苯乙基异硫氰酸酯胶囊多次给药人体耐受性及膀胱毒性观察研究

目的评价健康人体对多次给药苯乙基异硫氰酸酯胶囊的耐受性与安全性。方法采用单中心、双盲、随机、安慰剂对照试验。12名健康受试者参与为期28天的连续给药耐受性试验,给药组与安慰剂组各6人。口服苯乙基异硫氰酸酯胶囊30 mg/次,每天3次,连续给药28天。观察用药期间受试者临床症状、生命体征,血常规、尿常规、血生化、心电图、膀胱B超等的变化,并记录受试者每日出入量,观察和记录不良事件。结果 12名健康男性受试者接受耐受性及膀胱毒性观察,用药期间无脱落。本试验未发现药物对男性健康受试者的膀胱有明显影响。不良反应共12件,试验用药组7件,安慰剂组5件,给药组中3人诉口干。结论药物的主要不良反应是口干,考虑环境、连续用药以及受试者本身生理变化等各种因素,认为30 mg/次、每天3次用药是基本安全的。

丙烯腈对胰岛素抵抗大鼠肝细胞的毒性影响及苯乙基异硫氰酸酯的保护作用

目的:探讨胰岛素抵抗大鼠肝(insulin resistance-Buffalo rat liver,IR-BRL)细胞对丙烯腈毒性的易感性及膳食源化学物苯乙基异硫氰酸酯(β-phenylethyl isothiocyanate,PEITC)对其毒性的拮抗效应。方法:以葡萄糖消耗量、胰岛素受体底物-2(insulin receptor substrate-2,IRS-2)蛋白和胞内磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol-3 kinase,PI3K)蛋白表达量为评价指标,采用50 nmol/L胰岛素诱导处理BRL细胞24 h,构建IR-BRL细胞模型。以2.5~5.0 mmol/L丙烯腈处理IR-BRL细胞12 h,MTT法检测细胞活力和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)漏出率法检测细胞毒性,综合评价IR-BRL细胞对丙烯腈的易感性特征。以1.25~5.0μmol/L PEITC预处理丙烯腈染毒的IR-BRL细胞1 h,MTT法检测细胞活力和LDH漏出率法检测细胞毒性,评价PEITC减弱IR-BRL细胞对丙烯腈的易感效应。结果:胰岛素处理后BRL细胞的葡萄糖消耗量、IRS-2和PI3K蛋白表达量显著降低,说明IR-BRL细胞模型成功构建。相比于正常BRL细胞,2.5和4.0 mmol/L丙烯腈处理后IR-BRL细胞活力显著下降,LDH漏出率显著增多,说明IR-BRL细胞对丙烯腈毒性更为敏感。与正常染毒肝细胞相比,1.25~5.0μmol/L PEITC可显著增强丙烯腈染毒后IR-BRL细胞的活力,降低LDH漏出率。结论:IR-BRL细胞对丙烯腈毒性更为敏感,PEITC对其易感性具有减弱效应。

苯乙基异硫氰酸酯对喉癌Hep-2细胞增殖、凋亡、周期和侵袭转移能力的影响及机制

目的研究苯乙基异硫氰酸酯(PEITCs)在体外条件下对喉癌Hep-2细胞的增殖、凋亡、周期和侵袭转移能力的影响,并探讨PEITC与胞内磷脂酰肌醇激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的关系。方法培养人喉癌细胞株Hep-2和呼吸道正常细胞人支气管上皮细胞株16HBE,分别给予不同浓度的PEITC进行干预。运用细胞计数试剂盒(CCK8)检测不同浓度PEITC对喉癌Hep-2细胞人支气管上皮16HBE细胞增殖活力的影响,运用流式细胞仪检测不同浓度PEITC对喉癌Hep-2细胞和人支气管上皮16HBE细胞凋亡率的影响,运用流式细胞仪检测不同浓度PEITC对喉癌Hep-2细胞周期分布的影响,运用末端脱氧核苷酸转移酶介导的d UTP缺口末端标记(TUNEL)法检测不同浓度PEITC对喉癌Hep-2细胞晚期凋亡水平的影响,运用Transwell侵袭实验比较不同浓度PEITC对喉癌Hep-2细胞体外侵袭能力的影响。运用Western印迹法检测不同浓度PEITC对喉癌Hep-2细胞PI3K/Akt通路蛋白及其下游关键蛋白表达水平的影响。结果 CCK8法发现PEITC可以有效抑制喉癌Hep-2细胞的增殖。流式细胞仪检测发现PEITC可促进喉癌Hep-2细胞的凋亡,并诱导G2/M期阻滞。TUNEL法进一步证明了PEITC对喉癌Hep-2细胞的促凋亡作用。Transwell实验发现PEITC能够抑制喉癌Hep-2细胞的体外侵袭能力。同时,相同浓度的PEITC作用于人支气管上皮16HBE细胞,并没有引起细胞增殖和凋亡率发生显著改变。PEITC抗喉癌Hep-2细胞抗肿瘤作用可能与下调PI3K/Akt通路蛋白PI3KⅢ、PI3Kp110α、PI3Kp110β、p-Akt、磷酸化3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶(p-PDK)1及下游关键蛋白糖原合成酶激酶(GSK) 3-β、p-核转录因子(NF)-κBp65、Bcl-2和Bcl-xl表达水平相关。结论 PEITC能够有效抑制喉癌Hep-2细胞的增殖,促进细胞凋亡,诱导G2/M期阻滞及抑制细胞体外侵袭能力,其作用水平呈浓度依赖性。PEITC抗肿瘤作用可能与下调PI3K/Akt信号通路及其下游关键蛋白的表达水平相关。

高效液相色谱法测定健康人尿液中苯乙基异硫氰酸酯乙酰半胱氨酸缀合物的浓度

目的建立高效液相色谱法测定健康人尿液中苯乙基异硫氰酸酯乙酰半胱氨酸缀合物的浓度。方法色谱柱为Sepax Amethyst-C18柱,流动相为0.2%磷酸水溶液-甲醇(35∶65),流量:1 mL.min-1,紫外检测波长250 nm;氯雷他定为内标。结果尿液中代谢物在0.8～64.0μg.mL-1内线性关系良好,回归方程为y=0.08x-1.28×10-3(n=8,γ=0.9982),提取回收率大于80%,批内和批间精密度RSD<10%。结论该方法可用于测定人尿液中苯乙基异硫氰酸酯乙酰半胱氨酸缀合物的浓度。

苯乙基异硫氰酸酯对良性前列腺上皮细胞增殖凋亡的影响及相关机制研究

目的探讨苯乙基异硫氰酸酯(phenethyl isothiocyanate,PEITC)对人类良性前列腺上皮细胞(benign prostatic hyperplasia cell line,BPH-1)增殖与凋亡的影响及其相关机制。方法体外培养人永生化前列腺上皮细胞,给予6、12、24μmol/L PEITC或等量溶剂二甲基亚砜,分别作用6、12、24 h。采用CCK-8检测前列腺上皮细胞活性;Annexin V及PI标记,流式细胞技术检测PEITC处理24 h后BPH-1细胞凋亡及坏死比例;Western blotting测定PEITC处理24 h后BPH-1细胞中X染色体连锁的凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis,XIAP)及自噬相关蛋白5-12(Atg5-12)表达变化;RT-PCR检测PEITC处理24 h后BPH-1细胞中XIAP mRNA表达情况。结果(1)BPH-1细胞经过6、12、24μmol/L PEITC处理6 h后,细胞相对活性分别为71.22%、48.90%、13.57%;处理12 h后分别为52.57%、42.37%、10.11%;处理24 h后分别为36.73%、25.88%、8.39%;处理36 h后分别为33.57%、25.83%、13.06%,呈现浓度依赖性和时间依赖性。(2)BPH-1细胞在6、12、24μmol/L PEITC处理24 h后,细胞凋亡率分别为19.5%、30.4%、40.1%;与对照组相比,12、24μmol/L处理组差异均具有统计学意义(P<0.05)。(3)BPH-1细胞在6、12、24μmol/L PEITC处理24 h后,XIAP蛋白表达量及mRNA表达量均下调,Atg5-12蛋白表达量下调,并呈现剂量依赖性。结论PEITC可抑制前列腺上皮细胞增殖,通过下调BPH-1中XIAP mRNA而降低XIAP蛋白表达,促进前列腺上皮细胞的凋亡并呈现出剂量依赖性;同时PEITC下调了自噬相关蛋白Atg5-12;PEITC对凋亡与自噬的调节可能存在相关性。

芜菁子中2-苯乙基异硫氰酸酯的分析

建立芜菁子中2-苯乙基异硫氰酸酯的定性和定量分析。采用溶剂萃取法、水蒸气蒸馏法、同时蒸馏萃取法提取芜菁子中的异硫氰酸酯。以甲苯∶乙酸乙酯(5∶2)为展开剂在高效硅胶G板上展开。采用YMCPack ODS(4. 6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱,甲醇-水为流动相,梯度洗脱,检测波长242 nm。分离后的2-苯乙基异硫氰酸酯斑点清晰,分离效果好。溶剂萃取法提取的芜菁子中2-苯乙基异硫氰酸酯的含量最低(11. 93μg·g^-1),水蒸气蒸馏法提取的芜菁子中2-苯乙基异硫氰酸酯的含量最高(116. 37μg·g^-1)。本实验的方法简便、重复性好,可为芜菁子质量控制提供基础数据。

异硫氰酸苯乙酯通过PI3K-NF-κB-MMP-9途径抑制结肠癌SW480细胞的迁移和侵袭

目的观察异硫氰酸苯乙酯(PEITC)对结肠癌细胞SW480增殖侵袭的分子机制。方法体外培养结肠癌细胞系SW480,分别用10,30和50μmol/L PEITC作用24 h,MTT法检测细胞的增殖;伤口愈合实验和侵袭实验分别检测PEITC对SW480细胞迁移与侵袭的影响。荧光共振能量转移法检测基质金属蛋白酶9(MMP-9)的活性,RTPCR检测MMP-9 mRNA表达情况;Western blot检测PI3K和PTEN的表达和Akt、m TOR磷酸化,以及NF-κB核转位情况。荧光素酶报告基因分析NF-κB的活性。最后,建立裸鼠异种移植瘤动物模型,观察PEITC对异种移植瘤生长的抑制作用。结果 PEITC能在不影响细胞活性的条件下显著抑制SW480细胞侵袭和迁移(P<0.05),也能抑制MMP-9的酶活性以及mRNA表达(P<0.05)。同时PEITC能抑制PI3K的表达以及抑制Akt和m TOR磷酸化(P<0.05),上调PTEN表达。PEITC也能抑制NF-κB核转位,并能降低其活性(P<0.05)。此外,PEITC也能抑制裸鼠异种移植瘤的生长(P<0.05)。结论 PEITC是一种潜在的抗结肠癌细胞转移药物,它可能通过影响PI3K/Akt和NF-κB通路发挥作用。

油菜苯乙基异硫氰酸酯提取及气相色谱检测方法建立

本文是对油菜感菌核病的抗病品系中湘油15X98C40和抗病品系湘油15的次生代谢产物——苯乙基异硫氰酸酯提取及气相色谱（GC）分析的研究进展。其次生代谢产物在油菜感菌核病的研究中具有非常重要的意义。本文主要是针对我所研究的次生代谢产物的提取方法，阐述了在油菜中次生代谢产物的提取方法以及在气相色谱仪中所得到的峰形而得出最优方案。材料为油菜的叶片部分，通过提取样品的提取时间、放置时间、提取温度、料液比、叶片比重、有机溶剂等方面进行研究。本文主要是研究出其提取方法和气相色谱得到的峰形后，为感菌核病病前后的次生代谢产物后续试验做充分准备。最后得出最优提取方法和气相色谱仪的测定条件。探索提取异硫氰酸酯的可行性和提取条件。

异硫氰酸苯乙酯对结肠癌细胞PTEN及MMP-9表达的影响

目的观察异硫氰酸苯乙酯(PEITC)对结肠癌细胞磷酸酯酶与张力蛋白同源物(PTEN)以及基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响。方法体外培养结肠癌细胞系SW480,分别用10、30、50μmol/L PEITC作用24 h,采用实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)和荧光素酶报告基因分别检测PTEN和MMP-9 mRNA的表达;采用蛋白质印迹法(western blotting)检测MMP-9和PTEN蛋白表达。结果 PEITC可抑制MMP-9蛋白表达,同时能降低MMP-9的转录活性。此外,不同浓度PEITC处理后,可明显诱导细胞内PTEN的表达,其中50μmol/L PEITC处理后,PTEN mRNA含量可增高5.1倍。结论 PEITC能影响结肠癌细胞PTEN和MMP-9的表达。

两种异硫氰酸酯抗肿瘤的研究进展

植物化学物的生物学功能研究是食品科学的研究热点之一,来源于十字花科的2-苯乙基异硫氰酸酯和l-异硫氰酸-4-甲磺酰基丁烷因具有抗癌功能而倍受关注。该两种异硫氰酸酯能影响细胞Ⅰ相和Ⅱ相酶活性、激活Nrf2-Keap1系统、抑制细胞核因子κb及促进肿瘤细胞凋亡,起到预防癌症的作用。文章综述近年来两种异硫氰酸酯抗肿瘤机制的研究进展及应用前景,为合理开发十字花科植物保健价值提供参考。

异硫氰酸烯丙酯在冷鲜肉保鲜中的应用

目的研究异硫氰酸烯丙酯在冷鲜肉保鲜中的应用。方法在贮藏期间,利用异硫氰酸烯丙酯挥发性来处理冷鲜肉。冷鲜肉经过异硫氰酸烯丙酯及其微胶囊处理后,测量其5项理化指标(pH值、失水率、挥发性盐基氮值、硫代巴比妥酸值及菌落总数)来检测冷鲜肉在贮藏过程中的变化。结果使用异硫氰酸烯丙酯处理后的冷鲜肉的货架期较空白对照组和不含异硫氰酸烯丙酯微胶囊处理组相比时间更长,可以将冷鲜肉的货架期延长至10 d。结论异硫氰酸烯丙酯可以延长冷鲜肉货架期。

辣根风味形成优化(英文)

对辣根硫代葡萄糖苷转化为风味成分异硫氰酸酯的最优条件及挥发成分的保留方法进行了研究。酶解产物的类型和浓度受 p H值、酶解温度、时间、含水量及其它因子的影响。优化了酶解条件 ,探讨了金属离子、抗坏血酸及β-环糊精、变性淀粉、大豆蛋白对风味成分 AIT(烯丙基异硫氰酸酯 )和 PEIT(苯乙基异硫氰酸酯 )形成及保留的效果 ,比较了热风干燥和冷冻干燥对 AIT和 PEIT形成及保留的效果。研究结果表明 :辣根风味形成的最适条件是 :10 g辣根添加 5 m L p H6的缓冲液在温度 30℃条件下酶解 30 m in。添加抗坏血酸、Mg2 +、Zn2 +或外源黑芥子硫苷酶能明显增加 AIT和 PEIT含量。加入β-环状糊精及采用冷冻干燥或流化床干燥有利于 AIT和 PEIT的保留。

PEITC通过抑制结肠癌细胞PI3K/NF-κB活性而抑制MMP-9表达

目的观察异硫氰酸苯乙酯(PEITC)对结肠癌细胞基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响及其分子机制。方法体外培养结肠癌细胞系SW480,分别用10、30、50μmol/L PEITC作用24 h,划痕愈合实验和侵袭实验分别检测PEITC对SW480细胞迁移与侵袭的影响。RT-PCR检测MMP-9 mRNA的表达;Western blot检测MMP-9蛋白表达和蛋白激酶B(Akt)磷酸化。荧光素酶报告基因分析核转录因子κB(NF-κB)和MMP-9的活性。结果划痕愈合实验和Transwell小室实验结果显示,PEITC能在不影响细胞活性的条件下对SW480细胞侵袭和迁移具有一定抑制作用。同时,Western blot和RT-PCR结果证实PEITC能抑制MMP-9蛋白及mRNA表达。PEITC能抑制Akt磷酸化以及NF-κB的转录活性。PI3K抑制剂LY294002处理后,NF-κB-luc活性以及MMP-9蛋白表达显著降低。此外,不同浓度PEITC处理能显著抑制MMP-9的启动子活性。结论 PEITC是一种潜在的抗结肠癌细胞转移药物,它可能通过影响PI3K/NF-κB通路抑制MMP-9表达而发挥作用。

PEITC诱导人AML-M2白血病细胞凋亡机制的初步探讨

目的证实苯乙基异硫氰酸酯(phenethyl isothiocyanate,PEITC)诱导人急性髓系白血病(AML)M2白血病细胞系Kasumi-1细胞凋亡的效应,初步探讨PEITC诱导Kasumi-1细胞凋亡的机制。方法培养人M2白血病细胞株Kasumi-1细胞,CCK-8法检测不同浓度PEITC处理后Kasumi-1细胞的增殖抑制率;流式细胞术检测药物诱导细胞凋亡和活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成的情况;Real-time PCR及Western blot检测HO-1以及凋亡相关基因caspase3、caspase8、caspase9mRNA及蛋白水平的变化。结果 CCK-8结果显示PEITC作用Kasumi-1细胞24h、48h、72h后,细胞增殖抑制率呈现浓度-时间依赖性。流式细胞术显示PEITC能够诱导Kasumi-1细胞的凋亡。Real-time PCR及Western blot结果显示PEITC处理细胞后,HO-1表达下降,而凋亡相关基因Caspase3、Caspase8、Caspase9的表达上调。DCFH-DA探针法显示PEITC作用Kasumi-1细胞后,ROS生成增多。结论 PEITC能够促进Kasumi-1细胞凋亡,呈时间剂量梯度依赖关系;PEITC诱导Kasumi-1细胞凋亡可能通过的机制包括下调HO-1表达促进ROS生成及凋亡相关基因Caspase3、Caspase8、Caspase9的激活。

香精香料信息16则

1.天然精油作为叶菜中过氧化物酶活性的还原剂阿根廷学者 A.G.Ponce 等人在"Lebensmittel- Wissenschaft undtechnologic"(食品科技和技术)杂志2004,37(2),199-204页上用英文发表的文章报道作者评价蓝桉油、茶树油 (Melaleuca alternifolia)、蜜蜂花油(Melissa officinalis)、迷迭香油、丁香油和柠檬油降低有机叶菜提取物过氧化物酶活性的情况。