苹果树皮内生链格孢Al67对苹果树腐烂病的生防潜力研究

为明确苹果树皮内生链格孢菌株Al67的种类及对苹果树腐烂病的生防作用,将Al67进行单孢分离并以分生孢子形态及产孢表型特征为主要分类依据进行种级鉴定;并通过玻片对峙培养试验测定其对苹果树腐烂病菌(Valsa ceratosperma)菌丝生长的抑制作用方式;利用离体枝条和田间试验测定其培养滤液对苹果树腐烂病的防治效果。经形态学鉴定,Al67为落葵链格孢(Alternaria basellae),Al67对苹果树腐烂病菌丝生长的抑制率为47.88%;显微观察显示,Al67可导致苹果树腐烂病菌丝畸形及原生质外溢;田间试验结果显示,Al67的无菌培养滤液对苹果树腐烂病的保护和治疗作用防效分别为80.60%和70.47%,对已有病斑的铲除效果达41.67%。苹果内生链格孢Al67对苹果树腐烂病菌有显著的抑制作用,培养滤液处理对苹果树腐烂病具有良好的田间防效,表明该菌株具有良好的生防潜力。

苹果树皮中12种酚类化合物的HPLC测定方法

【目的】为了建立高效液相色谱法(HPLC)同时测定苹果树皮中没食子酸、儿茶酚、儿茶素、绿原酸、咖啡酸、表儿茶素、香豆酸、阿魏酸、芦丁、根皮苷、槲皮素、根皮素12种酚类化合物的方法,【方法】选用Eclipse XDB C18色谱柱(150 mm×4.6 mm i.d,5μm),以甲醇和1%乙酸溶液作为流动相进行梯度洗脱,利用VWD检测器,在各种酚类物质的最优吸收波长下进行检测,【结果】得到12种酚类化合物的线性回归方程,相关系数均在0.999以上,检出限(3RSN)分别为0.02、0.02、0.03、0.01、0.02、0.03、0.01、0.01、0.03、0.03、0.05和0.01 mg.L-1。色谱测定方法和包含样品处理方法的加标回收率分别在56.54%～98.83%和90.95%～100.90%。【结论】整个提取和分析测定流程简便、快速、准确,适合苹果树皮中酚类化合物的分析测定。

正交试验法优选苹果树皮中根皮素的提取研究

分别采用浸提法、微波法、超声波法和回流法提取苹果树皮中根皮素,利用高效液相色谱测定含量,确定最适提取方法,并考察了盐酸水解对提取效果的影响。通过单因素实验和正交试验L1(645)确定最优提取工艺。结果表明:最佳提取方法为加热回流法,最佳提取工艺为:以体积分数90%乙醇和1.08%的盐酸混合溶液为提取溶剂,在料液比1∶15(g∶mL)的条件下,回流提取3次,每次2h,根皮素的得率为11.8mg/g。

苹果树皮化学成分研究

目的:研究苹果树皮的化学成分。方法:运用薄层色谱、硅胶柱层析、HPLC等方法进行分离纯化,依据理化性质及波谱数据分析鉴定结构。结果:从苹果树皮中分离鉴定了20个化合物,分别鉴定为:根皮苷(1)、3β-羟基-豆甾-5-烯-7-酮(2)、2α,3α,19α,23-四羟基-12-烯-28-乌苏酸(3)、6-甲氧基槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷(4)、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷(5)、儿茶素(6)、根皮素(7)、根皮素-2′-木糖葡萄糖苷(8)、(6S,9R)-长寿花糖苷(9)、苯甲酸-β-D-葡萄糖苷(10)、canthoside A(11)、根皮素-2-O-β-D-芹菜糖-(1→6)-β-D-葡萄糖苷(12)、5-羟基-色原酮-7-O-β-D-葡萄糖苷(13)、(3R^(∗),6R^(∗))-四氢-6-乙烯基-2,2,6-三甲基-吡喃-3-O-α-L-阿拉伯糖-(1→6)-β-D-葡萄糖苷(14)、4-羟基-3,5-二甲氧基苯酚-1-O-α-L-阿拉伯糖-(1→6)-β-D-葡萄糖苷(15)、苯乙醇-8-O-β-D-葡萄糖苷(16)、(6R,9S)-3-氧代-α-紫罗兰醇-β-D-葡萄糖苷(17)、丁香树脂酚(18)、吐叶醇-3′-O-β-D-芹菜糖-(1→6)-β-D-葡萄糖苷(19)、肌醇(20)。结论:其中,化合物2、11、15、18、19为首次从蔷薇科植物中分离得到,化合物3、9、14为首次从苹果属植物中分离得到。

苹果树皮正己烷提取物化学成分研究

采用硅胶柱色谱及HPLC等分离方法对苹果树皮正己烷提取物进行分离纯化,得到6个单体化合物,依据波谱数据分析鉴定它们的结构分别为:木栓酮(1),羽扇豆醇(2),3-β-齐墩果醇(3),软脂酸(4),3-β-齐墩果醇-18-烯(5),β-谷甾醇(6)。其中化合物3,4,5为首次从苹果属植物中分离得到,化合物1为首次从该植物中分离得到。

基于YOLOv5s和Android的苹果树皮病害识别系统设计

【目的】针对果园多种苹果树皮病害实时检测的需求,设计基于Android的苹果树皮病害识别APP以便进行果园精准管理。【方法】通过网络查找和实地拍摄收集轮纹病、腐烂病、干腐病3种病害的图片数据,经扩增和标注后按照8∶2比例进行训练集和测试集的划分。使用YOLOv5s算法训练苹果树皮病害识别网络模型,对训练得到的轻量级网络模型进行Android端部署,并设计相应APP界面,实现对轮纹病、腐烂病、干腐病的快速诊断。【结果】训练后得到的深度学习网络模型识别效果良好,准确率稳定在88.7%,召回率稳定在85.8%,平均精度值稳定在87.2%。其中腐烂病准确率为93.5%,干腐病准确率为88.2%,轮纹病准确率为84.3%。将其在Android端部署后,每张病害图片处理时间均小于1 s,检测置信度为87.954%。该轻量级识别系统不仅实现了3种病害的快速检测,也保证了较高的识别精度。【结论】YOLOv5s网络权重模型小,能够轻松实现Android端的部署,且基于YOLOv5s设计的APP操作简单、检测精度高、识别速度快,可以有效辅助果园精准管理。

红富士苹果树皮中的根皮苷的提取及抗氧化活性研究

将红富士苹果树皮分别采用热水和甲醇浸泡提取,提取液浓缩后分别经乙酸乙酯、正丁醇以及它们的混合溶剂萃取制得多种不同溶剂萃取物,利用HPLC对各种提取物进行分析的结果,80℃热水浸泡提取,提取液冷却至室温后用乙酸乙酯-正丁醇=2/1的混合溶剂萃取,制得的提取物中根皮苷含量可达59.7%。通过对DPPH自由基的清除实验表明,红富士苹果树皮各种溶剂提取物显示一定的抗氧化活性,其中用甲醇室温浸泡提取,制得的正丁醇萃取物抗氧化活性最好,IC50值为160μg/mL。

苹果树皮内生真菌的分离及其对腐烂病的生物防治潜力

为了明确苹果树皮中内生真菌的种类及其对苹果树腐烂病菌的抑制作用,对25年生富士苹果健康树皮中的内生真菌进行了分离和初步鉴定,并通过室内抑菌试验和田间保护作用试验测定其内生真菌对苹果树腐烂病菌的抑制作用。分离到的126株内生真菌分属于13个属,主枝中分离到的内生真菌的种类和数量较多;对峙试验中对苹果树腐烂病菌的抑菌率在40%以上的有24株,其中87.5%的菌株为链格孢属真菌。Al 6的培养滤液对腐烂病菌菌丝生长抑制作用较强,抑制率为83.76%;Al 58对其孢子萌发抑制作用较大,抑制率为82.42%;Al 67产生的挥发物质对腐烂病菌菌丝生长的抑制作用较大,为24.41%。田间试验结果显示,用拮抗性内生真菌预先占位接种苹果树枝干,能有效抑制腐烂病菌的侵入和病斑的扩展,Al 107的抑制作用最强。