苯唑西林和头孢西丁纸片扩散法现行耐药折点判断凝固酶阴性葡萄球菌甲氧西林耐药性的评价

目的评价苯唑西林和头孢西丁纸片扩散法现行耐药折点在判断凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)甲氧西林耐药性中的准确性。方法苯唑西林(1μg)和头孢西丁(30μg)纸片扩散法测定149株临床分离的CNS对甲氧西林的耐药性,量取两种纸片的抑菌环直径。对苯唑西林组分别以≤14mm、≤15mm、≤16mm、≤17mm(CLSI/NCCLS2004标准)为耐药折点,对头孢西丁组分别以≤21mm、≤22mm、≤23mm、≤24mm(CLSI/NCCLS2004年标准)为耐药折点,与mecA基因检测结果比较,评价两种纸片扩散法在各折点对耐甲氧西林CNS判断的敏感性和特异性。结果与mecA基因检测结果比较,苯唑西林纸片扩散法在不同的耐药折点判断耐甲氧西林表皮葡萄球菌的敏感性分别为52.3%、75.0%、90.9%、100%,特异性都为100%,判断耐甲氧西林非表皮葡萄球菌CNS的敏感性分别为66.7%、79.0%、90.1%、97.5%,特异性分别为100%、100%、100%、94.4%;头孢西丁纸片扩散法在不同耐药折点判断耐甲氧西林表皮葡萄球菌的敏感性分别为45.5%、70.1%、90.9%、100%,特异性都为100%,判断耐甲氧西林非表皮葡萄球菌CNS的敏感性分别为83.6%、91.8%、97.3%、100%,特异性都为100%。结论苯唑西林和头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林CNS的现行耐药折点标准在判断表皮葡萄球菌和非表皮葡萄球菌CNS的甲氧西林耐药性中都有很高的敏感性和特异性,适用于CNS对甲氧西林耐药性的判断。对于非表皮葡萄球菌CNS,头孢西丁纸片扩散法较苯唑西林纸片扩散法结果更可靠。

凝固酶阴性葡萄球菌的青霉素结合蛋白产生和苯唑西林MIC相关性研究

目的分析凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)的青霉素结合蛋白2a(PBP2a)的产生和苯唑西林MIC相关性。方法收集82株临床分离株,采用MRSA胶乳凝集法、MIC法分别检测CNS对苯唑西林的耐药性,比较各试验结果。结果苯唑西林MIC≥0.5mg/L或产生PBP2a的表皮葡萄球菌和溶血葡萄球菌均能正确地表示苯唑西林耐药;苯唑西林MIC≥0.5mg/L解释标准对头葡萄球菌、腐生葡萄球菌、人葡萄球菌、模仿葡萄球菌等CNS评价苯唑西林为耐药,正确性很低,有80.0%未产生PBP2a的菌苯唑西林MIC≥0.5mg/L,使这些菌被错误地报道苯唑西林耐药。结论新的苯唑西林解释标准对产生PBP2a的CNS均能正确地评价,而对未产生PBP2a的CNS某些菌种缺乏特异性;MRSA胶乳凝集试剂盒可快速、准确地检测耐苯唑西林的CNS。

苯唑西林MIC≥0.5ug/ml折点对凝固酶阴性葡萄球菌耐药性高估情况分析

目的：了解使用苯唑西林MIC（最低抑菌浓度）≥0.5ug/ml的折点判断部份凝固酶阴性葡萄球菌为耐甲氧西林葡萄球菌对此类葡萄球菌耐药性高估的情况。方法：对73株苯唑西林MIC法耐药的凝固酶阴性非表皮葡萄球菌同时用头孢西丁纸片法扩散法（K-B法）检测，分析结果。结果：9株表现为敏感（抑菌圈≥25mm），占12%，其中6株苯唑西林MIC介于0.5-2ug/ml之间，3株苯唑西林MIC≥2ug/ml。头孢西丁敏感与耐药的两组菌对常用抗阳性球菌药物敏感性有明显差别。结论：对于苯唑西林MIC介于0.5-2ug/ml的凝固酶阴性的非表皮葡萄球菌，临床实验室应遵照美国临床和实验室标准化研究所（CLSI）指南，用头孢西丁K-B法或其它方法复核验证其耐药性，苯唑西林MIC≥2ug/ml的菌株，可直接报告为耐甲氧西林的葡萄球菌。

耐苯唑西林凝固酶阴性葡萄球菌感染与耐药浅析

目的 总结送检标本中感染耐苯唑西林凝固酶阴性葡萄球菌的情况及耐药性变迁 ,以期临床医生在治疗这类病人感染中有所帮助及控制医院感染起到作用。方法 收集 2 0 0 0年～ 2 0 0 3年住院病人送检标本分离出来的葡萄球菌进行菌称鉴定及抗菌素耐药分析。结果 耐笨唑西林凝固酶阴性葡萄球菌检出率 2 0 0 0年为 4 6 0 % ,2 0 0 1年为 5 0 4 % ,2 0 0 2年为 5 3.1% ,2 0 0 3年为 5 4 .4 %。而耐苯唑西林凝固酶阴性葡萄球菌对青霉素、红霉素 ,氨苄西林、环丙沙星、复方新诺明的耐药率分别均在80 %左右 ,或 80 %以上 ,而万古霉素耐药率为 0 %。结论 耐苯唑西林凝固酶阴性葡萄球菌每年检出率有增高现象 ,但增高不很明显 ,从资料显示说明 ,各种抗菌素的耐药率每年均有较为明显增高 ,故对于感染这类菌的病人在治疗上应引起临床医生注意 ,对于苯唑西林耐药的葡萄球菌 ,对目前所有的 β 内酰胺类抗生素都应认为耐药 ,治疗时应参照抗菌谱结果。万古霉素是较为理想的抗菌素 ,由于耐苯唑西林凝固酶阴性葡萄球菌耐药率每年均有增高现象及多种抗菌素均产生高耐药 ,给医院感染造成很大压力 ,应引起医务人员的高度重视和注意。

凝固酶阴性葡萄球菌苯唑西林筛选试验药物浓度的探讨

目的 选择一合适的筛选法检测凝固酶阴性葡萄球菌（ＣＮＳ）和苯唑西林（ＯＸＡ）浓度。方法 通过Ｋ－Ｂ纸片法、琼脂稀释法和β－内酰胺酶抑制试验对１４１株ＣＮＳ进行检测。结果 选择ＯＸＡ０．２５μｇ／ｍｌ时，有８株ＯＸＡ敏感株（ＭＳＳ）被误判为耐药株（ＭＲＳ），误判率为８．３３％；选择ＯＸＡ０．５μｇ／ｍｌ时，１株ＭＳＳ误判为ＭＲＳ，误判率为１．０４％；选择ＯＸＡ０．

mecA基因检测与苯唑西林平板药敏法在检测凝固酶阴性葡萄球菌中的比较

凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)异源性很强,其对抗生素敏感性测试一直存在不少问题。英国抗菌化学治疗协会(BSAC)和美国国家临床实验室标准制定委员会(NCCLS)均公布了苯唑西林平板药敏测试的指导原则。 CNS对甲氧西林的耐药性是由mecA基因的表达所致,而常规平板药敏测试不能对其检测。

凝固酶阴性耐苯唑西林葡萄球菌感染与耐药分析

目的总结我院送检标本中感染凝固酶阴性耐苯唑西林葡萄球菌的情况及耐药性分析,以期临床医生在治疗这类病人感染中有所帮助及控制医院感染起到作用。方法收集2000年至2003年住院病人送检标本,统计感染凝固酶阴性耐苯唑西林葡萄球菌的情况,并同时进行抗生素耐药分析。结果凝固酶阴性耐苯唑西林葡萄球菌2000年检出47株,2001年为57株,2002年为67株,2003年为68株。并分别占凝固酶阴性葡萄球菌检出率的46.0%,50.4%,53.1%及54.4%。凝固酶阴性耐苯唑西林葡萄球菌对青霉素、红霉素、氨苄西林、环丙沙星、复方新诺明的耐药率分别均在80%左右,或80%以上,而万古霉素耐药率为0%。结论凝固酶阴性耐苯唑西林葡萄球菌每年检出率有增高现象,但增高不很明显。从资料显示说明,各种抗生素的耐药率每年均有较明显增高。对于感染这类菌的病人在治疗上应引起临床医生注意,对于苯唑西林耐药的葡萄球菌,对目前所有的β-内酰胺类抗生素都应认为耐药,治疗时应参照抗菌谱结果。万古霉素是较为理想的抗生素,由于凝固酶阴性耐苯唑西林葡萄球菌耐药率每年均有增高现象及多种抗生素均产生高耐药,给医院感染造成很大压力,应引起医务人员的高度重视和注意。

VITEK GPS106卡检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌

目的 评价VITEKGPS10 6卡检测凝固酶阴性葡萄球菌 (CONS)对苯唑西林耐药性的可靠性。方法 采用肉汤稀释法和VITEKGPS10 6卡分别对 2 0 6株CONS进行苯唑西林敏感性测定 ,以肉汤稀释法为参考方法比较两法的结果。结果 肉汤稀释法测CONS苯唑西林耐药 98株 ,敏感 10 8株 ,98株耐药株中VITEKGPS10 6卡检测为耐药 92株 ,敏感性为 93.7% ,10 8株敏感株中VITEKGPS10 6卡检测结果一致 ,特异性为 10 0 % ,6株CONS肉汤稀释法为耐药而VITEKGPS10 6卡为敏感 ,分别为溶血葡萄球菌 3株 ,腐生葡萄球菌 2株 ,人葡萄球菌 1株 ,其MIC在 (0 .13～ 0 .2 5 ) μg/ml之间。结论 VITEKGPS10 6卡检测CONS对苯唑西林的耐药性具有快速、准确性高等优点 ,可接受为临床实验室常规方法。

耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌的OXA酶基因研究

目的研究广东省中山市中医院分离耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)耐药性、苯唑西林(OXA)酶基因及流行特性。方法收集广东省中山市中医院2012年7月至2013年12月临床分离40株CRAB,采用纸片扩散法(K-B法)药敏试验,改良Hodge试验筛查碳青霉烯酶;用聚合酶链式反应(PCR)法对β-内酰胺酶基因oxa-23、oxa-24、oxa-51和oxa-58进行扩增、序列分析。结果 40株CRAB对16种药物中,对多黏菌素和米诺环素敏感性最高,耐药率小于或等于5.0%;改良Hodge试验阳性29株(占72.5%);所有菌株均被检测到含有oxa-51基因(占100.0%),oxa-23基因为38株(占95.0%),未检出oxa-24和oxa-58基因。结论 oxa-51及oxa-23基因是广东省中山市中医院流行CRAB的主要基因型。

耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌OXA酶基因研究

目的检测鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类抗生素的耐药性，了解耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌OXA酶基因、插入序列和I类整合酶基因的分布。方法采用琼脂二倍稀释法检测90株鲍曼不动杆菌对20种β-内酰胺类抗菌药物的最低抑菌浓度，常规PCR检测耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌的4种OXA酶基因、插入序列和I类整合酶基因。结果90株鲍曼不动杆菌对20种β-内酰胺类抗菌药物的耐药性为5．7％～94．2％；21株耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌中，8株OXA-23阳性，且/SAba1同为阳性，4株OXA．51阳性，1株I类整合酶基因阳性。结论临床分离的鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类抗生素耐药形势严峻，耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌OXA酶基因和ISAba，检出率均很高。

4种检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌方法的评估

目的评价4种检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)方法的临床应用价值。方法对287株临床分离的凝固酶阴性葡萄球菌采用苯唑西林纸片扩散法,头孢西丁纸片扩散法和苯唑西林微量稀释法筛选MRCNS,并采用聚合酶链反应(PCR)检测mecA基因作为检测MRCNS的金标准。结果287株中有218株为MRCNS,头孢西丁纸片扩散法筛选MRCNS敏感性为97.7%,特异性为95.7%;苯唑西林K-B法筛选MRCNS敏感性为99.1%,特异性为66.7%;苯唑西林微量稀释法筛选MRCNS敏感性为98.6%,特异性为60.9%。结论头孢西丁纸片扩散法可作为医院微生物实验室日常工作中检测MRCNS的简便又准确的实验方法。

多利培南对18株产OXA-58型碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌的抗菌活性

目的了解上海长征医院临床分离鲍曼不动杆菌中苯唑西林酶-58(OXA-58)基因存在状况,以及多利培南对其抗菌活性。方法收集上海长征医院分离的72株鲍曼不动杆菌,通过聚合酶链反应(PCR)扩增和克隆测序等方法对鲍曼不动杆菌中OXA-58基因进行检测和测序分析,区分出OXA-58基因阳性和OXA-58基因阴性鲍曼不动杆菌。通过微量稀释法检测碳青霉烯类抗生素多利培南、亚胺培南、美罗培南对鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度(MIC),并分别对多利培南、亚胺培南、美罗培南对OXA-58基因阳性鲍曼不动杆菌的MIC,多利培南对OXA-58基因阳性和OXA-58基因阴性鲍曼不动杆菌的MIC进行统计学分析。结果72株鲍曼不动杆菌中,OXA-58基因阳性率为25%。多利培南对鲍曼不动杆菌的半数MIC(MIC50)、90%MIC(MIC90),以及对OXA-58基因阳性鲍曼不动杆菌的MIC均显著低于亚胺培南和美罗培南(P值均<0.01)。多利培南对OXA-58基因阳性鲍曼不动杆菌的平均MIC、MIC50、MIC90均显著低于其对OXA-58基因阴性鲍曼不动杆菌(P值均<0.01)。结论 OXA-58型碳青霉烯酶是鲍曼不动杆菌耐药的原因。多利培南对产OXA-58型碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌的MIC50、MIC90均低于不产OXA-58型碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌。相比亚胺培南、美罗培南,多利培南对携带OXA-58基因的鲍曼不动杆菌具有更低的MIC。

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的评价

目的评价头孢西丁(FOX)纸片扩散法(K-B)检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的临床应用价值。方法用头孢西丁纸片扩散法检测临床分离的139株凝固酶阴性葡萄球菌(CNS),并与苯唑西林(OXA)纸片扩散法、mecA基因检测进行比较。结果mecA基因阳性的109株CNS对FOX显示耐药,而对OXA则只有97株显示耐药。结论头孢西丁纸片扩散法与mecA基因检测高度一致,苯唑西林纸片扩散法则存在一定的差异,临床实验室应用FOX取代OXA来检测MRCNS。

重症监护室多重耐药铜绿假单胞菌产OXA酶基因的研究

目的探讨本地区重症监护室多重耐药铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗生素的耐药特点及其OXA型耐药基因的分析。方法采用K-B法检测32株多重耐药铜绿假单胞菌对4种β-内酰胺类抗生素(氨曲南、头孢吡肟、亚胺培南和哌拉西林/三唑巴坦)的耐药情况;采用多重PCR法检测32株多重耐药铜绿假单胞菌的4种OXA型基因(OXA23、OXA24、OXA51和OXA58)。结果 32株多重耐药铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗生素耐药率分别为:氨曲南87.5%(28/32)、头孢吡肟62.5%(20/32)、亚胺培南59.38%(19/32)、哌拉西林/三唑巴坦56.25%(18/32)。32株多重耐药铜绿假单胞菌中有2株分别含bla OXA23基因和bla OXA51基因。结论重症监护室多重耐药铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗生素的耐药率较高,均在50%以上。bla OXA51基因在本地区首次检出,但其播散流行趋势可能不如bla OXA23基因。

鲍曼不动杆菌的耐药情况及碳青霉烯酶基因检测

了解佳木斯大学附属第一医院鲍曼不动杆菌耐药性及碳青霉烯酶包括苯唑西林酶和金属酶相关耐药基因分布情况,为临床抗菌药物的合理选择提供依据。2013年9月至2014年12月使用VITEK-II全自动微生物鉴定/药敏测试系统筛选出佳木斯大学附属第一医院临床标本鲍曼不动杆菌69株;采用多重PCR方法检测鲍曼不动杆菌携带的碳青霉烯酶相关耐药基因16S rRNA、OXA-23、OXA-24、OXA-51、OXA-58、IMP、VIM、SIM,并对耐药基因扩增的阳性产物进行DNA序列分析。69株AB对亚胺培南、美洛培南的耐药率分别为36.2%、37.68%,对其他抗菌药物的耐药率均高于50%。6种耐药基因的检测结果为69株(100%)携带OXA-51基因,32株(46.4%)携带OXA-23基因,17株(24.6%)携带OXA-24基因,5株(7.2%)携带OXA-58基因,1株(1.4%)携带IMP基因。25株碳青霉烯类药物耐药鲍曼不动杆菌中,22株(88%)携带OXA-23,1株(4%)携带OXA-58,10株(40%)携带OXA-24,6株(24%)同时携带OXA-23、OXA-24。DNA序列分析结果显示:OXA-23、OXA-24、OXA-51、OXA-58分别与NCBI的序列同源性均为99%。产OXA-23型碳青霉烯酶可能是佳木斯大学附属第一医院鲍曼不动杆菌对碳青霉烯酶类抗菌药物耐药的主要原因,另外佳木斯大学附属第一医院存在OXA-24型耐药基因鲍曼不动杆菌的区域性流行。

耐碳青霉烯类抗生素不动杆菌的β内酰胺酶研究

目的了解不动杆菌属细菌对碳青霉烯类药物的耐药机制,耐药菌株的基因同源性和传播机制。方法采用改良Hodge试验和乙二胺四乙酸(EDTA)协同试验筛选耐亚胺培南不动杆菌碳青霉烯酶,等电聚焦电泳(IEF)测定产β内酰胺酶等电点,blaTEM,blaSHV,blaCTX-M-Ga-Gc,blaPER-1,blaOXA-23,blaMBL等,引物的PCR进行β内酰胺酶的基因分型,并对PCR产物进行测序;Southern印迹进行苯唑西林酶OXA-23的基因定位脉冲场电泳(PFGE)研究耐亚胺培南不动杆菌同源性。结果6株耐碳青霉烯类不动杆菌均产OXA-23型酶,其中5株同时产PER-1型ESBLs。6株菌blaOXA-23均定位于染色体。3株琼氏不动杆菌属于同一PFGE分型,3株鲍曼不动杆菌分别属于2种PFGE分型。结论产OXA-23型碳青霉烯酶是导致不动杆菌对碳青霉烯类药物耐药的重要原因,同时存在blaOXA-23的克隆传播。

678株凝固酶阴性葡萄球菌的耐药性分析

目的分析凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)的耐药性,比较苯唑西林耐药的CNS(MRCNS)与苯唑西林敏感的CNS(MSCNS)的药物敏感性。方法收集2007年1～12月临床分离CNS,琼脂纸片扩散法检测其对9种抗菌药物的敏感性,MRCNS的检测采用头孢西丁纸片法,诱导性克林林霉素耐药的检测采用D实验。结果共分离出CNS678株,检出MRCNS296株,占43.7%,诱导性克林林霉素耐药72株,占10.7%。MRCNS对红霉素的耐药率高达94.9%,对复方磺胺甲恶唑的耐药率为70.3%,对环丙沙星、克林霉素和四环素的耐药率在63.7%～69.3%,对庆大霉素的耐药率较低,为20.7%,与MSCNS比较差异有统计学意义。MRCNS与MSCNS对青霉素的耐药率均>90%,未见对替考拉宁和万古霉素耐药菌株。结论 CNS引起的感染日益增多;MRCNS对常用抗菌药物的耐药率高于MSCNS,糖肽类抗菌药物是治疗MRCNS的首选药物;临床抗感染治疗应依据抗菌药物敏感试验合理用药。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌及其对万古霉素耐药的研究进展

随着抗菌药物的滥用,细菌耐药现象日趋严重,尤其是革兰阳性致病菌,如金黄色葡萄球菌,凝固酶阴性葡萄球菌和肠球菌,并导致多重耐药菌株（如耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,MRSA）的产生。临床上治疗MRSA的首选对策就是万古霉素。但是万古霉素的不合理使用,进一步导致耐万古霉素菌株或者万古霉素中介的菌株产生。

141株凝固酶阴性葡萄球菌的菌种分布及耐药性分析

凝固酶阴性葡萄球菌（ＣＮＳ），以往认为是皮肤、粘膜上的正常菌群。近年来，随着介入性诊疗手段的广泛应用，免疫抑制剂的使用，肿瘤、肾病、糖尿病等复杂的基础疾病导致患者免疫力降低，ＣＮＳ已成为重要的机会致病菌〔１〕，而且对多种抗菌药物耐药〔２，３〕。我院在...