茅莓分散片的制备及溶出度测定

目的 优选茅梅分散片的制备工艺,并测定其溶出度。方法 在单因素试验的基础上,以微晶纤维素(MCC)、交联聚乙烯吡咯烷酮(PVPP)、低取代羟丙基纤维素(L-HPC)为影响因素,崩解时间为评价指标,采用中心复合设计-效应面法优化茅莓分散片的处方工艺。再以茅莓总皂苷为指标,参考中国药典方法测定溶出度。结果最优处方工艺为茅莓总皂苷浸膏粉用量为36.9%,MCC用量为42%,PVPP用量为13%,L-HPC用量为8%,微粉硅胶用量为0.1%,模型相关系数较高。所制分散片崩解时间小于3 min,在50 min时,累积溶出度达到88%以上。结论 优选工艺稳定可靠,可用于茅莓分散片的制备。

基于多指标综合评分法优选茅莓根水提工艺

目的:优选茅莓根的水提工艺。方法:建立茅莓根水提液中表儿茶素含量的高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定方法,采用正交设计法,以干膏得率和表儿茶素含量的综合评分为评价指标,考察浸泡时间、加水量、煎煮次数及煎煮时间4个影响因素对茅莓根水提工艺的影响,确定最佳的水提工艺并进行工艺验证。结果:表儿茶素浓度在15.044~300.88μg/mL内线性关系良好(r2=0.9998),平均回收率为101.7%,RSD为2.57%;茅莓根的最佳水提工艺为加10倍量水,浸泡0.5 h,煎煮3次,每次0.5 h;3份茅莓根饮片水提工艺验证试验的综合评分分别为0.78、0.76、0.77分,干膏得率和表儿茶素含量的RSD均小于2%(n=3)。结论:建立的表儿茶素含量测定方法准确、稳定、重复性好,优选的茅莓根水提工艺稳定可行,可为茅莓根的制剂研究与质量控制提供参考。

茅莓及其总皂苷对K562白血病细胞体内外作用的实验研究

目的:从体内和体外实验探究茅莓及其总皂苷的抗白血病肿瘤效应。方法:应用已建立的荷白血病瘤裸鼠模型,观察不同浓度茅莓水煎液治疗荷白血病瘤裸鼠后瘤体体积、重量、组织病理的影响;半固体琼脂培养观察不同浓度的含药血清和茅莓总皂苷对K562细胞株集落生长的影响;MTT法观察不同浓度的含药血清和茅莓总皂苷对K562细胞株的增殖作用的影响。结果:低中高剂量茅莓水煎液(0.5g/mL,1g/mL,2g/mL)治疗荷瘤裸鼠后,瘤重分别为(0.95±0.13)g、(0.49±0.09)g和(0.33±0.01)g,抑瘤率分别为57.55%、75.40%和87.16%,抑制效应呈剂量依赖性方式;HE染色治疗组瘤体内可见多个坏死灶,瘤细胞肿胀、破裂,细胞核溶解、消失;琼脂半固定集落培养发现不同浓度含药血清及茅莓总皂苷均能抑制K562细胞株集落形成,抑制效应呈剂量依赖性方式,其中终浓度为10%和20%的含药血清抑制集落形成率为(21.6±2.2)%和(48.8±1.2)%,与对照组相比差异有统计学意义(P均<0.05),20 mg/L茅莓总皂苷抑制集落形成率为(22.5±1.9)%,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),且当浓度增加至150mg/L时,无集落形成;MTT示不同浓度的含药血清及茅莓总皂苷均能抑制K562细胞株的增殖,呈剂量依赖性方式,其中20%的含药血清可明显抑制K562细胞增殖,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),20mg/L浓度的茅莓总皂苷能明显的抑制K562增殖,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:茅莓水煎剂对荷白血病瘤裸鼠瘤体生长有明显抑制作用,且一定浓度的含药血清和茅莓总皂苷对K562集落形成和增殖均有明显的抑制作用,为临床用药提供了一定的理论依据。

金叶茅莓

2021年12月初,被网上一张金叶茅莓(图1)美图吸引,买了一棵金叶茅莓的10厘米育苗盆小苗,当时天气已经转凉,叶片金灿灿的非常好看。收到苗后,立刻换到了15*10厘米的小盆定植,翻盆时,看得出根系非常发达(图2)。整个冬季,生长速度并不算太快,不过,随着气温逐步转暖,叶片慢慢从金黄色,变成嫩绿色(图3)。

茅莓根和叶挥发油抑菌活性的研究

通过最小抑菌浓度试验,研究茅莓根和叶挥发油的抑菌活性。结果表明,茅莓叶对大肠杆菌、巴氏杆菌有明显的抑菌活性,最小抑菌浓度(MIC)分别为10^(-7)g/mL、10^(-6)g/mL,优于链霉素(10^(-3)g/mL、10^(-5)g/mL)和黄胺类(10^(-4)g/mL、10^(-6)g/mL)。

茅莓化学成分的分离鉴定

目的研究茅莓RubusparvifoliusL的化学成分。方法采用柱色谱和制备型高效液相色谱进行分离纯化,通过理化方法和光谱分析鉴定化合物结构。结果从茅莓的乙醇提取物中分得4个三萜成分和1个二糖成分,分别鉴定为suavissimosideR1(1),nigaichigosideF1(2),camelliageninA(3),camelliageninC(4)和sucrose(5)。结论化合物3～5均为首次从该植物中分得。

茅莓叶和根挥发油的主要化学成分

对茅莓根和叶挥发油中主要化学成分进行研究,并进行比较。用水蒸气蒸馏所得的油状物,通过气相色谱—质谱联用技术对其主要化学成分及其含量进行分析。鉴定了叶20种和根10种的主要化学成分。茅莓叶挥发油的主要化学成分除了含量较多的有机酸,还有醇、内酯、醛、酮等其它成分;而茅莓根的主要化学成分是有机酸酯和烷烃。因此推测叶的抑菌活性可能与酚性成分和内酯有关。

茅莓总皂苷对大鼠局灶性脑缺血/再灌注后神经细胞凋亡及相关蛋白Bcl-2、Bax表达的影响

目的探讨茅莓总皂苷对缺血性脑损伤的神经保护机制。方法采用大鼠大脑中动脉阻塞造成局灶性脑缺血2h,再灌注24 h模型,以HE染色,TUNEL标记和免疫组化的方法观察茅莓总皂苷5、10、20 mg.kg-1对凋亡细胞数目及相关蛋白Bc l-2,Bax表达的变化。结果3个剂量的茅莓总皂苷治疗组显示神经元形态病理改变明显减轻,降低残存细胞中TUNEL阳性细胞的百分率。增加Bc l-2阳性细胞的表达,降低Bax阳性细胞的表达,Bc l-2/Bax的表达比例增加。结论茅莓总皂苷有明显的抗凋亡作用,其机制可能与增加Bc l-2阳性细胞的表达,降低Bax阳性细胞的表达,提高Bc l-2/Bax有关。

茅莓化学成分研究

目的:研究茅莓的化学成分。方法:利用硅胶柱层析色谱进行分离纯化,通过波谱分析鉴定化合物结构。结果:从茅莓中分离得到了7个化合物,分别是:β-谷甾醇(Ⅰ)、月桂酸(Ⅱ)、邻硝基苯酚(Ⅲ)、β-胡萝卜苷(Ⅳ)、蔷薇酸(Ⅴ)、3β,16α2,2α,28-四羟基齐墩果-12-烯(Ⅵ)和(+)-儿茶素(Ⅶ)。结论:其中,化合物Ⅲ、Ⅶ为首次从该植物中分离得到。

茅莓黄酮液相色谱-电喷雾质谱与薄层色谱-表面增强拉曼光谱研究

采用紫外光谱定性定量分析野生植物茅莓主要有效成分黄酮化合物,并对其进行液相色谱-电喷雾质谱联用、薄层色谱原位表面增强拉曼散射研究。液相色谱流动相A:CH3OH,B:H2O+1%乙酸,液相色谱流出时间16.21 m in的化合物为六羟基双氢黄酮醇二聚体形式,分子量640,占总黄酮的91.71%;流出时间19.61 m in的化合物分子量448,为槲皮甙,占总黄酮的8.29%。茅莓总黄酮经聚酰胺薄层色谱板分离,获得两个斑点:R f1=0.14,R f2=0.47;分别制备灰银胶和溴化银光致还原银溶胶表面增强基底,在样品薄层色谱两个斑点原位分别获得2种黄酮化合物的表面增强拉曼光谱,在2种表面增强基底作用下,都能观察到μg量黄酮化合物特征拉曼光谱,并比较了2种色谱分离与指纹检测联用技术。

茅莓总皂苷对黑色素瘤的抗肿瘤作用研究

目的:评价茅莓总皂苷对黑色素瘤的体内、外抗肿瘤药效作用。方法:A375人恶性黑色素瘤细胞体外常规传代培养,随机分5组,分别加入环磷酰胺,茅莓总皂苷高、中、低(0.01,0.001,0.000 mg.mL-1)3个质量浓度,以不加药作阴性对照,MTT法检测茅莓总皂苷的体外抗肿瘤作用;用B16黑色素瘤细胞移植小鼠,随机分阳性药(环磷酰胺)组,茅莓总皂苷高、中、低(100,50,25 mg.kg-1)剂量组及阴性药(生理盐水)组,观察体内抑瘤效果、荷瘤小鼠生存时间和生命延长率;同时采用TUNEL法检测茅莓总皂苷对B16黑色素瘤细胞凋亡的影响。结果:体外抑瘤试验显示,高、中质量浓度茅莓总皂苷组与阴性对照组比较,P<0.05,有统计学意义;体内抑瘤试验显示,高剂量组平均瘤体积明显低于阴性对照组(P<0.05),抑瘤率37.02%;荷B16黑色素瘤小鼠用茅莓总皂苷治疗后存活时间增加;茅莓总皂苷高、中、低剂量组黑色素瘤细胞凋亡指数分别为32.5%,20.5%和5.5%,与阴性对照组(3.5%)比较差异有统计学意义。结论:茅莓总皂苷对体内、外黑色素瘤细胞有抑制作用,并呈量效依赖关系,能通过促进黑色素瘤细胞凋亡而发挥抗肿瘤活性。

茅莓总皂苷对大鼠局灶性脑缺血的保护作用

目的:研究茅莓总皂苷(TGRP)对局灶性脑缺血的保护作用。方法:采用大脑中动脉阻塞(MACO)法制备大鼠局灶性脑缺血模型;脑梗死区重量用TTC染色法测定,超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及细胞凋亡均采用测试药盒测定。结果:TGRP 10,20 mg.kg-1可改善大鼠异常神经症状,使MACO大鼠的SOD,GSH-Px活力提高,MDA生成减少,减少脑皮层细胞凋亡数。结论:TGRP对脑梗死有保护作用,其作用机制可能与抗自由基、抑制细胞凋亡有关。

茅莓总皂苷对大鼠海马神经元细胞缺氧损伤后胞内钙超载的影响

目的研究茅莓总皂苷对原代培养大鼠海马神经元缺血损伤后胞内钙超载的影响。方法大鼠海马神经元培养后,用Fluo-2/AM负载培养的神经细胞,氧糖剥夺30min,在激光共聚焦显微镜下监测加入茅莓总皂苷后海马神经元的[Ca2+]i的变化。结果茅莓总皂苷10-5,10-4,10-3g·L-1和Nim10-5mol·L-1组能不同程度地降低大鼠海马神经元细胞内[Ca2+]i。结论茅莓总皂苷可通过减轻细胞内的钙超载来对缺血神经元进行保护。

中药茅莓化学成分的研究

从茅莓根中分得２个结晶，根据光谱和化学反应，分别鉴定为ｎｉｇａ－ｉｃｈｉｇｏｓｉｄｅＦ＿１和ｓａｕｖｉｓｓｉｍｏｓｉｄｅＲ，均为首次在该植物中分得。

茅莓总皂苷对三种皮肤肿瘤的体外抗肿瘤作用

目的评价茅莓总皂苷对三种皮肤肿瘤的体外抗肿瘤药效作用。方法用A375黑色素瘤细胞、Hut-78人皮肤T细胞淋巴瘤细胞和A431人表皮癌细胞为癌细胞株,观察茅莓总皂苷的体外抗肿瘤作用。结果茅莓总皂苷对A375黑色素瘤细胞和Hut-78人皮肤T细胞淋巴瘤两种皮肤肿瘤细胞的增殖有明显的抑制作用,与对照组比较差异有显著性(P<0.05);对人表皮肤癌细胞无明显抑制作用。结论茅莓总皂苷对A375黑色素瘤细胞和Hut-78人皮肤T细胞淋巴瘤两种皮肤肿瘤细胞有明显的抗肿瘤活性。

茅莓总皂苷的含量测定

目的:建立茅莓总皂苷的含量测定方法。方法:通过对样品采用不同溶剂及不同提取方法所得的提取液显色后,以分光光度法测定总皂苷的含量。结果:本法测定的线性范围为22-176μg(r=0．9997);平均回收率为102．1％,RSD=2．82％ (n=6);样品以70％乙醇回流提取所得的总皂苷含量最高。结论:该方法灵敏、可靠,显色后的样品比较稳定,可用于茅莓药材的质量控制及品质评价。

茅莓总皂苷对局灶性脑缺血再灌注大鼠兴奋性氨基酸含量的影响

目的:研究茅莓总皂苷对局灶性脑缺血再灌注大鼠兴奋性氨基酸(EAA)含量的影响。方法:将大鼠随机分为茅莓总皂苷5,10,20mg.kg-1组及尼莫地平10mg.kg-1组、模型组和假手术组。灌胃给药3d,采用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,相应时间断头取脑。采用高效液相法测定大鼠脑组织中天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)的含量。结果:缺血对照组天冬氨酸、谷氨酸含量明显高于治疗组。结论:茅莓总皂苷对脑缺血再灌注损伤有保护作用。其可能的机制为:干扰脑缺血再灌注损伤中EAA代谢而发挥脑保护作用。

梵净山野生茅莓果的感官评价及营养成分分析

对梵净山野生茅莓果叶进行了感官评定分析和营养成分分析,结果表明茅莓果水分含量为82.08%,总糖含量为12.46%,总酸含量为0.76%,蛋白质含量为0.81 g/100 g,总酚含量为161.06 mg/g,VC含量为26.75 mg/100 g;茅莓叶所含水分为79.69%,总糖为2.15%,总酸为1.95%,蛋白质为0.77 g/100 g,总酚为136.05 mg/g,VC含量为37.80 mg/100 g。试验结果对综合研究及开发茅莓资源具有一定意义。

茅莓总皂苷对局灶性脑缺血/再灌注大鼠的比较蛋白质组学研究

目的采用蛋白质组学技术研究茅莓总皂苷对脑缺血/再灌注大鼠脑组织差异蛋白的影响,进一步揭示茅莓总皂苷的脑保护作用及抗损伤修复机制。方法建立脑缺血/再灌注大鼠动物模型,分别提取蛋白质后进行2-DE电泳分离,应用相关软件比较分析,找出差异蛋白,酶切消化后进行肽指纹图谱分析,通过数据检索,初步鉴定差异蛋白质。结果与模型组比较,茅莓总皂苷组找到29个差异点,其中18个蛋白点表达上调,11个蛋白点表达下调,鉴定了其中7个蛋白。结论茅莓总皂苷对脑保护作用及抗损伤修复机制的机制是多个蛋白质共同参与的结果。

茅莓总皂苷对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑水肿及血-脑脊液屏障变化的影响

目的:研究茅莓总皂苷(TSRP)对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑水肿及血脑屏障通透性的影响。方法:采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,在大鼠脑缺血2 h再灌注6,24,48,72 h分别测定脑含水量和伊文思蓝含量的变化及茅莓总皂苷各剂量组的影响。结果:与模型组比较茅莓总皂苷各剂量组均能不同程度降低脑含水量和伊文思蓝含量。结论:茅莓总皂苷各剂量组显著降低缺血2h再灌注6,24,48,72 h脑水肿和其对血脑屏障通透性,这可能是其减轻I/R时脑水肿的机制之一。