基因重组菌质粒稳定性的提高与苯丙氨酸发酵的研究

本研究用具有苯丙氨酸生产抗反馈抑制基因pheAFR、aroYFR及温度敏感型阻遏基因CI857的质粒pSY130-14和具有分配机能的低拷贝质粒pSY16,重组构建了具有苯丙氨酸生产基因系统的质粒pSY200-14,然后使其转化到大肠杆菌AT2471中,育成了基因重组菌株AT2471/pSY200-14。试验表明,该菌株质粒稳定性比原菌株AT2471/pSY130-14有较大的提高,当存在选择压时,在30—42℃范围内维持100%的高稳定性。应用此重组菌株,在2.5L通气搅拌罐进行发酵试验,在搅拌转速850rpm,通气速率1.0vvm,38.5℃和pH7.0的条件下,发酵48h苯丙氨酸生成量达14.2g/L,比原株增产11.8%。