猪脑苯甲二氮结合性抑制物的分离纯化及其镇痛活性

纯化猪脑苯甲二氮结合性抑制物 (DBI)并研究它在镇痛方面的生物学功能 .猪脑提取液经SephadexG 5 0分子筛层析、SP SepharoseFastFlow阳离子交换柱层析、SourceTM30SFPLC和RP HPLC分离得到DBI ,纯度达 93 5 % .经测定其相对分子质量 (Mr)为 980 8.3,pI为 7 2 .氨基酸组成及其序列检测结果表明 ,该蛋白由 86个氨基酸组成 ,与猪肠DBI的序列相同 ,而且N端都是乙酰化封闭的 .镇痛活性实验在SD雄性大鼠上进行 ,测量其对伤害性热和机械刺激反应的潜伏期作为指标 .将DBI注射到大鼠的侧脑室和脊髓蛛网膜下腔内 ,都产生明确的镇痛作用 ,在吗啡耐受的大鼠侧脑室注射DBI仍有镇痛作用 .无论在脊髓或脑水平 ,DBI对吗啡的抗伤害作用均无明显影响 .结果提示 ,中枢神经系统内 ,DBI在一定剂量内有明确的镇痛作用 。

抑制节律基因per1表达后对小鼠吗啡奖赏效应及DBI mRNA表达的影响

目的:采用脱氧核酶DRz164对periodl mRNA进行切割,使其表达降低后,探讨对吗啡奖赏效应及苯甲二氮(?)结合抑制因子(diazepam binding inhibitor,DBI)的影响。方法:BALB/C小鼠,雄性,4—6周龄24只,随机分为3组。每组8只.A组为:脂质体+0.9%氯化钠注射液组;B组为:脂质体+吗啡组;C组为脂质体包裹的脱氧核酶(DRZ164)+吗啡组。建立小鼠条件性位置偏爱模型,观察脱氧核酶对吗啡奖赏效应的影响,测试后将动物处死,原位杂交检测皮层DBI mRNA表达的变化。结果:脱氧核酶DRz164阻断了小鼠对吗啡的条件性位置偏爱形成,皮层DBI mRNA表达脂质体包襄的脱氧核酶(DRZ164)+吗啡组明显低于脂质体+吗啡组。下降了65.41%。结论:mPerl基因在吗啡条件性位置偏爱效应中可能起着重要作用,同时它也可能与小鼠皮层DBI mRNA表达有关。

电针对吗啡依赖大鼠条件性位置偏爱效应的作用研究

目的 观察电针是否能够消除吗啡依赖大鼠条件性位置偏爱效应 ,探讨电针控制戒断后焦虑症状的神经生物机制是否与苯甲二氮卓结合抑制因子 (DBI) m RNA表达有关。方法 2 4只 SD大鼠建立条件性位置偏爱模型后 ,随机分为正常对照组、吗啡依赖组和电针干预组 ,予以电针干预 ,干预后第 5 d和第 10 d,检测条件性位置偏爱 ,并处死大鼠 ,提取脑内 RNA,进行 RT- PCR。结果 第 5 d和第 10 d检测结果显示电针干预组偏爱时间明显减少 ,与吗啡依赖组比较有统计学差异 (P<0 .0 5 ) ,电针干预组 DBI m RNA表达明显少于吗啡依赖组 (P<0 .0 5 ) ,而正常对照组与电针干预组没有统计学差异。结论 电针能消除吗啡依赖大鼠的条件性位置偏爱效应 ,其控制戒断后焦虑症状的神经生物机制可能与电针影响 DBI m RNA表达相关。