阶段梯度胶电泳分离血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶同工酶

阶段梯度胶电泳分离血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶同工酶肖明兵，张弘，姚登福，朱薇，黄介飞（南通医学院附院，江苏南通２２６００１）关键词甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶，同工酶，电泳，原发性肝癌，血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶（Ｇｌｙｃｙｌｏｒｏｌｉｎｅｄｉｐｅｐ...

甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶的方法学研究

本文研究了甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(GPDA)的最佳测定条件。最适pH8.6,Km 值为1.91±0.08mmol/L,选用158mmol/L Tris、64mmol/L 双甘氨肽、10 mmol/L 底物。酶促反应速度在70分钟内呈线性,酶活力在600U/L 内呈线性。高、中,低活力标本批内变异1.7～3.1%,批问变异3.8～6.7%,标本置4℃一周,结果无明显变化。168例健康者GPDA 为150.1±49.8(2SD)U/L,同时研究了测定管、底物空白、对硝基苯胺的光学吸收特性,观察了GPA 试剂在不同pH 和不同时间的变化规律。

甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶测定及其应用

本文介绍速率法测定血清甘氨酰脑氨酸二肽氨基肽酶(Glycylprolinc dipcptidylaminopeptidase,GPDA)的方法.并应用于自动生化分析仪,测定的最适pH 为8.6,酶活力在1300 U/L 以下成线性,三份高、中、低值酶活力标本批内CV 0.7%～1.4%,批间CV1.2%～4.4%.132例正常人GPDA 为185.2±28.6((?)±s)U/L,65例原发性肝癌组为408.0±216.1 U/L((?)±s),明显高于正常组(p<0.001),且与AFP 水平无相关意义(r=0.0361),24例胃癌和18例肺癌,分别为99.5±16.6 U/L 和111.8±23.0U/L 明显低于正常组(p<0.001),并发现GPDA 在食道癌及贲门癌病人亦有下降趋势(p<0.01)。

甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶检测技术及临床应用研究

该文研究了甘氨酰辅氨酸二肽氨基肽酶（GPDAEC．3．4．14．5）的最适反应条件，9次测定米氏常数（Km）值为（1．91±0．08）mmol／L，选用158mmol／LTris、64mmol/L，双甘氨肽，10mmol／L底物，pH8．6缓冲液，同时建立了手工法和自动化分析法，酶促反应速度在70min内呈线性，酶活力用手工法在750IU／L，内成线性，自动化分析法在1300IU/L，以下成线性，三份高、中、低值酶活力标本手工法及自动化分析法批内变异系数分别为1．7％～3．1％和0．7％～1．4％，批间变其分别为3.8％～6．7％和1．2％～4．4％。132例正常人GPDA为185．2±28．6（x±s），65例原发性肝癌组为408．0±216．1（x±s）明显高于正常组（P＜0．001）且与AFP水平无相关意义（r＝0．0361）．24例胃癌和59例肺癌分别为（99．5±16．6）IU／L和（11．8±23．0）IU／L，明显伏于正常组（P＜0．001）；并发现GPDA在食道癌及有门癌病人亦有下降趋势（P＜0．01）。

血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶对肝癌诊断价值的探讨

目的检测血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(GPDA)并探讨其对肝癌的诊断价值。方法采用连续监测法分别对30例原发性肝癌、胆石症、肺癌、肝硬化、慢性肝炎及15例胃癌患者血清GPDA进行测定。结果原发性肝癌患者的GPDA活性和阳性率比胆石症、肺癌、肝硬化、慢性肝炎及胃癌患者显著增高(P<0.01)。结论血清GPDA活性测定对原发性肝癌有一定辅助诊断价值。

血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶对慢性肝病诊断的价值

观察血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶 (GPDA)在慢性肝病中的变化 ,评价临床诊断价值。采用连续监测法测定 131例各类慢性肝病患者和 10 3名正常人血清GPDA活性 ,同步检测血清丙氨酸氨基转移酶 (ALT) ,进行比较分析。慢性肝炎轻度、中度、重度患者及原发性肝癌患者血清GPDA活性均高于正常对照组 ,差异有显著性意义(P均 <0 0 0 1) ,肝癌患者升高尤为显著 ;肝硬化代偿期和失代偿期患者GPDA水平与对照组无显著差异 (P >0 0 5 ) ;而ALT在慢性肝炎和肝硬化患者组均明显高于对照组 ,差异有非常显著性意义 (P均 <0 0 0 1) ,ALT升高的例数与倍数明显高于GPDA。血清GPDA对慢性肝炎的诊断及病情估计有一定的意义 ,但敏感性不如ALT。GPDA对肝硬化的诊断价值不大 。

血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶对原发性肝癌的诊断价值探讨

对 31例原发性肝癌 (PHC)、 32例肝硬化患者及 2 0例正常人进行了血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(GPDA)的活性测定 ,对 31例 PHC患者治疗前后 GPDA的含量进行了对比分析 ,并与甲胎蛋白 (AFP)的诊断价值进行对比。结果显示 ,GPDA对 PHC的诊断敏感性为 74.2 % ,优于 AFP诊断敏感性 6 7.7% ,特别是在 AFP阴性的 PHC患者中 ,GPDA的阳性率高达 6 0 % ,弥补了 AFP对

尿甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶对诊断肝硬化早期肾损害的意义

目的 探讨应用尿甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶 (GPDA)诊断肝硬化早期肾损害的临床价值。方法 用本室建立的尿GPDA测定方法 ,检测 74例肝硬化病人和 72例正常对照组 ,并与尿N 乙酰 β D 氨基葡萄糖苷酶 (NAG)进行比较。 结果 与正常对照组比较 ,肝硬化病人尿GPDA明显升高 ,差异有显著性意义 (P <0 .0 1) ,肝硬化失代偿组明显高于肝硬化代偿组。 74例肝硬化病人尿GPDA阳性检出率为 43 2 %,与尿NAG一致 ,尿GPDA与NAG呈显著正相关。结论 尿GPDA能敏感地反映肝硬化早期肾小管损伤 ,是一项具有良好临床应用价值的指标。

肝癌相关性甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶检测法

目的 :进一步探讨血清肝癌相关性 GPDA同工酶分离检测条件 ,提高其对原发性肝癌的诊断价值。方法 :对分离血清肝癌相关性 GPDA同工酶电泳体系的凝胶浓度及梯度、缓冲液的 p H及离子强度、电泳的环境温度、标本用量以及呈色条件等进行了逐项摸索 ,建立了稳定且分离效果好的 GPDA同工酶检测方法。结果 :采用三层阶段梯度聚丙烯酰胺凝胶体系将血清 GPDA分为肝癌相关性的快带 (GPDA- F)和非相关性的慢带 (GPDA- S) ,肝癌相关性 GPDA的检出率明显提高。结论 :肝癌相关性血清 GPDA检测法稳定可靠、敏感 。

甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶对良、恶性腹水诊断价值分析

对 6 9例良、恶性腹水中甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶 (GPDA)进行检测 ,并与 Tch、CEA检测比较。结果显示腹水 GPDA在恶性腹水组明显高于良性腹水组 ,分别为 5 5 .2± 30 .0 u/ ml和 19.8± 17.3u/ ml,P<0 .0 1。以 >35 u/ ml为界值诊断恶性腹水的敏感性为 94.4%,特异性为 96 .9%与 Tch相似 (P>0 .0 5 ) ,而明显优于 CEA,(P<0 .0 1)。研究表明 :腹水 GPDA为恶性腹水的新标记 。

脊髓损伤后大鼠甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶的表达及甲基强的松龙干预后的变化

目的:研究大剂量甲基强的松龙对脊髓损伤后甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶(glycylproline dipeptidyl aminopeptidase,GPDA)基因表达变化的影响。方法:Sprague-Dawley大鼠36只。将所有大鼠随机分为三组,假手术组、脊髓损伤未使用药物干预组(创伤组)、脊髓损伤+甲强龙干预组(甲强龙组)。在大鼠脊髓损伤后24h将损伤的脊髓组织切取,进行逆转录PCR反应并检测GDPA的表达。结果:假手术组GDPA的mRNA的表达的相对丰度为1.5403±0.1604;脊髓损伤24h后创伤组GDPA的表达的相对丰度为0.5994±0.3414,与假手术组相比差异有非常显著统计学意义(P<0.01);GDPA在脊髓损伤后使用甲强龙干预组中的表达相对丰度为1.8432±0.1294,与创伤组比较差异有非常显著统计学意义(P<0.01)。结论:大剂量甲基强的松龙的早期使用能促进脊髓损伤后甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶的表达恢复,发挥细胞保护作用。

乳腺癌患者血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶活性变化的研究

目的 探讨乳腺癌患者血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶 (GPDA )活性的变化及其在临床上的应用价值。方法 采用连续监测法 ,检测良、恶性乳腺肿瘤患者和健康人血清GPDA活性。结果 6 5例乳腺癌患者血清GPDA浓度为 (12 7.0± 2 1.6 )U /L ,健康人含量为 (90 .0± 18.5 )U /L ,两者间有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;良性乳腺肿瘤患者GPDA浓度为 (88.0± 2 4.2 )U /L ,与健康人比较无显著性差异 (P >0 .0 5 )。对患者GPDA动态观察结果 ,乳腺癌治疗后与治疗前比较GPDA含量有非常显著性差异(P <0 .0 1)。结论 乳腺癌患者血清GPDA活性的改变 ,对良、恶性肿瘤的鉴别及疗效观察均有一定的临床意义。

血与尿甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶比值在原发性肝癌诊断中的意义

目的探讨血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(GPDA)水平及血与尿GPDA比值在原发性肝癌诊断中的临床意义。方法测定15例原发性肝癌、32例急性肝炎、15例慢性活动性肝炎、11例肝硬化等肝脏疾病患者的血与尿的GPDA活性和甲胎蛋白(AFP),计算出血与尿GPDA比值并进行统计分析。结果原发性肝癌患者的血与尿GPDA比值明显高于对照组,诊断原发性肝癌时,以单项指标分析血与尿GPDA比值与AFP有相似的灵敏度(分别为80.0%和86.7%),二者均较血清GPDA活性(66.7%)高;如2项指标联合检测,可使敏感度提高到93.3%。结论血与尿GPDA比值与肿瘤标志物AFP联合检测对原发性肝癌的诊断有较好的应用价值。

尿甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶检测诊断肝硬化早期肾损害的临床价值

目的探讨尿甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶检测诊断肝硬化早期肾损害的临床价值。方法我院住院治疗的肝硬化患者68例,根据患者的血清胆红素、血清白蛋白浓度、腹水情况、食管静脉出血情况以及凝血酶原时间等指标,将患者分为代偿组35例,失代偿组33例。我院进行健康体检人员34例作为对照组。比较三组人员的尿甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶以及尿-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶水平。结果代偿组和失代偿组患者的尿甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶以及尿-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶水平均明显高于对照组(P<0.05)。代偿组患者的尿甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶以及尿-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶水平均明显高于失代偿组患者(P<0.05)。结论尿甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶对肾小管的早期损伤具有很高的敏感性,可以作为肝硬化早期肾损害的临床检测指标。

血清唾液酸、上皮膜抗原和甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶检测在胃癌诊断中的价值研究

目的:探讨检测血清唾液酸(SA),上皮膜抗原(EMA)和甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(GPDA)在胃癌诊断中的敏感性、特异性、准确度以及阳性似然比。方法:选取经电子胃镜及病理检查确诊的30例胃癌患者、25例胃癌前病变患者及35例非萎缩性胃炎患者,对其血清SA、EMA及GPDA分别进行测定,计算血清SA、EMA和GPDA单项及联合检测胃癌的敏感性,特异性,诊断准确度和阳性似然比,并比较其差异。结果:单项检测中以SA最敏感、GPDA的特异度和诊断准确率最高,其灵敏度、特异度和准确率分别为50.00%、97.14%和90.99%。且诊断价值最大(LR+=11.65)。联合检测SA,GPDA可以提高诊断灵敏度53.33%。血清EMA对胃癌诊断无差异。结论:检测血清SA和GPDA对于胃癌的诊断有重要参考价值,SA和GPDA的联合检测可提高胃癌诊断的准确性,检测血清EMA对胃癌诊断可能无价值。

联合检测血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶与胆碱酯酶对胃癌的诊断价值

目的 :探讨血清中甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶 ( GPDA)与胆碱酯酶活力测定对胃癌的诊断价值。方法 :采用速率法联合检测 76例经内镜活检及外科手术病理证实的胃癌患者血清中的GPDA及胆碱酯酶含量 (选 5 0例正常人血清作对照 ) ,并对胃镜检查及外科手术中癌肿生长情况进行分析。结果 :76例胃癌患者中 ,血清 GPDA值较平均值明显下降者 60例 ( 79% ) ,与未下降者比较差异有显著性 ( P<0 .0 5 ) ;胆碱酯酶值较平均值明显下降者 65例 ( 86% ) ,与未下降者比较差异有显著性 ( P<0 .0 1 ) ;66%胃癌患者血清中 GPDA及胆碱酯酶含量同时明显降低 ,与未同时下降者比较差异有显著性 ( P<0 .0 5 ) ;而正常对照组几乎正常或仅轻度降低。胃镜检查中发现 ,血清中GPDA及胆碱酯酶明显降低的患者癌肿多浸润超过一个解剖分区 ,且手术中发现 ,胃癌浸润深度多已超过浆膜层 ,并多有局部及 (或 )远处淋巴结转移。结论 :血清中 GPDA及胆碱酯酶可作为胃癌的标志物 ,对胃癌的筛查及胃癌患者预后的判定都有着重要的临床意义。

448例消化系统疾病中甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶的检测

目的探讨甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(GPDA)在消化系统疾病中检测的意义。方法用连续检测法检测448例我院消化科住院病人血清中GPDA的活性,比较分析各组病人GPDA结果。对胃溃疡组、正常人组、良性胃病各组结果进行了对比研究。结果胃癌组GPDA活力较健康组显著降低(P<0.01);胃溃疡组GPDA活力等有较大下降(P<0.05);肝癌组明显升高(P<0.01),食道肿瘤与健康组比较无显著性差异(P>0.05)。结论血清GPDA活力测定可以作为胃溃疡、胃癌等消化系统疾病的辅助诊断的指标之一。

尿甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶与高血压血清脂质的关系

目的探讨尿甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(GPDA)与高血压病患者血清脂质变化的关系。方法检测130例高血压病患者,98名正常人(为对照组)的尿GPDA和血清脂质的水平。结果高血压病患者尿GPDA明显高于正常对照组(P<0.001)。尿GPDA升高的高血压病患者血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、胆固醇/高密度脂蛋白胆固醇比值(TC/HDL-C)、LDL-C/HDL-C比值、载脂蛋白B(apoB)、脂蛋白(a)犤Lp(a)犦水平均高于尿GPDA正常的高血压病患者组和正常人对照组,而HDL-C、载脂蛋白A1(apoA1)、apoA1/apoB比值则均低于尿GPDA正常的高血压病患者组和正常人对照组。结论高血压病患者尿GPDA水平可能反映其脂质代射水平。