气相色谱-质谱法检测药物中3种苯磺酸酯类基因毒性杂质

目的:建立药物(苯磺酸左旋氨氯地平片)中3种苯磺酸酯类基因毒性杂质(苯磺酸甲酯,苯磺酸乙酯,苯磺酸异丙酯)衍生顶空-气相色谱-质谱联用的检测方法。方法:样品经60℃,平衡30 min后,顶空进样,经VF-WAXms毛细管柱(30 m×250μm×1.0μm)分离,质谱进行检测,内标法定量。结果:该方法3种苯磺酸酯类基因毒性杂质的分离效果较好。目标化合物的检出限在0.03~0.13 mg kg^(-1),定量限为0.14~0.25 mg kg^(-1)。在3.57~307.99 ng mL^(-1)的浓度范围内线性关系良好(r>0.99)。3种苯磺酸酯在1.00、4.00和6.00 mg kg^(-1)浓度水平,平均回收率为103.32~109.89%,RSD为1.62~3.87%。结论:该方法灵敏度高,准确可靠,可应用于药物(苯磺酸左旋氨氯地平)中苯磺酸酯类基因毒性杂质含量的质量监控。

气相色谱-质谱法检测药物中3种苯磺酸酯类基因毒性杂质研究

本文主要探讨适合检测药物中3种苯磺酸酯类基因毒性杂质的可行方法,采用气相色谱-质谱法,对提前准备好的样品进行试验处理与分析,按照设置好的试验参数与要求,在60℃温度下平衡30min,采取顶空进样的方法。观察质谱检测过程与结果,最后进行定量。应用气相色谱-质谱法可以获得较好的苯磺酸酯类基因毒性杂质分离效果,检出限与定量限分别可达到0.03-0.13mg·kg-1,0.14-0.25mg·kg-1。与此同时,待测苯磺酸酯的相对标准偏差在1.62-3.87%之间。根据试验观察与分析,气相色谱-质谱法用于药物检测具有精准性、可靠性和灵敏性,满足苯磺酸酯类基因毒性杂质质量控制的基本要求。

超高效液相色谱-串联质谱法快速测定苯磺酸酯类基因毒性杂质

目的建立超高效液相色谱-串联质谱快速测定苯磺酸酯类基因毒性杂质含量的分析方法。样品经乙腈超声提取,离心过膜后直接进样,经Kinetex F5色谱柱分离,以0.1%甲酸-乙腈为流动相,梯度洗脱,多反应监测扫描,正离子模式检测,空白基质标准曲线外标法定量。结果显示,在0.2~1000 ng/mL范围内成线性,相关系数大于0.99,该方法专属性、精密度、耐用性、稳定性均良好。结论经过方法学验证,该方法适用于苯磺酸酯类基因毒性杂质含量的测定。

LC-MS/MS测定枸橼酸西地那非中磺酸酯类基因毒性杂质

目的建立液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定枸橼酸西地那非中磺酸酯类基因杂质4-乙氧基-3-甲酰基-苯磺酸乙酯。方法色谱柱为Agilent Poroshell 120EC-C_(18)柱(150mm×2.1mm,2.7μm),柱温为25℃,流动相为0.1%甲酸溶液-甲醇,梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,进样量为5μL。采用电喷雾离子源,以多反应监测模式进行正离子扫描,定量离子对为m/z 259.3→203.1,定性离子对为m/z 259.3→187.1。结果4-乙氧基-3-甲酰基-苯磺酸乙酯在4.92~196.99 ng/mL浓度范围内线性关系良好(r=0.9995),平均回收率为96.5%,RSD为4.2%(n=9),检测限为0.098 ng/mL,定量限为0.246 ng/mL。结论本方法操作简便、灵敏度高、结果可靠,可用于枸橼酸西地那非中4-乙氧基-3-甲酰基-苯磺酸乙酯的检测。

LC-QQQ-MS/MS分析苯磺酸氨氯地平中痕量苯磺酸酯类基因毒性杂质

目的建立LC-QQQ-MS/MS分析测定苯磺酸氨氯地平中痕量苯磺酸酯类基因毒性杂质苯磺酸甲酯、苯磺酸乙酯、苯磺酸丙酯和苯磺酸异丙酯的检测方法。方法采用AgilentZorbaxSB-C18(3.0 mm×100 mm,1.8mm)色谱柱,以水(含5 mmol·L-1甲酸铵和0.1%甲酸)和甲醇(含5 mmol·L-1甲酸铵和0.1%甲酸)为流动相,梯度洗脱,流速0.4 mL·min-1,电喷雾离子化(ESI),正离子模式下MRM采集。结果苯磺酸甲酯定量下限为20ng·mL-1,苯磺酸乙酯、苯磺酸丙酯和苯磺酸异丙酯定量下限为1 ng·mL-1;方法精密度良好,保留时间和峰面积RSD均<5%(n=10);苯磺酸甲酯在20~1000 ng·mL-1,苯磺酸乙酯、苯磺酸丙酯和苯磺酸异丙酯在1~1000 ng·mL-1内呈良好的线性关系,r≥0.998;方法准确度良好,平均加样回收率(n=10)分别为99.77%,100.19%,94.21%和92.43%。5个不同厂家生产的苯磺酸氨氯地平中苯磺酸甲酯的含量均<LOQ(8mg·g-1),苯磺酸乙酯、苯磺酸丙酯和苯磺酸异丙酯的含量均<LOQ(0.4mg·g-1)。结论该方法可用于苯磺酸氨氯地平中痕量基因毒性杂质苯磺酸甲酯、苯磺酸乙酯、苯磺酸丙酯和苯磺酸异丙酯含量的检测分析。

HPLC法测定氢溴酸西酞普兰中的基因毒性杂质对甲苯磺酸乙酯

目的建立一种高效液相色谱测定氢溴酸西酞普兰中的基因毒性杂质对甲苯磺酸乙酯的方法.方法采用AgilentZorbaxSB-C18色谱柱（4.6mm×150mm,5μm）,以乙腈-缓冲液（0.02mol·L^-1磷酸盐缓冲液,用磷酸调节pH值至3.5）（50∶50）为流动相,流速为1.0mL·min^-1,检测波长225nm.结果对甲苯磺酸乙酯在0.0256～0.1875μg·mL-1范围内峰面积与浓度线性良好（R2=0.9993）;精密度良好,RSD为0.8%;定量限和检测限分别为0.0256、0.0124μg·mL^-1;对甲苯磺酸乙酯在氢溴酸西酞普兰中的回收率为101.4%.结论本方法简便快捷,准确可靠,可以准确测定氢溴酸西酞普兰中的对甲苯磺酸乙酯含量.

LC-MS/MS法测定苯磺酸氨氯地平胶囊中两种潜在基因毒性杂质的含量

目的建立液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)测定苯磺酸氨氯地平胶囊中2个非磺酸酯类潜在基因毒性杂质含量的方法。方法使用液相色谱-三重四级杆质谱联用仪,色谱柱为Agilent poroshell 120 EC-C_(18),流动相A为5 mmol·L^(-1)乙酸铵的0.1%甲酸溶液,B为0.1%甲酸乙腈溶液,流速为0.5 mL·min^(-1),梯度洗脱;电喷雾离子源,扫描方式为正离子模式-多反应监测(MRM)。结果两种潜在基因毒性杂质A和B浓度分别在4.51~45.12 ng·mL^(-1)(r=0.990)和4.39~43.93 ng·mL^(-1)(r=1.000)内线性关系良好,平均回收率分别为102.3%和102.6%,RSD分别为1.5%和1.0%;使用该方法对国产和原研进口的苯磺酸氨氯地平胶囊进行测定,均未检出上述潜在基因毒性杂质。结论所建立的LC/MS分析方法可靠有效,可为苯磺酸氨氯地平胶囊的质量控制提供参考依据。

磺酸酯类基因毒性杂质研究进展

基因毒性杂质在低暴露水平下就可能引起DNA损伤,增加患癌的风险,这为用药安全带来了极大的挑战。目前,基因毒性杂质含量监测已经成为国内外的研究热点。本文概述了基因毒性杂质和磺酸酯类杂质的相关法规和指南以及磺酸酯类杂质在药物生产过程中的形成机理,重点介绍了磺酸酯类基因毒性杂质的气相色谱分析方法和液相色谱分析方法。期望为药物中基因毒性杂质合理控制提供指导。

长春西汀注射液中2种磺酸酯类基因毒性杂质的测定

目的建立测定长春西汀注射液中对甲苯磺酸甲酯和对甲苯磺酸乙酯含量的高效液相色谱法。方法色谱柱为Waters ODS2 C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(39∶61,V/V),流速为1.0 m L/min,检测波长为226 nm,柱温为35℃,进样量为20μL。结果对甲苯磺酸甲酯、对甲苯磺酸乙酯质量浓度分别在0.1499~0.5998μg/m L和0.1136~0.4542μg/m L范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9999,0.9998),平均回收率分别为98.78(RSD=2.02%,n=6)和99.33%(RSD=1.27%,n=6)。结论该方法简便、准确,可用于长春西汀注射液中对甲苯磺酸甲酯和对甲苯磺酸乙酯的定性和定量分析。

药物中磺酸酯类基因毒性杂质测定方法研究进展

介绍磺酸酯类基因毒性杂质的分析方法,包括高效液相色谱法、液相色谱-质谱联用法、气相色谱法和气相色谱-质谱联用法等。高效液相色谱法操作简单,应用广泛,能实现绝大多数化合物的分离、分析;液相色谱-质谱联用法具有灵敏度高、准度高、特异性高等特点;气相色谱应用于易分离气体和易挥发的成分的检测,灵敏度高,专属性强;气相色谱-质谱联用法具有分析速度快、分离效能好、灵敏度高、选择性强的特点。开发通用、简便、灵敏度高的分析检测方法,为更好地监测磺酸酯类基因毒性杂质提供理论参考。

药物中基因毒性杂质磺酸酯类分析方法的研究近况

基因毒性杂质(Genotoxic Impurities,GTIs)是指在很低水平即可诱发基因突变、断裂或重排,并可能致癌的杂质,严重危害了人类的健康。因此需要在药物中对该类杂质的限度进行严格控制,以保证用药的安全。由于此类物质的限度一般较低,相比一般杂质,在分析方法检测灵敏度、专属性、样品溶液稳定性等都会有特殊要求。本文对药物中常见的磺酸酯类化合物方法开发和选择性进行了综述,综合评估了不同方法的优缺点。

UPLC-MS/MS法同时检测丁二磺酸腺苷蛋氨酸肠溶片中3种1,4-丁二磺酸酯类基因毒性杂质

建立丁二磺酸腺苷蛋氨酸肠溶片中3种1,4-丁二磺酸酯类基因毒性杂质(1,4-丁二磺酸二甲酯、1,4-丁二磺酸二乙酯和1,4-丁二磺酸二异丙酯)的超高效液相色谱-三重四级杆质谱(UPLC-MS/MS)检测方法。采用Agilent Poroshell 120 PFP色谱柱(3.0 mm×150.0 mm,2.7μm),以0.01 mol/L甲酸铵(A)-甲醇(B)为流动相,流速为0.4 mL/min,进行梯度洗脱。采用质谱检测器,在电离模式ESI+、多反应监测(MRM)模式下采集数据。结果显示,1,4-丁二磺酸二甲酯、1,4-丁二磺酸二乙酯和1,4-丁二磺酸二异丙酯分别在0.999 6~19.992 0 ng/mL、0.997 2~19.944 0 ng/mL、0.996 8~19.936 0 ng/mL范围内线性关系良好,相关系数r均为1.000 0,定量限浓度分别为0.999 6 ng/mL、0.997 2 ng/mL、0.996 8 ng/mL,检测限浓度分别为0.299 9 ng/mL、0.299 2 ng/mL、0.299 0 ng/mL,样品加标回收率均为80%~120%。该方法可以快速、简便、灵敏、准确地测定丁二磺酸腺苷蛋氨酸肠溶片中1,4-丁二磺酸二甲酯、1,4-丁二磺酸二乙酯和1,4-丁二磺酸二异丙酯的含量,为丁二磺酸腺苷蛋氨酸肠溶片的质量控制提供参考依据。

羟苯磺酸酯类化合物的合成及表征

以2,5-二羟基苯磺酸(1)为原料,经过酰氯化、磺酸酯化,制得2,5-二羟基苯磺酸酯类化合物(3、4、5)。采用核磁共振谱(^(1)H NMR),高分辨电喷雾质谱(HRMS-ESI)等对目标化合物进行表征,确证了结构,并通过HPLC确定了其纯度。为羟苯磺酸钙及其制剂的相应基因毒性杂质研究和定量控制奠定了基础。

高效液相色谱法测定布林佐胺中对甲苯磺酸异丙酯

目的建立高效液相色谱法测定布林佐胺中基因毒性杂质对甲苯磺酸异丙酯残留量。方法采用Inertisl ODS-3 C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),缓冲液(取磷酸1.0 m L,加水1 000 m L,三乙胺调p H值至3.0)-乙腈(70∶30)为流动相,流速1.0 m L·min^(-1),柱温30℃,进样量为20μL,波长220 nm。结果布林佐胺中其他杂质不干扰对甲苯磺酸异丙酯的测定,专属性良好;对甲苯磺酸异丙酯检测限浓度为0.008 5μg·m L^(-1),定量限浓度为0.028 4μg·m L^(-1);在0.028 4~1.354μg·m L^(-1)范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999);样品测定的重复性良好,RSD=0.66%(n=6);平均加样回收率96.9%,RSD=0.70%(n=9)。结论该方法操作简便、准确、专属性强,可以用于布林佐胺中基因毒性杂质对甲苯磺酸异丙酯残留量的检测。

UHPLC-MS法测定2种硫酸氢氯吡格雷晶型中的基因毒性杂质对甲苯磺酸甲酯

目的:建立超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用法(UHPLC-MS)测定2种硫酸氢氯吡格雷晶型(Ⅰ型和Ⅱ型)中基因毒性杂质对甲苯磺酸甲酯。方法:采用Zorbax Extend C_(18)(2.1 mm×50 mm,1.8μm)色谱柱,以0.1%甲酸水溶液为流动相A,0.1%甲酸甲醇溶液为流动相B,梯度洗脱,流速为0.4 m L·min^(-1),电喷雾(ESI)正离子检测模式,采用多反应监测(MRM)扫描模式,选择m/z 187→91作为定量离子对,m/z 187→155作为定性离子对。结果:对甲苯磺酸甲酯质量浓度在1.0~200 ng·m L^(-1)范围内线性关系良好(r=0.999 9);检测限为0.5 ng·m L^(-1);定量限为1.0 ng·m L^(-1);Ⅰ型晶型和Ⅱ型晶型的加样回收率分别为97.7%和97.9%(n=9),RSD分别为1.5%和1.5%;4℃控温条件下供试品溶液在48 h内稳定性良好(RSD=1.6%);2种晶型各3批样品中均未检出对甲苯磺酸甲酯。结论:本方法结果可靠,可以用于硫酸氢氯吡格雷原料中对甲苯磺酸甲酯的检测。

HPLC-UV法测定卡培他滨中的对甲苯磺酸酯

建立了高效液相色谱法测定卡培他滨原料药中的基因毒性杂质对甲苯磺酸甲酯(MepTS)、对甲苯磺酸乙酯(EtpTS)和对甲苯磺酸异丙酯(iPrpTS)。采用C18色谱柱(250mm×4.6mm,50μm),紫外检测器在225nm下直接进样测定。三种对甲苯磺酸酯在0.015~0.15μg/mL浓度范围内线性关系良好,定量限均为0.015μg/mL,检测限均为0.005μg/mL,平均回收率在89.2%~100.3%。该方法简单、准确、专属性强且重现性好,适用于卡培他滨中对甲苯磺酸酯基因毒性杂质的测定。

HPLC法测定阿奇霉素颗粒中的基因毒性杂质对甲苯磺酸乙酯

目的建立阿奇霉素颗粒中基因毒性杂质对甲苯磺酸乙酯的高效液相色谱(HPLC)测定方法。方法采用Waters XBridge C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以磷酸盐缓冲液(2.2 g·L^(-1)无水磷酸氢二钾溶液,用稀磷酸调节pH值至8.9)为流动相A;甲醇-乙腈(25∶75)为流动相B,进行梯度洗脱,体积流量为1.0 mL·min^(-1),检测波长为225 nm,柱温为60℃,进样量为50μL。进行专属性、线性关系、定量限和检测限、精密度、重复性、回收率、稳定性、耐用性试验。结果空白溶剂、空白辅料、混合溶液中邻近对甲苯磺酸乙酯的杂质L均不干扰对甲苯磺酸乙酯检测;对甲苯磺酸乙酯质量浓度在0.05~0.20μg·mL^(-1)(R^(2)=0.9999)与峰面积呈良好线性关系;检测限为0.0167μg·mL^(-1),定量限为0.0500μg·mL^(-1);平均回收率为95.76%~96.48%,RSD为0.42%~1.53%;精密度、重复性、稳定性、耐用性均符合要求。3批样品中均未检出对甲苯磺酸乙酯。结论建立的方法专属性强、灵敏度高、特异性强、准确度高,可用于阿奇霉素颗粒中基因毒性杂质对甲苯磺酸乙酯的限度控制与检测。

HPLC法检测托吡司特中的基因毒性杂质对甲苯磺酸异丙酯、对甲苯磺酸仲丁酯、对甲苯磺酸乙酯

目的:建立一种高效液相色谱测定托吡司特的基因毒性杂质对甲苯磺酸异丙酯(杂质H)、对甲苯磺酸仲丁酯(杂质I)和对甲苯磺酸乙酯(杂质J)的方法。方法:采用C18色谱柱(100 mm×4.6 mm,3.5μm),以水为流动相A,乙腈为流动相B,进行梯度洗脱,流速0.8 mL·min^(-1),检测波长220 nm,柱温40℃。结果:杂质H、I及J质量浓度分别在0.050～0.202μg·m L^(-1)(R2=0.999 7)、0.048～0.192μg·m L^(-1)(R2=0.999 8)及0.051～0.204μg·m L^(-1)(R2=0.999 5)范围内与峰面积呈良好线性关系,定量下限分别为0.050 5、0.048 0和0.051 0μg·m L^(-1),检测下限分别为0.016 7、0.015 8和0.016 8μg·mL^(-1),平均回收率分别为99.3%(RSD=1.9%)、103.0%(RSD=1.2%)和98.2%(RSD=1.6%)。3批样品中均未检出基因毒性杂质H、I及J。结论:本法适用于托吡司特中的基因毒性杂质H、I及J的检测及限度控制。

HS-GC-MS同时测定沙芬酰胺中磺酸酯类基因毒性杂质

目的建立同时测定沙芬酰胺原料药中5种磺酸酯类基因毒性杂质(甲磺酸甲酯、甲磺酸乙酯、甲磺酸异丙酯、甲磺酸丙酯、甲磺酸丁酯)的方法。方法采用顶空进样气相色谱-质谱联用法,在线衍生,RESTEKRxi-624Sil毛细管柱(30 m×0.25 mm,1.4μm),四级杆质量检测器,离子化模式为电子轰击离子化(EI)模式,采集模式为选择离子监测。结果 5种杂质检测限为0.3~1.3ng·mL^-1,定量限为0.9~4.3ng·mL^-1;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均<5%;浓度在5~300 ng·mL^-1内,5种杂质的峰面积与其相对应的浓度有良好的线性关系,相关系数(r2)均>0.995;回收率为99.4%~100.6%,RSD为0.8%~2.6%(n=9)。结论该法操作简便,重复性好,结果准确可靠,可用于沙芬酰胺中磺酸酯类基因毒性杂质的测定。

LC-MS/MS测定加替沙星中基因毒性杂质对甲基苯磺酸乙酯的含量

目的:建立LC-MS/MS测定加替沙星中基因毒性杂质对甲基苯磺酸乙酯含量的方法。方法:采用Agilent Poroshell 120 EC-C18色谱柱,0.1%甲酸水溶液-甲醇40:60(v/v)为流动相;乙腈(0.1%甲酸)-纯水=50:10(v/v)为稀释剂;柱温40℃;进样体积5μL;流速0.4mL/min;采用正离子模式进行扫描,监测离子对为m/z 201.0→m/z 173.0,m/z 201.0→m/z 91.0。结果:对甲基苯磺酸乙酯测定浓度在0.1851ng/mL^7.4040ng/mL范围内呈良好的线性关系,线性方程为y=359.7382C-0.2444(r=0.9999),检测限和定量限为0.00074ng和0.00093ng,杂质回收率在限度浓度80%、100%和160%三个浓度水平均在90~110%之间,平均回收率为100.6%;RSD为2.67%,该方法准确度良好。结论:该方法适用于加替沙星中对甲基苯磺酸乙酯的检测。