卵巢子宫内膜异位症患者血清磷脂酰胆碱、苯丙氨酰-异亮氨酸表达水平及临床价值研究

目的探讨卵巢子宫内膜异位症(ovary endometriosis,OEM)患者血清磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine,PC)、苯丙氨酰-异亮氨酸(phenylalanyl-isoleucine,PheIL)表达水平及临床价值。方法选取2020年1月~2022年1月期间亳州市人民医院诊治的OEM患者163例为研究对象(OEM组),根据患者术后复发情况分为复发组(n=35)和未复发组(n=128)。以同期因卵巢良性疾病诊治的60例女性患者为对照组。应用高效液相色谱-串联质谱法(high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry,HPLC-MS/MS)检测各组血清PC和PheIL水平。比较不同美国生殖医学会(American Society of Reproductive Medicine,ASRM)分期、痛经程度OEM患者血清PC和PheIL水平差异。单因素及多因素COX回归分析影响OEM复发的危险因素。受试者工作曲线评价血清PC,PheIL及联合检测对OEM复发的诊断价值。结果OEM组患者血清PC(34∶3)(18.01±3.66μg/ml),PheIL(64.38±7.75 ng/ml)均高于对照组(1.66±0.47μg/ml,42.66±6.50ng/ml),差异具有统计学意义(t=34.388,18.145,均P<0.05)。ASRM分期Ⅲ~Ⅳ期的OEM患者血清PC(34∶3)(21.74±3.71μg/ml),PheIL水平(71.22±7.89ng/ml)高于Ⅰ~Ⅱ期患者(14.41±3.50μg/ml,57.79±7.60ng/ml),差异具有统计学意义(t=12.979,11.069,均P<0.05)。ASRM分期Ⅲ~Ⅳ期(OR=1.510,P<0.001),PC(34∶3)升高(OR=1.446,P<0.001),PheIL升高(OR=1.706,P<0.001)是影响OEM患者术后复发的独立危险因素,术后妊娠(OR=0.736,P<0.001)和术后用药(OR=0.749,P<0.001)是影响OEM患者术后复发的保护因素。血清PC(34∶3)和PheIL联合检测对OEM复发诊断的曲线下面积(95%CI)为0.864(0.840~0.879),大于血清PC(34∶3)和PheIL单一指标检测0.772(0.735~0.808),0.727(0.683~0.770),差异具有统计学意义(Z=4.252,5.640,均P<0.001)。结论OEM患者血清PC和PheIL水平升高,两者与ASRM分期有关,两者联合检测有助于预测OEM复发。

甜味化合物天冬氨酰苯丙氨酰甲酯及其类似物的量子化学研究

用量子化学计算从头算的HartreeFock方法,在6-31G基组水平上,对甜味剂天冬氨酰苯丙氨酰甲酯Aspartame及其类似物H—(S)—Asp(1R,2R)—c6Phe—OMe进行了研究.经几何优化得到了它们的稳定构象.用Fukui指数分析了分子中原子的反应性.根据分子的结构特征对甜味剂与受体的作用模式进行了分析.

抗FMOC-苯丙氨酰氨基己酸的单克隆抗体的制备

为了建立新的非放射性基因标记和检测体系，用化学方法合成了Ｆｍｏｃ－苯丙氨酰氨基己酸。然后将其作为半抗原，与载体蛋白偶联（通过ＥＤＣ），用于免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。取脾细胞与Ｓｐ２／０小鼠骨髓瘤细胞融合。经ＥＬＩＳＡ筛选及有限稀释法克隆化，选出一株阳性克隆，分泌专一性抗Ｆｍｏｃ－苯丙氨酰氨基己酸的抗体。用双抗体夹心法测得其亚类为ＩｇＧ１。用间接ＥＬＩＳＡ法测得腹水效价为１．６×１０－５。用竞争性ＥＬＩＳＡ法测得亲和常数为３．６×１０６Ｍ－１。

L-苯丙氨酰甘氨酸炔丙酯二肽的合成及性能研究

采用液相合成法,高产率地合成了L-苯丙氨酰甘氨酸炔丙酯二肽,用核磁共振氢谱(^(1)H NMR)、核磁共振碳谱(^(13)C NMR)和电喷雾质谱(ESI-MS)对L-苯丙氨酰甘氨酸炔丙酯二肽进行了表征。通过加入α-糜蛋白酶、失活的α-糜蛋白酶以及胰蛋白酶,研究了L-苯丙氨酰甘氨酸炔丙酯二肽的酶解性能,结果表明,L-苯丙氨酰甘氨酸炔丙酯二肽中的肽键只能被α-糜蛋白酶酶解,具有特异性。

N-(3-(2-呋喃基)丙烯酰基)苯丙氨酸的合成

针对FAPGG关键体N-(3-(2-呋喃基)丙烯酰基)苯丙氨酸(FA-PHE-OH)收率和纯度低的问题,设计以糠醛和丙二酸为起始原料,经过Knoevenagel、甲酯化、酰基化及水解反应新路线制备FA-PHE-OH。得到的最佳制备工艺条件如下,2-呋喃丙烯酸为:反应温度95℃、反应时间5h、n(糠醛)∶n(丙二酸)=1∶1.2;3-(2-呋喃基)丙烯酰基-L-苯丙氨酸甲酯为:反应温度35℃、反应时间4h、n(2-呋喃丙烯酸)∶n(L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐)=1∶1.2,本反应以SOCl_2代替BOP,收率提高76.6%,且成本大幅降低。在此条件下得到白色FA-PHE-OH产品,HPLC纯度99.5%,总收率80.2%。

布氏锥虫苯丙氨酰-tRNA合成酶在大肠杆菌中的克隆、表达、纯化及活性测定

苯丙氨酰-tRNA合成酶是布氏锥虫蛋白合成过程中的一类重要酶,以其为靶点的抑制剂可能发展成为新一代的抗锥虫药物,但此前并没有分离锥虫苯丙氨酸-tRNA合成酶的报道。本研究用大肠杆菌成功克隆表达并纯化了布氏锥虫苯丙氨酰-tRNA合成酶并进行了活性测定。首先通过PCR方法从布氏锥虫细胞基因组中分别扩增出苯丙氨酰-tRNA合成酶的α亚基、β亚基的基因,依次克隆入pCOLADuet共表达载体,然后在大肠杆菌BL21(DE3)RIPL中进行了成功表达,并采用Ni-Bind亲和层析对其进行了纯化,最后用免疫印迹进行了鉴定。此外还采用放射性同位素方法进行了酶活性测定,这为下一步进行布氏锥虫苯丙氨酰-tRNA合成酶抑制物的设计和体外筛选奠定了良好的基础。

高效毛细管电泳法分析D-苯丙氨酸与D-N-乙酰苯丙氨酸的对映体杂质含量

目的:建立高效毛细管电泳法(HPCE)测定不对称合成D-苯丙氨酸和D-N-乙酰苯丙氨酸对映体杂质含量的新方法.方法:采用HPCE法对苯丙氨酸和N-乙酰苯丙氨酸对映体的分离条件进行优化,并将该HPCE方法用于样品测定.结果:在40mmol/LTris-H3PO4(pH=2.5),60g/LS-β-CD,-15kV分离电压,20℃柱温的优化条件下,苯丙氨酸和N-乙酰苯丙氨酸对映体得到基线分离.在药物浓度为0.01～0.20g/L的考察范围内,浓度和峰面积呈良好线性,L-苯丙氨酸和L-N-乙酰苯丙氨酸的回归方程分别为:Y=1065.42X+31.02(R2=0.9989)和Y=996.02X+34.44(R2=0.9984),其中,Y为校正峰面积A/t,X为浓度(g/L).结论:该HPCE方法简单、准确,可用于苯丙氨酸和N-乙酰苯丙氨酸对映体的手性拆分和对映体杂质含量的测定.

铜(Ⅱ)-苯甲酰苯丙氨酸-邻菲罗啉混配配合物的合成、晶体结构及性质研究

Ｎ－苯甲酰苯丙氨酸（ＢｐｈｅＯ）与Ｃｕ（ｐｈｅｎ）Ｃｌ２发生取代反应，生成了铜配合扬［Ｃｕ（ＢｐｈｅＯ）２（ｐｈｅｎ）］·Ｈ２Ｏ。晶体属单斜晶系，Ｃ２／Ｃ空间群。晶胞参数为：ａ＝５．３３０（１），ｂ＝２４．５０２（２），ｃ＝２８．８３９（２），β＝９１．９５（１）°，Ｖ＝３７６４．１（８）３，Ｚ＝４，Ｆ（０００）＝１６６０，Ｄｃ＝１．４０９ｇ／ｃｍ３，μ＝０．６３９ｍｍ－１。Ｃｕ与２个ＢｐｈｅＯ配体的羧基Ｏ原子及ｐｈｅｎ分子的２个Ｎ原子形成４配位的平面四边形结构。经元素分析，ＩＲ、ＥＳＲ、ＵＶ、ＴＧ－ＤＴＡ及磁性测定，对配合物的性质进行了研究。

苯磺酰苯丙氨酸、邻菲咯啉Mg(Ⅱ)配合物的合成、晶体结构及抗菌活性(英文)

以MgCl2、苯磺酰苯丙氨酸(BPPA)和邻菲咯啉为原料,合成了一个新型镁配合物[Mg(BPPA)2(phen)(H2O)2].(phen).2(H2O)。对其进行了元素分析、红外光谱分析,并用X-射线衍射测定了它的单晶结构。结果表明:配合物属于三斜晶系,P空间群,配合物分子通过分子内和分子间氢键以及π-π堆积作用形成了一维链状结构。初步研究了配体及配合物的抗菌活性,配合物对大肠杆菌、白葡萄球菌及枯草芽孢杆菌有一定的抗菌活性,而配体却没有抗菌活性。

锌(Ⅱ)与N-苯甲酰苯丙氨酸及二胺类混配配合物的合成与表征

锌（Ⅱ）与Ｎ－苯甲酰苯丙氨酸及二胺类混配配合物的合成与表征＊沈良（杭州师范学院化学系杭州３１００１２）龚钰秋（杭州大学化学系杭州３１００２８）关键词锌（Ⅱ）Ｎ－苯甲酰苯丙氨酸二胺混配配合物合成中图分类号Ｏ６２９．７含有末端Ｎ－乙酰及Ｎ－苯甲酰残基的氨...

苯磺酰苯丙氨酸构筑的一维链状钙(Ⅱ)配位聚合物的合成、结构表征和抗肿瘤活性(英文)

在95%乙醇溶剂中,通过高氯酸钙、苯磺酰苯丙氨酸和NaOH反应,合成了一个新型的一维链状钙配位聚合物。对其进行了元素分析和红外光谱分析表征,并用X-射线单晶衍射测定了它的单晶结构。结果表明:在配合物分子中,每个钙原子分别与配体中羧酸根的4个氧原子、配位水中的2个氧原子以及配位乙醇分子中的1个氧原子配位,形成了畸变的五角双锥构型。配合物分子通过羧酸根的桥联作用形成了一维链状配位聚合物结构。初步研究了配合物对肝癌、肺腺癌、白血病和结肠癌的抗肿瘤活性。

L-脯氨酰-L-苯丙氨酸催化的直接不对称Mannich反应研究

报道了L-脯氨酰-L-苯丙氨酸和L-脯氨酰-L-苯丙氨酸/对甲苯磺酸在DMSO中0℃催化硝基苯甲醛、丙酮与4-甲氧基苯胺一锅三组分的不对称Mannich反应。以L-脯氨酰-L-苯丙氨酸和L-脯氨酰-L-苯丙氨酸/对甲苯磺酸为催化剂,产物收率分别为56%和61%,ee值分别为98%和99%。实验得出低温有利于提高反应的对映选择性,4-甲氧基苯胺是最好的胺组分,催化剂对醛的结构要求苛刻。

棕榈酰-苯丙氨酸甲酯凝胶因子的制备及其性质考察

目的合成一种自组装超分子有机凝胶因子——棕榈酰-苯丙氨酸甲酯（C16-L-Phe-OMe）,并对其进行结构表征和性质考察。方法以L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐为母核、棕榈酰氯为酰化剂,合成棕榈酰-苯丙氨酸甲酯凝胶因子,采用IR、^1H-NMR、MS等手段对其结构进行表征,并考察其熔点、在各种植物油中的最低胶凝浓度、相转变温度等凝胶行为。结果IR、^1H-NMR、MS等分析结果表明合成物质的结构为棕榈酰-苯丙氨酸甲酯,产率为73.40%,熔程为71.5～72.3℃,室温下在橄榄油、一级大豆油、葵花油、大豆油、花生油中的最低胶凝浓度分别为150、160、160、170、190g·L^-1,相转变温度随凝胶因子浓度的增加而升高。结论 C16-L-Phe-OMe的制备工艺简单,在橄榄油、一级大豆油、葵花油中具有很强的胶凝能力,是一种优良的有机凝胶因子,适于作为药物控释载体。

BOC2抑制N-甲酰肽/甲酰肽受体信号通路减轻SAP炎症损伤的机制研究

目的观察BOC-Phe-Leu-Phe-Leu-Phe(BOC2)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠血中6种线粒体N-甲酰肽(NFPs)及胰腺组织中2种甲酰肽受体(FPRs)表达的影响,探讨其减轻SAP炎症损伤的机制。方法将40只雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组,模型组,BOC2低、高剂量组(分别为0.1、0.2 mg/kg),每组10只。后3组以胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠(50 mg/kg)制备SAP模型。造模结束后0.5 h腹腔注射相应剂量药物,4 h取材。苏木精-伊红染色观察胰腺病理改变;蛋白免疫印迹法检测血浆中NFPs的表达;免疫组化法检测胰腺FPRs表达;酶联免疫吸附试验检测血浆中白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;实时荧光定量聚合酶链反应检测胰腺局部组织炎性因子的表达。结果与模型组比较,BOC2低、高剂量组胰腺出血、腺泡细胞坏死、炎性细胞浸润、水肿等病理现象均改善;胰腺病理评分,血浆线粒体NADH-泛素氧化还原酶链(MT-ND)1、MT-ND2、MT-ND3、MT-ND5、MT-ND6表达,胰腺FPRs表达,血浆及胰腺组织中3种炎性因子表达均下降(P<0.05)。结论BOC2可通过拮抗线粒体NFPs/FPRs信号通路减少炎性因子产生,减轻SAP炎症损伤。

桥联双β-环糊精对N-[4-(1-芘基)]丁酰-D/L-苯丙氨酸的手性识别及机理研究

利用紫外-可见吸收和荧光发射光谱,结合非线性最小二乘法拟合曲线以及分子力学(MM2)模拟系统地研究了手性分子N-[4-(1-芘基)]丁酰-D/L-苯丙氨酸(PDP和PLP,总称PPs)与β-环糊精(-βCD)、2-位硒桥联双-βCD(2-SeCD)和2-位碲桥联双-βCD(2-TeCD)的包结能力大小及这3个环糊精对PPs手性识别能力的差异和识别机理.研究结果表明,PPs不能与单疏水空腔的-βCD形成很好的包结复合物,与具有较长桥联链的2-TeCD结合能力最强.2-TeCD与PDP和PLP的结合常数分别为2.33×104和6.07×103L/mol,对PPs的手性识别比达到KD/KL=3.84,高于2-SeCD(KD/KL=2.61).用MM2模拟得出了PPs与这两个双环糊精形成复合物的三维结构:PPs的绝大部分位于双环糊精两个空腔之间,但是在这两个复合物中,苯环与芘环所成的二面角不同.此外,PPs与这两个双环糊精作用时均存在明显的氢键相互作用,且2-TeCD强于2-SeCD.

饮料中天冬酰苯丙氨酸甲酯及其代谢物含量的测定方法

目的:建立快速测定饮料中天冬酰苯丙氨酸甲酯及其代谢物(L-苯丙氨酸)含量的系统分析方法。方法:采用高效液相色谱法,使用ZORBAX SB-C18色谱柱,以0.1%三氟乙酸-乙腈流动相(85:15,V/V)作为分离条件,在DAD检测器210nm波长处进行检测。结果:该方法的最低检出量分别为L-苯丙氨酸0.8ng,天冬酰苯丙氨酸甲酯2.4ng,标准曲线线性良好,相关系数分别为0.9998和0.9994,回收率在96.3%～98.5%之间,相对标准偏差小于2%。结论:该法简捷、快速且灵敏度高。

N-甲酰-L-甲硫氨酰-L-亮氨酰-L-苯丙氨酸(fMLP)三肽的合成

目的合成N-甲酰-L-甲硫氨酰-L-亮氨酰-L-苯丙氨酸三肽(fMLP)。方法以L-亮氨酸、L-苯丙氨酸为原料,采用环酸酐法(NCA)合成二肽L-亮氨酰-L-苯丙氨酸;又以DCC、HOBT为偶联剂,与N-甲酰-L-甲硫氨酸进行偶联,在0.5mol.L-1的NaOH溶液中水解得到fMLP三肽。结果与结论合成的三肽fMLP总收率为44.0%。其结构经IR、1H-NMR、MS确证。

以苯丙氨酰-tRNA合成酶为靶点的新型抗结核药物高通量筛选模型的建立和应用

【目的】建立结核分枝杆菌PheRS抑制剂高通量模型,并运用此模型筛选化合物和发酵液样品。【方法】克隆和表达结核分枝杆菌PheRS蛋白并优化其酶活测定方法,在此基础上建立结核分枝杆菌PheRS抑制剂高通量筛选模型,并通过耻垢分枝杆菌作为检定菌对筛选到的样品进行抗菌活性测定及细胞毒性评价。【结果】运用此模型筛选了化合物样品11 600个,发酵液样品5 200个,筛选得到阳性化合物9个,阳性发酵液37个。而后通过耻垢分枝杆菌作为检定菌的抗菌活性测定及细胞毒性评价后,得到了6个发酵液阳性样品。【结论】建立的PheRS抑制剂模型可成功用于化合物和微生物发酵液的高效筛选,得到的6个发酵液阳性样品在酶水平和抗分枝杆菌方面均具有良好活性且毒性较低,值得进一步研究。

N-甲酰-α-L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸的合成

探讨了以N-甲酰-L-天冬氨酸酐和L-苯丙氨酸为主要原料制备甜味剂阿斯巴甜中间体(N-甲酰--αL-天冬氨酰-L-苯丙氨酸)的合成工艺.以乙酸为溶剂,N-甲酰-L-天冬氨酸酐与L-苯丙氨酸进行缩合反应生成N-甲酰--αL-天冬氨酰-L-苯丙氨酸,考察了乙酸用量、反应温度、时间和N-甲酰-L-天冬氨酸酐与L-苯丙氨酸的比例对反应收率的影响,得到优化的工艺条件为:反应温度40℃,反应时间5 h,乙酸的量为L-苯丙氨酸质量的3.53倍,N-甲酰-L-天冬氨酸酐与L-苯丙氨酸的质量比为0.95∶1,此时产物收率达95.46%.并且α-异构体与β-异构体的比例达到75∶25.