苦龙胆脂甙对肝癌细胞增殖、凋亡和迁移的作用

目的:探讨川东獐牙菜中活性成分苦龙胆脂甙(amarogentin)对肝癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法:分别用梯度浓度的苦龙胆脂甙刺激正常肝细胞系(LO2)和肝癌细胞系(Hep G2和SMMC-7721)后,利用细胞计数试剂盒检测三种细胞在12,24和48 h增殖情况;利用异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白/碘化丙啶结合流式细胞仪检测三种细胞在48 h的凋亡率;利用Transwell法检测两种肝癌细胞的迁移情况;利用实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白印记法分别检测肝癌细胞p53、AKT、核因子κB(nuclear factorκb,NF-κB)、人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,h TERT)和p38的mRNA和蛋白表达水平。结果:与正常肝细胞比较,苦龙胆脂甙能够明显地抑制肝癌细胞的增殖,并且其抑制作用存在时间和剂量依赖性。当浓度为110μg/ml刺激肝癌细胞48 h后,不仅能明显抑制肝癌细胞的迁移,而且p53的mRNA和蛋白表达明显提高,同时AKT、NF-κB和h TERT的mRNA和蛋白表达明显被抑制。结论:苦龙胆脂甙能明显抑制肝癌细胞的恶性行为,为临床辅助治疗肝癌提供新的思路。