花椒根腐病拮抗菌W-5的鉴定及发酵条件的优化

腐皮镰刀菌(Fusarium solani)是引起花椒根腐病的主要致病菌,该病严重威胁着花椒产业的发展。为筛选出花椒根腐病的生防菌株,本研究采用土壤平板梯度稀释法和平板对峙法从花椒根系土壤中筛选出对腐皮镰刀菌具有拮抗作用的菌株,通过形态特征观察结合16S rDNA基因序列分析对菌株进行分类地位确定,并在单因素试验基础上结合Box-Behnken中心组合设计的响应面法优化拮抗菌株的发酵条件。结果表明,分离获得的菌株W-5为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),且该菌对腐皮镰刀菌的抑制率达到82.7%,对其他植物病原菌(禾谷镰刀菌、梅毒镰刀菌、藤仓赤霉菌、松针刺盘孢菌和层生镰刀菌)均有较高的抑菌活性,说明其抑菌谱的广泛性;能够分泌蛋白酶和纤维素酶且产嗜铁素能力极强,能够减轻离体培养下花椒根片的发病症状;响应面法优化后的菌株W-5的最佳发酵条件为:温度31.3℃、pH值7.5、接种量3.1%、转速180.5 r/min,此条件下OD_(600)值达到1.832。综之,拮抗菌W-5对花椒根腐病防效优良,具有生防潜力,建立并优化的拮抗菌W-5的发酵条件体系可为花椒根腐病生物药剂的研制提供技术参考。

曼陀罗内生真菌Fusarium solani MBM-5活性次级代谢产物研究

该文对木本曼陀罗内生真菌Fusarium solani MBM-5(茄腐皮镰刀菌)的次级代谢产物进行了化学及生物活性研究。运用多种色谱方法(如开放ODS柱色谱、硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱及半制备型HPLC等),从F.solani MBM-5培养物的乙酸乙酯萃取物中共分离得到6个烯酸类化合物,包括1个新化合物和5个已知化合物。利用化合物的理化常数和波谱学(UV、IR、NMR、HR-ESI-MS等)方法及Mosher′s反应,鉴定了化合物结构,分别为fusaridioic acid E (1)、fusaridioic acid C (2)、fusaridioic acid A (3)、L660282 (4)、hymeglusin (5)、hymeglnone (6),其中化合物1为新化合物。采用MTT法和Griss法,分别评价了所有化合物对2种肿瘤细胞的生长抑制作用,以及对脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞RAW264.7释放NO的影响及其抗炎作用。实验结果表明,化合物5对A549和HepG2细胞株具有较强的生长抑制活性(IC_(50)分别为4.70、13.57μmol·L^(-1)),并且化合物1和6可显著抑制LPS诱导RAW264.7细胞的NO释放量,其IC_(50)分别为77.00、70.33μmol·L^(-1)。