油理化指标和香气成分分析

首次比较分析了甘肃苦水镇、西藏达孜县两个产地的苦水玫瑰精油理化指标和香气成分,结果表明:两种精油均为浅黄色液体,具有浓郁的玫瑰花香,其理化指标符合标准要求。从甘肃苦水玫瑰精油和西藏苦水玫瑰精油中分别鉴定出74种和68种成分。两种苦水玫瑰精油的香气成分在种类和含量上均存在差异,甘肃苦水玫瑰精油特有成分有乙二醇甲醚乙酸酯、乙醇、戊醛、3-庚烯-2-酮、正己醛5种。通过对不同产地的苦水玫瑰精油理化指标和香气成分进行对比分析,可为苦水玫瑰的产地优化和进一步开发提供理论依据。

改进苦水玫瑰精油质量途径初探

通过气相色谱-质谱联用法(GC-MS)对不同年份的苦水玫瑰精油和大马士革玫瑰精油的化学成分进行分析,从它们在化学成分及相对含量上的差异比较出发,较系统地探讨了苦水玫瑰精油与大马士革玫瑰精油,以及不同年份苦水玫瑰精油之间的质量差异,提出了玫瑰种植规模化、加工规范化和产品质量控制规格化的思路,对于提升苦水玫瑰精油的品质及保持产品质量的稳定性具有参考价值。