玉米醇溶蛋白载苦荞提取物纳米粒的制备及其性能表征

目的:为改善苦荞黄酮体内生物利用度,制备可口服的玉米醇溶蛋白载苦荞黄酮提取物的天然纳米制剂,并对其性能进行表征。方法:乙醇加热回流提取苦荞黄酮,采用反溶剂法制备苦荞提取物玉米醇溶蛋白纳米粒(TBFs①zeinNPs),以海藻酸钠(SA)作为稳定剂吸附在其表面,得到较为稳定的纳米体系并对其制备工艺进行优化,以最优制备工艺制备得到的TBFs@zeinNPs进行纳米粒径、外观形态、分散指数(PDI)、Zeta电位、包封率(EE%)、载药量(DL%)以及放置稳定性等性能进行全面表征;同时亦结合红外光谱(IR)和差示扫描量热(DSC)法对其化学结构进行表征。结果:以最优工艺制备得到的TBFszeinNPs圆整光滑,分布均匀,粒径适中(185.41±13.91nm),包封率和载药量分别达到(90±2.54)%、(8.31±0.35)%,14天内纳米粒径及包封率未发生显著变化,稳定性良好。同时红外光谱和DSC图谱结果表明苦荞提取物制备成纳米制剂后其特征峰基本被纳米材料掩盖,说明制备过程并非物理混合。结论:本研究制备得到的苦荞黄酮提取物纳米制剂性能稳定,为后续对其生物利用度研究奠定了良好基础,同时也为杂粮或中药材的提取物的新型制剂研发提供参考。

苦荞提取物的毒理学安全性

通过给小鼠和大鼠投喂苦荞提取物 ,观察了苦荞提取物的毒理学安全性。结果表明 ,苦荞提取物长期连续应用 ,对大鼠生长发育及血液学、生化、病理指标均未见明显的不良影响 。

苦荞提取物对2型糖尿病大鼠胰岛细胞凋亡的干预作用

目的:探讨苦荞提取物对2型糖尿病大鼠胰岛细胞凋亡的干预作用。方法:sprague-Dawley大鼠分为6组:正常对照组、模型组、二甲双胍组、苦荞提取物低、中、高剂量组。模型组和给药组采用高脂高糖诱导饮食。两周后,腹腔一次性注射链脲佐菌素(STZ,30 mg·kg^(-1))建立大鼠2型糖尿病模型。二甲双胍组给予300 mg·kg^(-1)剂量灌胃,苦荞提取物组分别给予250 mg·kg^(-1)、500 mg·kg^(-1)、1 g·kg^(-1)苦荞提取物灌胃。给药4周后,检测大鼠空腹血糖值和空腹血清胰岛素(FINS)值,处死大鼠,取大鼠胰脏组织,H&E染色观察形态学变化;TUNEL法观察胰岛细胞凋亡;免疫组织化学法检测细胞死亡信号转导效应酶easpase-3在胰岛中的表达。结果:与模型组比,苦荞提取物组可显著降低大鼠空腹血糖值和空腹FINS值(P<0.05)。HE结果显示苦养提取物组和二甲双胍组大鼠胰岛形态未出现明显缩小及胰岛细胞减少情况,TUNEL结果显示苦荞提取物组与二甲双胍组胰岛中胰岛细胞凋亡均明显减少,caspase-3结果显示苦荞提取物组和二甲双胍组中caspase-3表达均有下调趋势(P<0.05)。结论:苦荞提取物能够有效降低STZ诱导2型糖尿病大鼠胰岛细胞的凋亡。

苦荞酒及苦荞提取物中总黄酮含量的测定

TU-1901双光束紫外可见分光光度计光谱法测定苦荞酒、苦荞提取物中总黄酮的含量。以芦丁为对照品,黄酮类化合物中的酚羟基与三氯化铝在中性介质中生成具有特征吸收峰的有色络合物,在一定的浓度范围内,该络合物的吸光度值与总黄酮的浓度成正比,符合朗伯-比尔定律。通过精密度、重现性、回收率等实验确定了苦荞酒和苦荞提取物中总黄酮的含量测定方法,并证明了其实用性。

苦荞提取物的关键香气成分分析

采用固相微萃取(SPME)结合气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)分析苦荞提取物中的挥发性成分;同时采用气相色谱-嗅闻仪(GC-O)结合香气提取稀释分析(AEDA)确定其香气活性成分,通过对香气活性成分定量并计算其香气活性值(OAV)最终确定苦荞提取物的关键性香气成分。结果显示,SPME-GC-MS在苦荞提取物中共鉴定出92种挥发性成分,包括酯类28种、醛类7种、醇类9种、酮类7种、酸类6种、烯烃8种、烷烃20种、其他类7种;经GC-O嗅闻仪共鉴定出17种香气活性化合物,定量结果显示,苯甲醇(8637.40μg/kg),苯乙醛(3150.47μg/kg)、D-柠檬烯(3080.00μg/kg)含量较高;结合稀释因子(FD)和香气活性值(OAV)推测,苯甲醛(FD=81,OAV=5)、二甲基三硫(FD=243,OAV=48)、苯甲醇(FD=81,OAV=9)、苯乙醛(FD=729,OAV=787)、丙二酸二乙酯(FD=81,OAV=1.2)5种物质对苦荞提取物的风味贡献最大,是苦荞提取物的关键香气成分。

苦荞提取物磷脂复合物的制备工艺研究

本文以苦荞总黄酮与大豆磷脂的复合率为评价指标,采用单因素考察对苦荞提取物与大豆磷脂形成复合物的制备工艺技术条件进行系统研究,并测定复合物在正辛醇和不同pH水溶液中的表观油水分配系数。结果表明:筛选出的最佳工艺条件为,以无水乙醇为反应溶剂,提取物的浓度为1 mg/mL,提取物与磷脂的质量比为1∶2,反应温度为40℃,反应时间24 h。与原提取物比较,磷脂复合物中总黄酮的表观油水分配系数有了显著的提高。按照该制备工艺制备的复合物复合率达到80%以上,同时结果表明磷脂复合物明显改善了苦荞总黄酮的脂溶性。

水解工艺对苦荞提取物中槲皮素含量的影响及其药代动力学研究

目的:以苦荞提取物为研究对象,通过正交实验设计优化苦荞提取物中芦丁被酸水解为槲皮素的工艺条件,并结合药代动力学研究探讨酸水解工艺对苦荞提取物中芦丁和槲皮素吸收的影响。方法:以盐酸百分含量、水解时间、乙醇百分含量、水解温度作为因素设计四因素三水平正交实验优化苦荞提取物中芦丁酸水解为槲皮素的工艺条件,以该工艺进行苦荞提取物酸水解,并在水解第1、2、4、6 h取样得到不同槲皮素含量的水解产物1、2、3、4。分别灌胃大鼠200 mg/kg的苦荞提取物及各水解产物,并在不同时间点采血,以黄芩素为内标,高效液相色谱(HPLC)测定血浆中槲皮素的浓度,DAS 2.0计算主要药代动力学参数。结果:苦荞提取物芦丁酸水解的最佳工艺参数为盐酸百分含量0.91%、水解时间6 h、乙醇百分含量50%、水解温度70℃,在该工艺条件下64.11%芦丁转化为槲皮素。苦荞提取物、水解产物1、2、3、4槲皮素的AUC_(0-t)分别为(17.604±5.422)、(42.175±9.435)、(87.917±19.347)、(116.706±46.256)、(178.509±49.478)mg/L·h,C_(max)分别为(2.743±1.217)、(7.109±2.603)、(12.438±3.197)、(15.727±4.68)、(20.044±5.736)mg/L。与苦荞提取物相比,其水解产物1、2、3、4的药代动力学参数AUC_(0-t)、C_(max)具有显著性差异(p<0.05)。结论:苦荞提取物经酸水解后部分芦丁转化为槲皮素,芦丁和槲皮素在大鼠体内的累计吸收量也相应提高。

苦荞提取物成分分析及不同极性提取物对α-淀粉酶的抑制作用

采用石油醚、乙酸乙酯与正丁醇萃取获得不同极性的苦荞提取物,采用超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱法分析提取物的成分。结果表明苦荞提取物中含有大量的黄酮类物质,主要包括芦丁、槲皮素、异槲皮素及其糖苷等,还含有羟基苯甲酸等酚酸类物质。再以抑制率、抑制类型、荧光猝灭效应实验分析提取物对α-淀粉酶的抑制作用。结果表明,苦荞提取物对α-淀粉酶的抑制作用表现为乙酸乙酯相提取物、正丁醇相提取物与粗提物的结果类似,都有较为显著的抑制作用,而石油醚相提取物则没有明显且规律的抑制效果,可推断出苦荞提取物中各成分共同发挥了对α-淀粉酶活性的抑制作用,且抑制类型为非竞争性抑制。通过荧光猝灭实验得知抑制的机理为苦荞提取物中的成分与α-淀粉酶结合,从而使α-淀粉酶的荧光特性发生静态猝灭。

日粮添加苦荞提取物对绵羊背最长肌抗氧化性能的影响

苦荞含有多种有益健康的成分,其中苦荞黄酮具有较强的抗氧化性。本试验旨在研究日粮中添加苦荞提取物对绵羊背最长肌(LD)抗氧化性的影响。试验选取24只5月龄、体重(25±0.5)kg杜泊×小尾寒羊杂一代母羊,采用完全随机设计平均分为4组(对照组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组),分别饲喂含有不同苦荞提取物添加量(0、1、5、20 g/kg)的日粮。试验期80 d。试验结束后,屠宰取样,测定试验羊LD组织抗氧化性能。结果表明:试验Ⅰ组LD组织的总抗氧化能力(T-AOC)极显著高于对照组(P<0.01),试验Ⅲ组谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著升高(P<0.05),丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05);与对照组相比,试验Ⅱ组Cu-Zn SOD m RNA与蛋白表达量显著升高(P<0.05,P<0.01),试验Ⅰ组GPx4蛋白表达量显著升高(P<0.05)。综上可得,日粮中添加苦荞提取物能够改善绵羊LD抗氧化性能。

苦荞提取物对大鼠血糖及血脂的影响

目的:探讨苦荞提取物对大鼠的血糖及血脂的影响。方法:先通过链脲佐菌素建立大鼠糖尿病模型及通过喂养高脂肪高胆固醇饲料建立大鼠高脂血模型,对照组大鼠喂养正常饲料,苦荞组大鼠喂养正常饲料和苦荞提取物,分别饲养6周后,检测大鼠体内葡萄糖以及甘油三酯、胆固醇的含量并与对照组进行比较。结果:经过喂养苦荞提取物的大鼠,其血糖、甘油三酯、胆固醇的降低程度与对照组差异有统计学意义(P<0.05)。结论:苦荞提取物可降低实验性高脂血症大鼠的血脂含量及大鼠糖尿病的血糖浓度。

苦荞提取物中槲皮素在糖尿病大鼠体内的药动学研究

目的比较苦荞提取物中槲皮素在正常大鼠和糖尿病大鼠体内的药动学。方法将15只雄性SD大鼠分为模型组(n=10)和对照组(n=5)。模型组10只大鼠通过高脂高糖饲料喂养联合腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)建立糖尿病大鼠模型,灌胃苦荞提取物后取血分离血浆,采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定槲皮素血药浓度,经3P97软件处理数据。结果苦荞提取物中槲皮素在正常大鼠和糖尿病大鼠体内的药动学参数分别为峰浓度(Cmax1=1.022±0.280 mg/L)、药-时曲线下面积(AUC0-12=5.982±2.361 mg·h/L)、消除半衰期(t1/2β=32.874±11.251 h)和峰浓度1(Cmax1=1.477±0.356 mg/L)、峰浓度2(Cmax2=0.602±0.090 mg/L)、药-时曲线下面积(AUC0-12=10.248±4.103 mg·h/L)、消除半衰期(t1/2β=53.381±12.562 h),结果表明大鼠在糖尿病病理状态下槲皮素的Cmax1、Cmax2、AUC0-12明显增加,消除半衰期显著增长。结论槲皮素在糖尿病大鼠和正常大鼠体内的药动学有显著差异,可能与糖尿病大鼠的肝、肾功能受损有关,提示临床用药时应适当减小糖尿病患者槲皮素的用量。

苦荞黄酮提取物通过抑制NF-κB信号通路减轻蛛网膜下腔出血模型大鼠神经炎症和氧化应激

目的:探索苦荞黄酮提取物减轻蛛网膜下腔出血(SAH)模型大鼠神经炎症和氧化应激的作用机制。方法:将60只大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组、苦荞黄酮提取物低、中、高剂量组,每组10只。Longa分级评估神经功能缺损;干湿重法测定脑含水量;伊文思蓝染料外渗实验检测大脑血脑屏障通透性;ELISA检测血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平和脑组织中上述炎症因子及超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;Western blot检测大鼠脑皮质中细胞外调节蛋白激酶/核转录因子κB(ERK/NF-κB)信号通路蛋白表达。结果:与模型组相比,尼莫地平组和苦荞黄酮提取物中、高剂量组大鼠神经功能缺损评分、脑含水量、伊文思蓝渗出量、血清及脑组织TNF-α、IL-6和IL-1β水平、脑组织MDA水平及MMP-9、p-ERK/ERK和p-NF-κB P65/NF-κB P65蛋白量明显下降,脑组织中SOD和GSH-Px水平明显上升(P<0.05)。结论:苦荞黄酮提取物通过抑制ERK/NF-κB信号通路蛋白表达,减缓大鼠神经炎症和氧化应激反应,发挥对SAH造成的脑损伤的治疗作用。

苦荞提取物中芦丁和槲皮素的含量测定

目的:测定苦荞提取物中芦丁和槲皮素的含量,评估苦荞提取物质量。方法:Welchrom-C18色谱柱(4.6 mm×150mm,5μm),流动相甲醇-0.2%甲酸水溶液(50∶50),检测波长280 nm,柱温30℃,流速1.0 mL·min-1,进样量10μL。结果:芦丁在1.56～100.00 mg·L-1,槲皮素在1.52～97.00 mg·L-1呈良好的线性关系。平均回收率芦丁为98.49%(RSD 1.25%,n=5),槲皮素为97.87%(RSD 1.69%,n=5),芦丁的含量为18.97%±1.43%,槲皮素的含量为5.03%±0.42%。结论:该方法成功应用于苦荞提取物中的芦丁和槲皮素的含量测定。

苦荞壳提取物对高脂饲料诱导的大鼠脂肪肝的预防作用

目的观察苦荞壳提取物对高脂饲料诱导的大鼠脂肪肝的预防作用,探讨其机制.方法雄性Wistar大鼠50只,按体质量随机分为普通饲料组、高脂模型组、苦荞壳提取物高剂量组(0.825g/kg)、低剂量组(0.165g/kg)和力平之对照组(0.067g/kg).于实验后第12wk测定大鼠肝脏Ch,Tg,MDA浓度和SOD,GPX活力,并观察大鼠肝组织病理变化.结果高脂模型组大鼠肝脏Ch,Tg,MDA含量显著高于普通饲料组(P<0.01);SOD活力显著低于普通饲料组(P<0.01);GPX活力低于普通饲料组,但无统计学差异(P>0.05).与高血脂模型组相比,苦荞壳提取物各组大鼠肝组织Ch浓度显著降低,SOD活力显著升高(P<0.05),GPX活力升高,但无统计学差异(P>0.05);高剂量组Tg,MDA浓度显著降低(P<0.05),低剂量组Tg,MDA浓度降低,但无统计学差异(P>0.05).力平之组大鼠肝脏Ch降低(P<0.05),Tg,MDA含量和SOD活力无显著性变化(P>0.05);而GPX活力显著降低(P<0.05).结论苦荞壳提取物可减少高脂血症大鼠肝脏脂质沉积,降低肝脏脂质过氧化水平,提高肝脏抗氧化能力,预防脂肪肝的形成.

苦荞叶提取物对小鼠体内抗氧化酶系的调节

以苦荞叶提取物为材料，通过灌胃观察小鼠血液及各脏器中的抗氧化酶活性及脂质过氧化物的变化情况。与正常对照组相比，灌胃小鼠苦荞叶提取物能明显提高其血液、肝脏和心脏中的超氧化物歧化酶和谷胱苷肽过氧化物酶的活性，降低脂质过氧化产物丙二醛的含量，但对过氧化氢酶的活性变化无明显规律。说明苦荞叶提取物中有一定量的抗氧化物质，能有效地清除体内的自由基，具有较好的抗氧化和抗脂质过氧化作用。

苦荞籽提取物抗小鼠躯体疲劳作用初探

连续给药7 d,观察小鼠转棒耐力,以研究苦荞籽提取物抗小鼠躯体疲劳的作用.实验结果表明,苦荞籽提取物能明显延长小鼠转棒耐力时间,证实了苦荞籽提取物具有抗疲劳作用.

苦荞芽提取物的镇痛抗炎作用

目的:观察苦荞芽提取物的镇痛抗炎作用.方法:用热板法观察苦荞芽提取物对小鼠的镇痛作用,用二甲苯致小鼠耳肿胀模型,观察苦荞芽提取物对小鼠的抗炎作用.结果:苦荞芽提取物能延长小鼠舔后足潜伏期,对二甲苯所致小鼠耳肿胀有明显抑制作用,与生理盐水组比较,具有差异性(P<0.01,P<0.05).结论:苦荞芽提取物具有镇痛抗炎作用.

苦荞碱性提取物对2型糖尿病模型大鼠降糖作用研究

目的:研究苦荞碱性提取物(FTAE)对2型糖尿病大鼠的降糖作用以及对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。方法:通过高糖高脂喂养大鼠4周后腹腔注射链脲佐菌素(STZ,35 mg·kg^(-1))复制大鼠2型糖尿病模型。将成模大鼠随机均分为模型组,阿卡波糖组(32 mg·kg^(-1)),FTAE高(86 mg·kg^(-1))、低剂量(43 mg·kg^(-1))组,以健康正常大鼠作为空白对照组。灌胃给药,bid。连续给药4周后,检测大鼠空腹血糖(FPG)值,计算大鼠时间-血糖曲线下面积(AUC)。连续给药6周后,检测大鼠血清胰岛素(INS)与糖化血红蛋白(Hb Alc)水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。考察FTAE对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。结果:与模型组比较,FTAE组在给药后第6周FPG显著降低(P <0. 05或P <0. 01),FTAE高、低剂量组分别在给药后第6周和第2周开始FPG与阿卡波糖组差异有统计学意义(P <0. 05或P <0. 01)。与模型组比较,FTAE组大鼠AUC显著降低(P <0. 05或P <0. 01),FTAE低剂量组与阿卡波糖组比较差异有统计学意义(P <0. 01)。与模型组比较,FTAE高剂量组的INS、HOMA-IR、Hb Alc水平显著降低(P <0. 05或P <0. 01),FTAE低剂量组HOMA-IR水平显著降低(P <0. 05),FTAE各组与阿卡波糖组比较差异有统计学意义(P <0. 05或P <0. 01)。随着FTAE浓度的增加,对α-葡萄糖苷酶抑制率逐渐增加,半数抑制浓度为(116. 468±1. 065) mg·L^(-1),与阿卡波糖组比较差异有统计学意义(P <0. 01)。结论:FTAE对高糖高脂联合STZ诱导的2型糖尿病模型大鼠有降糖作用,其机制可能与其抑制α-葡萄糖苷酶活性有关。

苦荞D-手性肌醇提取物抑制NOX4活性及提高血管舒张作用

探讨苦荞麸皮提取物(tartary buckwheat bran extract,TBBE)D-手性肌醇改善脂毒性造成的内皮功能损伤作用。结合体外及体内实验,采用棕榈酸(palmitic acid,PA)刺激内皮原代细胞及大鼠胸主动脉血管,或高脂饲喂(high fat diet,HFD)小鼠造模,考察TBBE对内皮细胞、离体血管及小鼠血管内膜功能的影响。体外结果显示,提取物在不大于50μg/m L剂量下对内皮细胞无损伤作用;不同剂量TBBE显著抑制PA引起的细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)产生及NADPH氧化酶(NADPH oxidase,NOX)4激活;抑制因PA介导的离体血管NOX4激活,改善血管内皮依赖性舒张。小鼠体内实验结果表明,TBBE有效抑制HFD导致的小鼠血管NOX4激活及降低血清游离脂肪酸含量。但HFD组及TBBE干预均不影响小鼠血糖、附睾脂肪系数、肝脏系数及体质量。说明脂毒性明显造成内皮氧化应激,TBBE通过抑制NOX4/ROS通路保护小鼠内皮功能。

苦荞螺旋藻营养片生产工艺研究

本文以螺旋藻和苦荞提取物为主要原料生产苦荞螺旋藻营养片,对其配方、工艺、影响制片的因素、产品稳定性进行研究。结果表明,螺旋藻94%、苦荞提取物3.5%、赋形剂2.5%,采用干粉直接压片法制片,生产出的营养片外观质量稳定,符合产品质量要求,能达到良好的调节血糖的作用。