龙胆苦甙上调大鼠LC3Ⅱ表达促进自噬缓解非酒精性脂肪性肝炎

目的明确龙胆苦甙对大鼠非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)的疗效,并初步探讨LC3Ⅱ基因及自噬在其中所起的作用及机制。方法建立SD大鼠NASH模型,分为:正常对照组、模型对照组、龙胆苦甙组、龙胆苦甙+3-MA组、二甲双胍阳性对照组,每组8只大鼠。给予相应治疗和处理4周后,通过q-PCR及Western blot分别检测大鼠肝组织LC3Ⅱ、LC3Ⅰ的mRNA和蛋白质表达,HE染色检测肝组织病理学情况,结合大鼠血清的血脂(CHOL和TG)、谷丙转氨酶以及炎症因子(IL-1β和TNF-α)水平的变化,评价龙胆苦甙对大鼠NASH的治疗效果,并初步探讨LC3Ⅱ及自噬在这一过程中所起的作用和机制。结果(1)正常对照组肝小叶结构正常,未见脂肪变及炎症损伤;模型对照组肝细胞索结构紊乱,出现严重肝脂肪变及炎症损伤,并可见点、片状坏死形成;龙胆苦甙组、二甲双胍阳性对照组肝脂肪变及炎症损伤均有所减轻;龙胆苦甙+3-MA组肝脂肪变和炎症损伤较龙胆苦甙组明显加重,肝小叶结构紊乱,坏死增多。(2)模型对照组ALT、CHOL、TG、IL-1β、TNF-α水平均较正常对照组升高,龙胆苦甙组、二甲双胍阳性对照组的ALT、CHOL、TG、IL-1β、TNF-α水平一定程度上得到逆转,而龙胆苦甙+3-MA组ALT、CHOL、TG、IL-1β、TNF-α水平又较龙胆苦甙组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)模型对照组大鼠肝组织LC3ⅡmRNA和蛋白质表达较正常对照组明显下调,这一趋势在龙胆苦甙组和二甲双胍阳性对照组中出现逆转,而龙胆苦甙+3-MA组的LC3ⅡmRNA和蛋白质表达又明显下调,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论龙胆苦甙可缓解大鼠NASH相关肝损伤,其机制可能与龙胆苦甙上调肝组织LC3Ⅱ表达从而促进了自噬有关。

龙胆科生药中2种苦甙的含量测定

报道龙胆科植物５属３２种５９个产地的生药，加甲醇超声后，直接用ＨＰＬＣ法测定了獐牙菜苦甙（ｓｗｅｒｔｉａｍａｒｉｎ）和龙胆苦甙（ｇｅｎｔｉｏｐｉｃｒｏｓｉｄｅ）的含量．流动相：１０％甲醇→５０％甲醇梯度洗脱，柱温：５０℃，内标：３－（邻－甲氧基－苯氧基）１，２－丙二醇（ｇｕａｉｆｅｎｅｓｉｎ），检测波长：２５４ｎｍ，流速：１ｍＬ／ｍｉｎ，进样５μＬ．获得满意结果．

中药龙胆中龙胆苦甙、当药苦甙和当药甙的分离与鉴定

本文报告中药龙胆中主要有效成分龙胆苦甙、当药苦甙和当药甙的提取、分离与精制方法。结果表明,应用聚酰胺柱色谱法能满意地分离上述三种苦甙;并应用此法,从东北龙胆Gentiana manshurica Kitag的地下部分分得龙胆苦甙和当药苦甙,从黑龙江汤原产的粗糙龙胆Gentiana scabra Bunge的地下部分得到龙胆苦甙、当药苦甙和当药甙。对上述三种苦甙及其四乙酰化物均做了质谱分析,并总结了它们的主要质量裂解规律。

藏药秦艽、麻花艽中落干酸和龙胆苦甙的HPLC法含量测定

应用反相高效液相色谱法同时测定藏药秦艽、麻花艽中落干酸、龙胆苦甙含量。并比较了加热回流提取及超声提取两种方法对分析结果的影响。还测定了两种藏药全草及根、茎、叶。

粗茎秦艽不同部位龙胆苦甙含量的分析

采用高压液相法分析了栽培粗茎秦艽不同部位的有效药用成分龙胆苦甙 (gentiopicrin)的含量 ,并与野生麻花秦艽、达乌里秦艽龙胆苦甙的含量相比较。结果表明粗茎秦艽根、茎、叶均具有较高的开发利用价值 ,为合理开发利用粗茎秦艽提供了科学依据。

橄榄苦甙的NMR数据解析

对橄榄苦甙进行了１Ｈ和１３Ｃ ＭＮＲ检测，通过 ＤＥＰＴ和１Ｈ－１Ｈ ＣＯＳＹ、ＨＭＱＣ、ＨＭＢＣ、ＮＯＥＳＹ等 ２Ｄ ＮＭＲ对其１Ｈ和１３Ｃ ＮＭＲ数据进行了全归属和较详细的解析，并指出其 ＮＭＲ数据特征．

龙胆苦甙后处理对心脏缺血再灌注损伤的防治作用

目的观察龙胆苦甙(GPS)后处理对离体心肌缺血/再灌注损伤(I/R)的防治作用及其可能的机制。方法将30只C57BL6小鼠分为三组,即假手术组(只开胸不结扎冠状动脉左前降支),I/R组以及I/R+GPS后处理组(I/R+GPS组)。采用小鼠在体模型,小鼠麻醉后,开胸短暂结扎冠状动脉左前降支模拟缺血,缺血30 min后松开线结进行再灌注,再灌注前10 min腹腔注射给药。分别于再灌注2 h(Western blot法检测Caspase-3、Bax、Bcl-2)以及24 h(心脏超声测定EF值、TTC伊文氏蓝双染色检测心肌梗死面积以及经颈动脉取血行LDH活性检测)后处死动物。结果与假手术组比较,I/R组EF值降低,心肌梗死面积增加,血清中LDH含量增高,Caspase-3、Bax表达增高,Bcl-2表达降低(P均<0.01)。与I/R组相比,I/R+GPS组的EF值升高,心肌梗死面积减少,血清中LDH含量降低,Caspase-3、Bax表达降低,Bcl-2表达增高(P均<0.01)。结论 GPS后处理可以明显降低缺血再灌注对心脏的损伤,增加心脏收缩能力,增强抗凋亡分子Bcl-2的表达,抑制Bax以及Caspase-3所介导的心肌细胞凋亡。

秦艽中龙胆苦甙药代动力学研究

龙胆苦甙是中药秦艽的重要成分之一。在药代动力学研究中，由于它处于一个多组分的环境之中，因此其它有效成分对它的作用，就会使龙胆苦甙的吸收代谢受到影响。本文采用高灵敏的β－ＣＤ包含荧光法研究兔体内龙胆苦甙在多种成分影响下的药代动力学。结果为龙胆苦甙在兔体内符合二房室模型，各主要药代动力学参数ｔα１／２＝１．０１３４ｈ，ｔβ１／２＝６．７２５７ｈ，Ｔｍａｘ＝１．０３５ｈ，ＡＵＣ＝２７．６７μｇ·ｈ／ｍｌ。

高效液相色谱法测定紫红獐牙菜中獐牙菜苦甙的含量

本文报道了用反相高效液相色谱法分离并测定紫红獐牙菜（ＳｗｅｒｔｉａｐｕｎｉｃｅａＨｅｍｓｌ．）中獐牙菜苦甙含量的方法。生药的甲醇提取液直接进样，采用ＳｐｈｅｒｉｓｏｒｂＣ１８５μｍ柱，以甲醇－水（１：４）为流动相，流这０．８ｍｌ／ｍｉｎ，检测波长２５４ｎｍ。用外标法定量，测定了不同产地紫红獐牙菜药材和植株不同部位中獐牙菜苦甙的含量。平均回收率为１００．１％，变异系数（ＲＳＤ）为１．２％。

龙胆苦甙的人肠内菌代谢实验观察

目的 :通过离体实验观察人肠内菌对龙胆苦甙的代谢。方法 :采用人新鲜粪便厌氧培养 ,HPL C法定量测定代谢产物。结果 :龙胆苦甙经人肠内菌代谢生成龙胆碱和龙胆醛等主要产物。结论 :龙胆苦甙易被人肠内菌代谢 ,其代谢模式可能为龙胆苦甙→龙胆碱→龙胆醛。

薄层色谱扫描法测定龙胆和苦胆草片中龙胆苦甙的含量

报告用薄层色谱扫描法测定滇产龙胆生药及苦胆草片制剂中龙胆苦甙含量的方法和结果。研究表明 ,云南不同产地龙胆生药 ,含量差别最高达 4 2倍 ;不同厂家苦胆草片制剂 ,含量差别最高达 5倍 ,内在质量显然不同。龙胆苦甙是龙胆的有效成分 ,为保证药品质量和合理用药 ,应建立系统的含量控制标准 。

加工方法对龙胆生药中龙胆苦甙含量的影响

报道加工方法对龙胆生药中龙胆苦甙的影响。结果表明 :影响龙胆苦甙含量的主要因素是酶解 ,因此 ,龙胆生药加工应在采集洗净后 ,用暴晒或烘烤的方法尽快干燥 ,以避免酶解的破坏。龙胆药材加工饮片 ,浸洗时溶出和酶解均是主要因素 ,因此 ,最好是直接切段 ,不宜再浸洗。研究结果为制定合理。

紫红獐牙菜中紫药苦甙的结构

继续报道从紫红獐牙菜Sivertia punicea Hemsl,全草中分得的另八个化合物(Ⅰ～Ⅷ)的结构,经光谱解析,I的结构推定为6′-O-β-D-吡喃葡萄糖基獐牙菜甙(6′-O-β-D-glucopyranosylsweroside,Ⅰ),为一新的裂环环烯醚萜甙类化合物,命名为紫药苦甙(swertiapunimarin),Ⅱ～Ⅷ的结构分别鉴定为獐牙菜甙(sweroside,Ⅱ)、獐牙菜苦甙(swertiamarin,Ⅲ)、齐墩果酸(oleanolic acid,Ⅳ)、胡萝卜甙(daucosterol.Ⅴ)、β-谷甾醇(B-sitosterol,Ⅵ)、2,3-二羟基-1,4-苯二甲酸(2,3-dihydroxy-1,4-benzodicarboxylic acid,Ⅶ)及methylswertianin.以上均首次从该植物中得到。

龙胆苦甙对大鼠肝细胞实验性保护作用的病理观察

龙胆苦甙(Gentiopicroside)普遍存在于龙胆属植物中、龙胆属植物做为中草药在我国使用已久,本研究用四氯化碳(CCl_4)损伤大鼠离体肝和新鲜分离肝细胞体外筛选模型,从形态学的角度观察龙胆苦甙抗CCl_4化学性肝损伤作用,为临床使用天然保肝药物提供可靠的科学依据。材料和方法一、大鼠离体灌流肝实验的病理观察健康Wistar大鼠40只,分为5组。

条叶龙胆愈伤组织培养及龙胆苦甙形成

应用单因子和正交设计试验,研究了条叶龙胆(Gentiana manshurica Kitag.)愈伤组织生长和龙胆苦甙形成的适宜培养基。结果表明:对于愈伤组织生长,植物激素以 NAA 1mg/L+KT 0.5mg/L为最好,但龙胆苦甙形成的适宜植物激素为NAA1mg/L。B5培养基有利于愈伤组织生长,而龙胆苦甙在MS培养基上形成较多。正交设计试验表明:NH_4^+/NO_3^-,K^+,Ca^(2+)和蔗糖对愈伤组织鲜重、干重,龙胆苦甙含量有显著影响。但愈伤组织生长和龙胆苦甙形成,所要求的因子水平不同。在18组培养基中,7号培养基适合愈伤组织生长,而10号培养基有利于龙胆苦甙的形成。

铁、铜、硼、钼和锰对二年生粗糙龙胆中龙胆苦甙含量和产量的影响

设置了不同微量元素铁、铜、硼、钼和锰的田间小区试验,初步探讨叶面喷施微量元素对栽培2年粗糙龙胆根中龙胆苦甙含量、根折干率、产量和养分吸收的影响。结果表明,铁、铜、钼和硼显著提高粗糙龙胆根中龙胆苦甙含量,龙胆根干重和根折干率均有增加趋势,微量元素锰能提高龙胆根中龙胆苦甙含量和根折干率,但根干重下降;铁和锰能促进龙胆对硼的吸收,钼能改善龙胆铜营养。

用β－环糊精单分子胶束荧光法测定秦艽中龙胆苦甙的含量研究

用β－环糊精单分子胶束荧光法测定秦艽中龙胆苦甙的含量研究西安医科大学药学系７１００６１庞志功，汪宝琪西安８４７厂职工医院７１００４３朱慧勤龙胆科所属龙胆、三花龙胆和条叶龙胆的根中龙胆苦甙（ｇｅｎｔｉｏｐｉｃｒｏｓｉｄｅ）的测定方法有紫外分光光度法、光...

橄榄苦甙改善db/db小鼠肝脏胰岛素抵抗作用机制研究

目的:本研究主要观察橄榄苦甙(OL)改善肥胖db/db小鼠胰岛素抵抗的作用机制。方法:6-8周龄雄性db/db小鼠12只,按体质量和随机血糖随机分为OL组和模型组,每组6只,另设同周龄C57BL/6J小鼠6只为正常组。OL组灌服OL水溶液50 mg·kg-1体重,其余组给以等剂量生理盐水。治疗4周后,检测各组小鼠的空腹血糖(FBG)、胰岛素水平、计算胰岛素抵抗指数以及口服葡萄糖耐量实验(OGTT),取肝脏组织,采用RT-PCR、Western Blot检测相关基因和蛋白表达。结果:治疗4周后,与模型组比较,OL组体重、空腹血糖、血清胰岛素水平和胰岛素抵抗指数显著降低(P<0.05或P<0.01);OGTT实验后,OL组血糖明显低于模型组(P<0.01);OL组小鼠肝脏组织Ins R、IRS-1、GLUT-2 m RNA和蛋白表达显著升高(P<0.01)。结论:OL通过提高肝脏Ins R、IRS-1、GLUT-2 m RNA和蛋白的表达起到降低血糖、改善胰岛素抵抗的作用。

龙胆苦甙药理研究进展

龙胆苦甙是植物龙胆有效成分之一,属裂环烯醚萜甙类;整体动物实验和离体灌流肝及分离肝细胞实验证明其具有保肝作用,此外,还具有健胃利胆、升血糖、抗炎及兴奋中枢神经系统作用。药动学研究发现其口服吸收不良,生物利用度低,静脉注射在体内分布迅速但不广。另外,有实验表明其LD_(50)为2770mg/kg。

川东獐牙菜苦甙类成分的提取及其体外抗肿瘤作用研究

提取川东獐牙菜中的苦甙成分并观察其体外抗肿瘤作用。利用高效液相色谱分析证明川东獐牙菜中含有獐牙菜苦甙。MTT实验结果说明獐牙菜苦甙对肝癌细胞有明显的抑制作用，苦甙浓度在35～500μg／ml的时候，对肝癌细胞的抑制率可达到50％。